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大肠杆菌转化实验

热击法CaCl2转化法一步法高效率电转化法实验方法原理质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面,经过42摄氏度短时间的热击处理,促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代,待质粒上所带的抗菌素基因表达,就可以在含抗菌素的培养基中生长。实验材料质粒DNA 重组DNA ......阅读全文

大肠杆菌转化实验

实验方法原理 质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面,经过42°C短时间的热击处理,促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代,待质粒上所带的抗菌素基因表达,就可以在含抗菌素的培养基中生长。实验材料 质粒DNA重组DNA试剂、试剂盒 LB培养基蒸馏水IPTGX-gal氨苄青霉素仪器、耗材 旋涡混

大肠杆菌转化实验

热击法CaCl2转化法一步法高效率电转化法实验方法原理质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面,经过42摄氏度短时间的热击处理,促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代,待质粒上所带的抗菌素基因表达,就可以在含抗菌素的培养基中生长。实验材料质粒DNA                      

大肠杆菌转化实验

实验方法原理质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面,经过42摄氏度短时间的热击处理,促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代,待质粒上所带的抗菌素基因表达,就可以在含抗菌素的培养基中生长。实验材料质粒DNA 重组DNA试剂、试剂盒LB培养基 蒸馏水 IPTG X-gal 氨苄青霉素仪器、耗材旋

大肠杆菌转化实验

            实验方法原理 质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面,经过42摄氏度短时间的热击处理,促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代,待质粒上所带的抗菌素基因表达,就可以在含抗菌素的培养基中生长。

质粒转化大肠杆菌

该实验主要有两个用途:1.重组质粒的鉴定。当质粒的重组或其它载体重组后,通常会发生质粒的重组失败,包括质粒的自身环化。因而要求进行筛选,把重组成功的质粒找出来。在目前常用的质粒和其它载体中含有相应的抗生素抗性基因,一旦重组成功,质粒环化(包括自身环化),抗生素抗性基因表达,被转化的大肠杆菌便具备抗相

TSS 法快速转化大肠杆菌

A.过夜培养物转种后27拚2度快摇约205hrs至O.D 值为0.3 左右。B.取1ml菌液离心收菌,加入0.1ml 冰浴的1 ′TSS 液轻轻吸打悬起细胞。(可以放-70 摄氏度冻存半年)B 、可以取0.1ml 菌液加入0.1ml 冰浴的2 ′TSS 混匀,该方法只适于做质粒转化,如做连接产物转化

大肠杆菌的电击转化实验

大肠杆菌的电击转化实验可以用于:更为简便快捷地进行转化。实验方法原理转化(transformation)是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。该现象首先发现于细菌。也是细菌间遗传物质转移的多种形式中最早发现的一种,它不同于通过噬菌体感染

大肠杆菌的电击转化实验

            实验方法原理 转化(transformation)是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象。该现象首先发现于细菌。也是细菌间遗传物质转移的多种形式中最早发现的一种,它不同于通过噬菌体

大肠杆菌的电击转化实验

实验方法原理 与制备用化学方法进行转化的感受态细胞相比,制备电转化的感受态细胞要容易得多。细菌简单地生长至对数中期、冷却、离心,用冰冷的水或缓冲液充分洗净以降低细胞悬液的离子强度,而后再用含 10% 甘油的冰冷缓冲液悬浮。实验材料 质粒 DNA试剂、试剂盒 甘油纯水SOC 培养液仪器、耗材 CYTL

大肠杆菌转化实验——高效率电转化法

实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒LBSOC仪器、耗材电转化仪离心机分光光度计实验步骤1.  接种一个单菌落于5 ml LB培养液,37℃温和振摇培养5 h 或过夜。2.   将2.5 ml 培养物加人到盛有500 ml LB培养液的2 L 烧瓶中,37℃摇匀振荡培养至OD600为0.5~0.6。 3.