小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞

PriCells-小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞 基本原理活细胞(密度较小)和死细胞(密度较大)密度不同,从而有助于将活的淋巴细胞和红细胞分离。 附加材料高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸钠;Pharmacia LKB)或Lympholyte-M(Cedarlane)12ml或50ml聚丙烯离心管(比聚苯乙烯离心管好)注:Ficoll-Paque和Lympholyte-M的密度与温度有关;该方法中所采用的以及其他商品化的高密度溶液适合在室温中使用。因此应注意使细胞悬液、离心和高密度溶液控制在室温。否则会因活细胞沉入离心管底导致在密度界面上损失活细胞。 实验方案1、用RPMI-5完全培养基混悬细胞,分装到离心管中使其细胞数达到0.5×108~1×108个细胞/2ml(12ml离心管)或1×108~5×108个细胞/5ml(50ml离心管)。 2、用移液器吸取3......阅读全文

小鼠单个核细胞的分离实验

基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官: < 6 周龄的小鼠胸腺; 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子(保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中)装 有 19 G 针

小鼠单个核细胞的分离实验

实验步骤基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官: < 6 周龄的小鼠胸腺; 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子(保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中)装 有 19

外周血单个核细胞淋巴细胞和单个核细胞

  1、淋巴细胞  淋巴细胞来源于造血干细胞(hemopoietic stem cell,HSC)。造血干细胞可分化成多能前体细胞( multipotent progenitor cell,MPC),继而分化为淋巴样干细胞和髓样干细胞。淋巴样干细胞可继续发育为成熟的T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞等

小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞

PriCells-小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞 基本原理活细胞(密度较小)和死细胞(密度较大)密度不同,从而有助于将活的淋巴细胞和红细胞分离。 附加材料高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸钠;Pharmacia LKB)或Lympholyte-M(Cedarlane)

从全血里纯化单个核细胞(人、大鼠和小鼠)

所需仪器:XL03RH型控温离心机(低速冷冻离心机,可使用24*15ml离心管,水平转子);抽血注射器(大小与抽血体积相一致)试剂:Optiprep;Tricine-缓冲盐溶液(TBS,仅小鼠血)0.85%(质量浓度)NaCl,10mmol/L Tricine-NaOH(ph = 7.4)。 方法:

单个核细胞的分离

实验概要外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞,是免疫学实验最常用的细胞,也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。本实验介绍了两种单个核细胞的分离方法。实验原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密

外周血单个核细胞简介

  外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。注意这里是 mononuclear cell 单个核细胞,而不是 Monocyte 单核细胞。外周血单个核细胞主要的分离方法是Ficoll-hypa

单个核细胞(MNCs)获取实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 脐血

单个核细胞(MNCs)获取实验

实验材料脐血试剂、试剂盒灭菌合适的培养基或冷冻液PBSA仪器、耗材Ficoll-Hypague(密度1.077g L)巴氏吸管50mL离心管实验步骤(a) 将脐血样品用PBSA按1:1比例稀释。(b) 将15mLFicoll-Hypague吸入50mL离心管。(c) 将30mLPBSA稀释的脐血样品

人单个核细胞的分离

实验概要人单个核细胞的分离主要试剂DPBS、0.5%甲基纤维素、人淋巴细胞分离液、人HSCs培养液主要设备离心机,超净台,体视镜,倒置显微镜,96孔培养板,T75培养瓶,25mL/10mL/5mL移液管实验材料脐带血100 mL,取自医院,并和产妇签知情同意书实验步骤(1)用血袋从医院取脐带血100

外周血单个核细胞的简介

  周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其他细胞不同,红细胞和多核白细胞的比重在1.092左右,单个核细胞的比重为1.075-1.090,血小板为1.030-1.035。因此利用一种介于1.075-1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心,使一定密度的细胞按

单个核细胞的分离纯化

外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞,是免疫学实验最常用的细胞,也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。1.原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密度较大,为1.092左右;淋巴细胞和单核细胞的

如何分离外周血单个核细胞

外周血单个核细胞即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞,目前主要的分离方法是Ficoll-hypaque(葡聚糖-泛影葡胺)密度梯度离心法,因为血液中各有形成分的比重存在差异最多12天,但需要刺激。 PBMC(外周血单个核细胞)是原代细胞,单纯

单个核细胞(MNCs)获取实验

实验方法原理 实验材料 脐血试剂、试剂盒 灭菌合适的培养基或冷冻液PBSA仪器、耗材 Ficoll-Hypague(密度1.077g L)巴氏吸管50mL离心管实验步骤 (a) 将脐血样品用PBSA按1:1比例稀释。(b) 将15mLFicoll-Hypague吸入50mL离心管。(c) 将30mL

单个核细胞(MNCs)获取实验

基本方案实验方法原理实验材料脐血                                                          试剂、试剂盒灭菌合适的培养基或冷冻液                                                          

外周血单个核细胞的分类

  一、基本原理  外周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞,其比重为1.070左右,而红细胞和多核白细胞的比重超过1.080。这样利用介于两者比重之间的溶液(称为分层液)做密度梯度离心,就可得到单个核细胞。最常用的分层液为聚蔗糖和泛影酸钠混合比重为1.070±0.001的溶液,国内常用泛影葡胺代替泛

从单个核细胞中分离T细胞

从单个核细胞中分离T细胞1)用玫瑰花结形成试验分离E+细胞1.制备AET-绵羊红细胞1)在刻度离心管中,用无菌的含5%小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次,每次离心500×g 10分钟。2)吸净上清液,测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞,加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液,混匀。室温中反

分离人肠黏膜单个核细胞

实验步骤基 本 方案 离 人 肠 黏 膜 单 个 核 细 胞材 料新鲜的大肠或小肠样本,外科手术后分离获得H B S S ,不含钙和镁, p H 7. 2D T T - H B S S 溶液: 75m g D T T 溶于 50 ml H B S S ,新鲜配制E D T A - H B S S 溶

外周血单个核细胞怎么进行分离?

外周血中单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)的比重介于1.075~1.090 之间,红细胞及粒细胞在1.092左右,血小板在1.030~1.035之间,因而可利用一种比重介于1.075~1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心,使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。对分离介质的基本要

外周血单个核细胞的分离实验

实验方法原理体外测定免疫细胞的数量和功能常需将某种免疫细胞首先分离出来。本实验是采用密度梯度离心法分离单个核细胞(mononuclear cell)。单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞(monocyte)。 血液中各种细胞的大小和比重不同,因此,可用不同比重(密度)的分离液使不同比重的细胞在离心沉降过

外周血单个核细胞分离的原理

外周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞,其比重为1.070左右,而红细胞和多核白细胞的比重超过1.080。这样利用介于两者比重之间的溶液(称为分层液)做密度梯度离心,就可得到单个核细胞。最常用的分层液为聚蔗糖和泛影酸钠混合比重为1.070±0.001的溶液,国内常用泛影葡胺代替泛影酸钠。

外周血单个核细胞的分离实验

实验方法原理 体外测定免疫细胞的数量和功能常需将某种免疫细胞首先分离出来。本实验是采用密度梯度离心法分离单个核细胞(mononuclear cell)。单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞(monocyte)。 血液中各种细胞的大小和比重不同,因此,可用不同比重(密度)的分离液使不同比重的细胞在

单核细胞和单个核细胞的区别

单核细胞和单个核细胞的区别是:单个核细胞指那一个细胞只有一个细胞核。单核细胞是一种细胞的名称。它的名字就叫单核细胞。细胞核(nucleus)是真核细胞内最大、最重要的细胞器,是细胞遗传与代谢的调控中心,是真核细胞区别于原核细胞最显著的标志之一(极少数真核细胞无细胞核,如哺乳动物的成熟的红细胞,高等植

外周血单个核细胞的基本信息

外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。注意这里是 mononuclear cell 单个核细胞,而不是 Monocyte 单核细胞。外周血单个核细胞主要的分离方法是Ficoll-hypaqu

外周血单个核细胞的基本内容

  周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其他细胞不同,红细胞和多核白细胞的比重在1.092左右,单个核细胞的比重为1.075-1.090,血小板为1.030-1.035。因此利用一种介于1.075-1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心,使一定密度的细胞按

外周血单个核细胞样本的制备

实验方法原理 血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液,血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板;而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血细胞中一般检测单个核细胞较为多见。实验材料 外周血试剂、试剂盒 肝素生理盐水实验

外周血单个核细胞样本的制备

实验方法原理血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液,血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板;而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血细胞中一般检测单个核细胞较为多见。实验材料外周血试剂、试剂盒肝素生理盐水实验步骤一

外周血单个核细胞分离的操作步骤

1、取外周静脉血,用肝素抗凝,加等量的Hank’s液并混匀。2、将分层液加入试管中,用量约为血量的1/2。用吸管沿管壁缓缓将血加入分层液面上。3、置于水平离心机离心,1500r/min,10min。可见绝大多数单个核细胞悬浮于血浆和分层液的界面,呈白膜状。4、用尖吸管吸取界面的细胞层,置于另一试管中

脾脏单个核细胞悬液如何制备

(1)大鼠断颈处死后,无菌取脾置于消毒平皿中称重;(2)超净工作台上置10cm直径无菌平皿,加入5~10ml D-hanks平衡液 ,置一80目的不锈钢筛于平皿中,脾脏置于筛网中,用剪刀剪碎脾,用5ml玻璃注射器针芯轻轻捻磨脾脏,使分散的细胞滤过金属网进入平皿的液体中, D-hanks冲洗一次;(3

用淋巴细胞分离液分离单个核细胞

用淋巴细胞分离液分离单个核细胞1)分离外周血中的单个核细胞(PBMC)1.抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中,加等量含5~10IU/ml肝素的无血清缓冲液悬浮细胞。将细胞悬液小心加在与血液等量的淋巴细胞分离液上,室温中,水平离心500×g 20分钟。此时离心管中形成5层:最上面是血浆,血浆层和淋巴细胞