小鼠巨噬细胞的表型检测
实验步骤基 本 方 案 直 标 法 检 测 小 鼠 巨 噬 细 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 离心机I . 准 备 4 只 12m m X 75m m 试管，将试管编号为 1〜4。每 管 中 加 入 2 X IO7个细胞/ml细胞悬液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻断 I g G 4ul， 4°C 孵育 lOmin。3 . 按 表 6. 2. 2 所示 ，在 1 号 和 2 号管中加入适量的生物素偶联的单抗，然 后 将 1 号 、 2号 和 3 号试管冰浴 15 min。4 . 在 4 号管中加人 5M1 E M A ，混匀。将 试 管 置 白 炽 灯（如 40W 白炽灯）18c m 远 处 ，室 温 lOmin。E M A 只 能 进 入 死 细 胞 。 利 用 死 细 胞 的 强 染 色 性 ， 在 F L l 和 F L 3 双 变 量 散 点 图上 可 与 活 细 胞 相 区 分 。5 ......阅读全文
小－鼠－巨－噬－细－胞－的－表－型－检－测
实验步骤基 本 方 案 直 标 法 检 测 小 鼠 巨 噬 细 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 离心机I . 准 备 4 只 12m m X 75m m 试管，将试管编号为 1〜4。每 管 中 加 入 2 X IO7个细胞/ml细胞悬液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
小－鼠－巨－噬－细－胞－的－分－离
实验步骤基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠，洁 净 环 境 中 饲 养（最好置层流柜中饲养）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 盐 肉 汤（Brewerthioglycollate medium，分离炎性腹腔巨嗤细
巨－噬－细－胞－一－氧－化－氮－的－检－测
实验步骤基本方案材料展开
P－C－R－检－测－小－鼠－T－细－胞－受－体－表－达
实验步骤 基本方案 I P C R 分析小鼠 T C R 基因表达材 料正常小鼠的组织匀浆或者是 H B S S 制备的单个细胞悬液（IO4〜IO7) (附 录 1)无菌水展开
巨－噬－细－胞－抗－肿－瘤－活－性－的－检－测
实验步骤基本方案 [111In] 释放法检测巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用材 料辅助方案 [111In ] 标记肿瘤靶细胞材 料展开
巨－噬－细－胞－吞－噬－功－能－和－杀－伤－功－能－的－检－测
实验步骤基本方案1 巨噬细胞吞噬功能的检测材 料单核/巨噬细胞：如巨噬细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞[单元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸盐肉汤]，或 人 P B M C (单 元 8.1)平衡盐溶液（balanced salt solution， BSS)细菌（如单核
ELISPOT方－法－检－测－分－泌－细－胞－因－子－的－细－胞
实验步骤基本方案材 料包被缓冲液洗液：含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻断缓冲液：含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培养基（或其他适宜培养基）分泌细胞因子的细胞（小鼠或人的）丝裂原，抗原或其他促细胞因子分泌的刺激物带有标记物的
流－式－细－胞－仪－检－测－全－血－的－人－淋－巴－细－胞
实验步骤基本方案材 料（打 V 项 目 见 附 录 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠，过滤除菌单 克 隆 抗 体（标记的，未标记的或生物素化的），通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗（仅用于未标记的一抗）F T T C 标记的链霉
细－胞－毒－性－T－淋－巴－细－胞－的－诱－导－及－检－测
实验步骤基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意：反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源：未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源：未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培
B－细－胞－分－泌－抗－体－的－检－测
实验步骤基 本 方案材 料外周 血 单 个 核 细 胞（P B M C ; 单 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培养基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 养 板（Costar)1 . 计 数 PBMC (附录 3A ) ， 用 RPMI-5 完全培养基调整浓度至 4 X 10
P－C－R－检－测－人－T－细－胞－受－体－基－因－的－表－达
实验步骤 基 本 方 案 PCR检 测 人 T 细胞受体基因的表达展
BrdU－检－测－丁－细－胞－和－B－细胞增殖
实验步骤基本方案材 料实验动物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液（口 服用）或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液（注射用)P B S ， p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D
NK/L－A－K－细－胞－杀－伤－活－性－的－检－测
实验步骤基 本 方案 51C r 释 放 法检 测 NK/LA K 细胞杀伤活性材 料展
B－细－胞－功－能－的－增－殖－检－测－方－法
实验步骤基 本 方 案 抗 I g M 与 L P S 刺激的 B 细胞增殖材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)纯化的静息 B 细 胞（单 元 2. 5)，采 用 Percoll 梯度离心制备V D M E M -10 完全培养基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
PCR－检－测－细－胞－因－子－m－R－N－A－的表达
实验步骤基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表达水平材 料内参照：转 录 质 粒 载 体（含有临床生物检测标本相关的c D N A )胍盐溶液50 U/ul RNasin5 X 反转录酶缓冲液0.5m g / m l olig (d T )16l m g /m l 乙酰化的B S A4d N
干细胞的鉴定实验——流－式－细－胞－仪－检－测－分－析－技－术
实验步骤流 式 细 胞 仪 检 测 分 析 技 术实 验 材 料(1) 不同来源的干细胞，细胞数不少于 5xl0 5 个/管。(2) 荧光标记的抗体或抗体及荧光二抗。(3)PBS。实 验 步 骤(1) 将 细 胞 用 PBS 充分洗涤后重悬于 5000 PBS 中，如果细胞收集和鉴定不能同天完成，可
小鼠巨噬细胞的分离
基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠，洁 净 环 境 中 饲 养（最好置层流柜中饲养）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 盐 肉 汤（Brewerthioglycollate medium，分离炎性腹腔巨嗤细胞用）7
IL－2－和－IL－4－的检测实验
实验步骤基 本 方 案 采 用 CTLL- 2 细 胞 检 测 小 鼠 IL - 2 和 IL -4材 料较 总 T C G F 和 抗 IL-4 存在时的 T C G F 单位数获得。通过比较抗 IL-4 抗体存在下的T C G F 活性和两种抗体都存在下的 T C G F 活性的不同来计算 IL
人单核/－巨噬细胞的表型检测
基本方案材料待 测 单 个 核 细 胞（肝素抗凝血或肝素抗凝骨髓）或 外 周 血 单 个 核 细 胞（单 元 8.1)或者单核/巨 噬 细 胞（单 元 8. 5 , 推荐采用阴性分选）PBSPBS/肝素：含 0.1% (V/V ) 肝 素 的 PBS阻 断 IgG，浓 度 3 mg/ml (如正常小
人单核/－巨噬细胞的表型检测
实验步骤基本方案材料待 测 单 个 核 细 胞（肝素抗凝血或肝素抗凝骨髓）或 外 周 血 单 个 核 细 胞（单 元 8.1)或者单核/巨 噬 细 胞（单 元 8. 5 , 推荐采用阴性分选）PBSPBS/肝素：含 0.1% (V/V ) 肝 素 的 PBS阻 断 IgG，浓 度 3 mg/ml (
T－细－胞－克－隆－的－建－立
实验步骤基本方案 1 产生和维持同种反应性 T h 和 CTL 克隆尽管同种反应性 T 细胞可以从未刺激的脾细胞或淋巴结细胞中产生，但如果细胞在初次混合淋巴细胞（M L C ) 中第一次被同种抗原刺激，反应细胞的得率会更高。见以下介绍。材 料同种反应性小鼠脾脏 T 细胞V H B S S (可选使用
胞质小RNA的概念
中文名称胞质小RNA英文名称small cytoplasmic RNA;scRNA定 义细胞质中的小分子RNA。通常指转移核糖核酸(tRNA)和小的核糖体RNA(rRNA)，如5S rRNA、5.8S rRNA等。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
小鼠巨噬细胞的活化
巨噬细胞的活化经历两个阶段：致敏阶段和激活阶段。活化巨噬细胞的方案多采用一 步 法 （致敏并且激活），本方案则明确区分巨噬细胞活化的这两个阶段。经过一段时间 诱 导 后 （48〜72h) ，可 检 测 巨 噬 细 胞 对 病 原 体 （如寄生虫或细菌；单 元 6. 5 和 6. 6)的杀伤作用或所合
HIV的检测与分析_在单核细胞和巨噬细胞中培养－HIV
实验步骤基 本 方 案 单 核 细 胞 来 源 的 巨 噬 细 胞 培 养 和 H IV 感染药物或生长因子的加入时间依试剂及实验方案而定，单核细胞通常在分离的当天加入 ，成熟的单核细胞来源的巨卩蜜细胞（monocyte-derived macrophages， M D M ) 则在H I V 感染
Fcγ－受－体－介－导－的－黏－附－作－用－和－吞－噬－作－用－的－检－测
实验步骤基本方案 FcY 受体介导的吞噬作用材 料原代巨噬细胞或巨噬细胞株（单 元 6.1 和 8. 5)R P M I -5 完 全 培 养 基（或其他培养基）绵 羊 红 细 胞（S R B C ) ，用 Alsever 溶 液 I : I (V /V ) 稀 释（附 录 1)生理盐水： 0. 9
敌鼠钠盐速测盒说明
敌鼠钠盐速测盒【简 介】敌鼠钠盐为淡黄色粉末，无臭无味，可溶于热水和乙醇等有机溶剂。敌鼠钠盐是目前应用最广泛的第一代抗凝血杀鼠品种之一。本方法适用于食物、水及中毒残留物中敌鼠钠盐的快速检测。【检 测 原 理】敌鼠钠盐又名敌鼠，化学名为 2- 二苯基乙酰基 -1,3- 茚二酮，可与三氯化铁反应出现
外周血和脐带血中分离单个核细胞
基 本 方 案 FicoH-Hypaque梯度离心法分离单个核细胞材 料肝 素 抗 凝 血（附 录 3 G ) 或 者 肝 素 化 的 脐 带 血（I Oml脐 带 血 加 入 I m l 含 250U 的P B S 为宜）P B S聚蔗糖-泛影葡胺（Ficoll-Hypaque) 溶液H B S
人－NK－T－细－胞－的－分－离－和－扩－增
实验步骤基本方案 1 NK T 细胞的鉴定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培养基，含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可选）流 式 细 胞 缓 冲 液（flow cytometry buffer， FCbuffer
γ干－扰－素－的－检－测
实验步骤基本方案材 料展
胞质小RNA的基本信息
中文名称胞质小RNA英文名称small cytoplasmic RNA;scRNA定 义细胞质中的小分子RNA。通常指转移核糖核酸(tRNA)和小的核糖体RNA(rRNA)，如5S rRNA、5.8S rRNA等。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）