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植物基因转化常用方法3

(三)改良植物性状的策略 基因克隆技术提供了一种新的改良植物的方法,它可以直接的改变植物的基因型。有两种策略可以应用。 1) 基因附加:通过添加1个或多个基因改变植物的性状。 2) 基因扣除:利用基因工程技术使一个或多个植物已经存在的基因失活。 灭活植物基因是通过反义技术来实现的。将外源基因反向的连接到载体中,当基因转录成mRNA后,与正常的mRNA是反向互补的。我们称这种反向互补为反义RNA,缩写为asRNA。 反义RNA阻止原有基因表达的机理尚不明了,但可以肯定,正义和反义RNA之间的杂交与这一事件有关,可能双链的RNA很快被核酸酶降解 ,或者反义RNA阻止了核糖体与正义RNA的结合。 &nb......阅读全文

植物基因转化常用方法-3

(三)改良植物性状的策略  基因克隆技术提供了一种新的改良植物的方法,它可以直接的改变植物的基因型。有两种策略可以应用。  1) 基因附加:通过添加1个或多个基因改变植物的性状。  2) 基因扣除:利用基因工程技术使一个或多个植物已经存在的基因失活。  灭活植物基因是通过反义技术来实现的。将外源基因

植物基因转化常用方法

一. 植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类:一类是直接基因转移技术,包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等,其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法,主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法,其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转

植物基因转化常用方法

一 植物遗传转化的方法  植物遗传转化技术可分为两大类:一类是直接基因转移技术,包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等,其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法,主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法,其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转

植物基因转化常用方法-2

(二)Ti质粒转化植物细胞的战略  1 . Ti质粒的改造  有以下理由使天然的Ti质粒不能作为表达载体使用:  a. 生长在培养基上的植物转化细胞产生大量的生长素和分裂素阻止了细胞再生长为整株植物,因此,必须除去生长素和分裂素基因。  b. 有机碱的合成与T-DNA的转化无关,而且可能会影响植物细

植物基因转化常用方法-4

1.2 其它的基因附加工程在水稻、棉花、马铃薯、番茄和其它作物上也进行了δ-内毒素工程,获得昆虫抗性也不仅仅是指有着一种方法。蛋白酶抑制剂也是较好的选择,它可以一只昆虫肠道内的蛋白酶活性,阻止或减缓害虫生长,许多植物能产生蛋白酶抑制剂,如豇豆和common bean, 他们的基因已经被成功的转移到其

植物基因转化技术

相关知识植物基因转化技术是指将外源基因导入植物细胞或组织,获得转基因植物的技术。植物基因转化技术总体上可分为两大类:1 以生物体为介导的基因转移法;2 DNA直接导入法。前者如农杆菌介导法,植物病毒介导法;后者如基因枪法、电击法、聚乙二醇法、脂质体法及花粉管通道法。其中应用最广的是根癌农杆菌介导法。

植物基因转化方法分为这三种!

  农杆菌介导基因转化:  转化原理:农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位,并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到

3种常用基因功能验正方法简述

  科研人员在分析项目的过程中,碰到这样的问题:通过各种手段(选择清除分析、比较基因组学分析、转录组分析)获得的行驶某种功能的某基因,如果进行实验的验正呢?一般分为:基因上调(基因转染法)、基因下调(基因干扰法)后看蛋白表达水平、细胞功能改变、在体动物模型中相关功能的变化等。   相信大家也有

3种常用基因功能验正方法简述

  科研人员在分析项目的过程中,碰到这样的问题:通过各种手段(选择清除分析、比较基因组学分析、转录组分析)获得的行驶某种功能的某基因,如果进行实验的验正呢?一般分为:基因上调(基因转染法)、基因下调(基因干扰法)后看蛋白表达水平、细胞功能改变、在体动物模型中相关功能的变化等。   相信大家也有

细胞生物基本方法:常用转化细胞

几种常用转化细胞和转化技术1)致癌化学物转化细胞:转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验1.取材:妊娠后第13天取材,取数个同窝胚胎,去头和内脏,在无菌条件下剪碎至米粒大小,再用0.25%胰蛋白酶(含0.01%EDTA)37℃消化30分钟,滤过、低速离心、吸除消化液、加入营养液、制备成细胞悬液、接种入1875p