单个核细胞的分离纯化
外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）主要指淋巴细胞和单核细胞，是免疫学实验最常用的细胞，也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。1．原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密度较大，为1.092左右；淋巴细胞和单核细胞的密度为1.076～1.090；血小板为1.030～1.035。因此，利用一种密度介于1.076～1.090之间、近于等渗的溶液（分层液）进行密度梯度离心，可使不同类别的血细胞按其相应密度分布，从而被分离。2．方法1）聚蔗糖-泛影葡胺分层液法 聚蔗糖-泛影葡胺（Ficoll-hypaque，F-H）分层液为密度梯度离心法最常用的分离液，其主要成分是聚蔗糖和泛影葡胺。聚蔗糖 （Ficoll） 分子量为40kD，具有高密度、低渗透压、无毒性的特点；常用的Ficoll溶液浓度为6%，密度为1.020。泛影葡胺 （Hypaque） ......阅读全文
单个核细胞的分离纯化
外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）主要指淋巴细胞和单核细胞，是免疫学实验最常用的细胞，也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。1．原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密度较大，为1.092左右；淋巴细胞和单核细胞的
单个核细胞的分离
实验概要外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞，是免疫学实验最常用的细胞，也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。本实验介绍了两种单个核细胞的分离方法。实验原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密
人单个核细胞的分离
实验概要人单个核细胞的分离主要试剂DPBS、0.5%甲基纤维素、人淋巴细胞分离液、人HSCs培养液主要设备离心机，超净台，体视镜，倒置显微镜，96孔培养板，T75培养瓶，25mL/10mL/5mL移液管实验材料脐带血100 mL，取自医院，并和产妇签知情同意书实验步骤（1）用血袋从医院取脐带血100
如何分离外周血单个核细胞
外周血单个核细胞即外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞，目前主要的分离方法是Ficoll-hypaque（葡聚糖－泛影葡胺）密度梯度离心法，因为血液中各有形成分的比重存在差异最多12天，但需要刺激。 PBMC（外周血单个核细胞）是原代细胞，单纯
外周血单个核细胞分离的原理
外周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其比重为1.070左右，而红细胞和多核白细胞的比重超过1.080。这样利用介于两者比重之间的溶液(称为分层液)做密度梯度离心，就可得到单个核细胞。最常用的分层液为聚蔗糖和泛影酸钠混合比重为1.070±0.001的溶液，国内常用泛影葡胺代替泛影酸钠。
外周血单个核细胞的分离实验
实验方法原理 体外测定免疫细胞的数量和功能常需将某种免疫细胞首先分离出来。本实验是采用密度梯度离心法分离单个核细胞（mononuclear cell）。单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞（monocyte）。 血液中各种细胞的大小和比重不同，因此，可用不同比重（密度）的分离液使不同比重的细胞在
外周血单个核细胞的分离实验
实验方法原理体外测定免疫细胞的数量和功能常需将某种免疫细胞首先分离出来。本实验是采用密度梯度离心法分离单个核细胞（mononuclear cell）。单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞（monocyte）。 血液中各种细胞的大小和比重不同，因此，可用不同比重（密度）的分离液使不同比重的细胞在离心沉降过
小鼠单个核细胞的分离实验
基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官： < 6 周龄的小鼠胸腺； 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子（保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中）装 有 19 G 针
小鼠单个核细胞的分离实验
实验步骤基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官： < 6 周龄的小鼠胸腺； 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子（保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中）装 有 19
从单个核细胞中分离T细胞
从单个核细胞中分离T细胞1）用玫瑰花结形成试验分离E＋细胞1．制备AET-绵羊红细胞1）在刻度离心管中，用无菌的含5％小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次，每次离心500×g 10分钟。2）吸净上清液，测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞，加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液，混匀。室温中反
用淋巴细胞分离液分离单个核细胞
用淋巴细胞分离液分离单个核细胞1）分离外周血中的单个核细胞（PBMC）1．抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中，加等量含5～10IU/ml肝素的无血清缓冲液悬浮细胞。将细胞悬液小心加在与血液等量的淋巴细胞分离液上，室温中，水平离心500×g 20分钟。此时离心管中形成5层：最上面是血浆，血浆层和淋巴细胞
分离人肠黏膜单个核细胞
实验步骤基 本 方案 离 人 肠 黏 膜 单 个 核 细 胞材 料新鲜的大肠或小肠样本，外科手术后分离获得H B S S ，不含钙和镁， p H 7. 2D T T - H B S S 溶液： 75m g D T T 溶于 50 ml H B S S ，新鲜配制E D T A - H B S S 溶
外周血单个核细胞怎么进行分离？
外周血中单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)的比重介于1.075～1.090 之间，红细胞及粒细胞在1.092左右，血小板在1.030～1.035之间，因而可利用一种比重介于1.075～1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心，使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。对分离介质的基本要
外周血单个核细胞分离的操作步骤
1、取外周静脉血，用肝素抗凝，加等量的Hank’s液并混匀。2、将分层液加入试管中，用量约为血量的1/2。用吸管沿管壁缓缓将血加入分层液面上。3、置于水平离心机离心，1500r/min，10min。可见绝大多数单个核细胞悬浮于血浆和分层液的界面，呈白膜状。4、用尖吸管吸取界面的细胞层，置于另一试管中
如何用淋巴细胞分离液分离单个核细胞？
淋巴细胞分离液可用于体外分离外周淋巴血细胞，也可以从其他来源中分离单核细胞，包括脐带血细胞和骨髓细胞，适用于从血液及组织匀浆中分离所需细胞，在医疗和医学生物中广泛应用。其他人及动物多种比重细胞分离液。 如何用淋巴细胞分离液分离单个核细胞？ 1）分离外周血中的单个核细胞 1．抽取正常人静脉血加
从单个核细胞中分离T细胞的方法
1）用玫瑰花结形成试验分离E＋细胞：1．制备AET-绵羊红细胞：1）在刻度离心管中，用无菌的含5％小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次，每次离心500×g 10分钟。2）吸净上清液，测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞，加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液，混匀。室温中反应30分钟。3）用无
外周血单个核细胞分离实验的操作步骤
1、取外周静脉血，用肝素抗凝，加等量的Hank’s液并混匀。 2、将分层液加入试管中，用量约为血量的1/2。用吸管沿管壁缓缓将血加入分层液面上。 3、置于水平离心机离心，1500r/min，10min。可见绝大多数单个核细胞悬浮于血浆和分层液的界面，呈白膜状。 4、用尖吸管吸取界面的细胞层
外周血单个核细胞淋巴细胞和单个核细胞
1、淋巴细胞 淋巴细胞来源于造血干细胞(hemopoietic stem cell，HSC)。造血干细胞可分化成多能前体细胞( multipotent progenitor cell，MPC)，继而分化为淋巴样干细胞和髓样干细胞。淋巴样干细胞可继续发育为成熟的T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞等
密度梯度分离法分离单个核细胞（MNCs）
试剂和材料：1. 合适的培养基或冷冻液；2. PBSA；3. Ficoll-Hypague；4. 巴氏吸管；5. 50ml离心管；实验方法：1. 将脐血样品用PBSA按1：1比例稀释；2. 将15ml Ficoll-Hypague吸入50ml离心管；3. 将30mlPBSA稀释的脐血样品缓慢地加到F
人单个核细胞分离液使用注意细节
人单个核细胞分离液1.077是一种用于分离人外周血单个核细胞的无菌、低内毒素水平的密度梯度分离液。外周血中单个核细胞（PBMC）包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同，红细胞和粒细胞密度较大，1.090g/mL 左右，淋巴细胞和单核细胞密度为 1.075~1.090g/mL，血小板
外周血单个核细胞的分离如何进行呢
外周血中单个核细胞（淋巴细胞和单核细胞）的比重介于1.075～1.090之间，红细胞及粒细胞在1.092左右，血小板在1.030～1.035之间，因而可利用一种比重介于1.075～1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心，使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。 对分离介质的基本要求
外周血和脐带血中分离单个核细胞
基 本 方 案 FicoH-Hypaque梯度离心法分离单个核细胞材 料肝 素 抗 凝 血（附 录 3 G ) 或 者 肝 素 化 的 脐 带 血（I Oml脐 带 血 加 入 I m l 含 250U 的P B S 为宜）P B S聚蔗糖-泛影葡胺（Ficoll-Hypaque) 溶液H B S
外周血单个核细胞分离的基本原理介绍
外周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其比重为1.070左右，而红细胞和多核白细胞的比重超过1.080。这样利用介于两者比重之间的溶液(称为分层液)做密度梯度离心，就可得到单个核细胞。最常用的分层液为聚蔗糖和泛影酸钠混合比重为1.070±0.001的溶液，国内常用泛影葡胺代替泛影酸钠。
从全血里纯化单个核细胞（人、大鼠和小鼠）
所需仪器：XL03RH型控温离心机（低速冷冻离心机，可使用24*15ml离心管，水平转子）；抽血注射器（大小与抽血体积相一致）试剂：Optiprep；Tricine-缓冲盐溶液（TBS,仅小鼠血）0.85%（质量浓度）NaCl，10mmol/L Tricine-NaOH（ph = 7.4）。 方法：
外周血单个核细胞简介
外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。注意这里是 mononuclear cell 单个核细胞，而不是 Monocyte 单核细胞。外周血单个核细胞主要的分离方法是Ficoll-hypa
外周血单个核细胞分离实验的器材和注意事项
一、试剂与器材 1、聚蔗糖—泛影葡胺分层液，Hank’s液，RPMI-1640培养液，肝素。 2、水平离心机。 二、注意事项 1、在分离外周血单个核细胞过程中，将稀释血液加于分层液上时，要避免冲散分层液面，而要使之形成良好的界面，否则影响分离结果。 2、此法操作得当，单个核细胞得率可达
外周血单个核细胞的简介
周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其他细胞不同，红细胞和多核白细胞的比重在1.092左右，单个核细胞的比重为1.075-1.090，血小板为1.030-1.035。因此利用一种介于1.075-1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心，使一定密度的细胞按
外周血单个核细胞的分类
一、基本原理 外周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其比重为1.070左右，而红细胞和多核白细胞的比重超过1.080。这样利用介于两者比重之间的溶液(称为分层液)做密度梯度离心，就可得到单个核细胞。最常用的分层液为聚蔗糖和泛影酸钠混合比重为1.070±0.001的溶液，国内常用泛影葡胺代替泛
小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞
PriCells-小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞 基本原理活细胞（密度较小）和死细胞（密度较大）密度不同，从而有助于将活的淋巴细胞和红细胞分离。 附加材料高密度溶液：Ficoll-Paque（Ficoll和泛影酸钠；Pharmacia LKB）或Lympholyte-M（Cedarlane）
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞
测定细胞免疫功能首先要从人或动物外周血或组织中获取有活性的细胞，如淋巴细胞、巨噬细胞、粒细胞等。取得有活性的细胞应根据不同目的，采用不同方法，考虑(1)细胞纯度；(2)细胞获得量；(3)细胞活力；(4)使用方法的简易程度和本室条件等。目前常用Ficoll密度梯度离心法直接分离和纯化外周血单个核细胞。