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提到亚历山大·弗莱明爵士的名字，或许还有人感到陌生，但很少有人不知道他为人类健康做出的卓越贡献——1923年，他发现眼泪等体液中的溶菌酶有杀菌效果；1928年，他发现的青霉素（盘尼西林），更是让人类进入了抗生素时代，拯救了无数病人的生命。亚历山大·弗莱明爵士（图片来源：By Official photographer [Public domain], via Wikimedia Commons） 快100年过去了，在最新一期的《细胞》杂志上，来自英国纽卡斯尔大学（Newcastle University）的科学家们，将弗莱明爵士的两个重要发现完美地融合在了一起。不过，他们的发现并不是什么好消息——溶菌酶和青霉素这两种抗菌杀手，居然会联手闹出乌龙，放跑乔装打扮的细菌。 我们先来说说溶菌酶和青霉素。这两种抗菌分子都能直接作用于细菌的细胞壁。其中，溶菌酶能促使肽聚糖细胞壁的关键部分发生水解，破坏细菌的细胞壁；而青霉素作为β-内......阅读全文
【摘要】目的 介绍溶菌酶医学应用的研究概况。 方法综述近年来国内外相关报道，介绍溶菌酶的药物剂型、与医学应用相关的专利以及在 疾病诊疗中的应用。结果 溶菌酶具有抗菌消炎、抗病毒、抗肿瘤、增强免疫力等作用，尤其是与传统药物相比具有无毒副作用和无耐药 性的优势。 结论 溶菌酶的研究越来越引起人们
很多人对青霉素并不陌生。在现代医院里，青霉素是一种非常普通而常用的药物。然而，有谁知道，就在三、四十年前青霉素还是价值千金的名贵药品。那时流行着许多传染病，如猩红热、白喉、脑膜炎、淋病、梅毒等，这些疾病严重地威胁着人们的生命。由于没有有效的治疗方法，人们只能眼睁睁地看着一个个病人悲惨地死去。但是，
发现青霉素→挽救亿万生命→不规范使用→超级细菌→无解，这是一条将“良药”变成“杀手”的不归路。日前，杭州一家企业研发了一种能溶解细菌的酶，并通过大量试验表明，可替代畜禽养殖中使用的抗生素，正力推在金华浦江建立“无抗县” 。 所谓“无抗县”，就是在畜禽养殖过程中，不用抗生素保健或控制性使用抗生
细菌L型是细菌细胞壁缺陷型。每种细菌都有其固定的形态，其形态决定于细菌最外层的细胞壁，细菌细胞壁不同程度缺失导致细菌变成细菌L型。细菌L型最早由Klieneberger发现，他于1935年从念珠状链杆菌的培养物中发现有一种微小的菌落，当时认为是一种支原体，并命名为L1(以他工作的list
液体稀释法在一组试管中分别加入一定的培养基，然后加入不等量的被测物质，再将已培养好的、用于测定的微生物接种进去,在规定的条件下培养一定时间,观察其消长情况并与标准曲线对比，计算出被测物质的含量。固体平板扩散法将溶化的固体培养基与被测定微生物混合做成平板，把含不等量被测物质的液体滴入置于平板上(直接滴
细菌的结构对细菌的生存、致病性和免疫性等均有一定作用。细菌的结构按分布部位大致可分为：表层结构，包括细胞壁、细胞膜、荚膜；内部结构包括细胞浆、核蛋白体、核质、质粒及芽胞等；外部附件，包括鞭毛和菌毛。习惯上又把一个细菌生存不可缺少的，或一般细菌通常具有的结构称为基本结构，而把某些细菌在一
2．革兰氏阳性菌细胞壁特殊组份细胞壁较厚，约20～80mm。肽聚糖含量丰富，有15～50层，每层厚度1nm,约占细胞壁干重的50～80%。此外，尚有大量特殊组份磷壁酸(Teichoic acid)。 （图2-6)磷壁酸是由核糖醇(Ribitol)或甘油(Glyocerol)残基
一.基本原理核酸分子杂交技术是目前分子生生物学、细胞生物学和生物化学研究中应用最广泛的技术之一，是定性、定量和定位检测两条来源不同的聚核苷酸链上碱基顺序同源性的一种手段。DNA分子是高度有序的双键分子。一条链的碱基与另一条链的碱基以氢键配对相连．形成腺嘌呤与胸腺嘧啶(A．T)，鸟嘌呤与胞嘧啶（G．C
一.基本原理 核酸分子杂交技术是目前分子生生物学、细胞生物学和生物化学研究中应用最广泛的技术之一，是定性、定量和定位检测两条来源不同的聚核苷酸链上碱基顺序同源性的一种手段。DNA分子是高度有序的双键分子。一条链的碱基与另一条链的碱基以氢键配对相连．形成腺嘌呤与胸腺嘧啶(A．T)，鸟嘌呤与胞嘧啶（G
实验概要本文介绍了细胞组分分析方法的原理及操作流程等。实验原理核酸分子杂交技术是目前分子生生物学、细胞生物学和生物化学研究中应用最广泛的技术之一，是定性、定量和定位检测两条来源不同的聚核苷酸链上碱基顺序同源性的一种手段。DNA分子是高度有序的双键分子。一条链的碱基与另一条链的碱基以氢键配对相连．形成
第一章质粒DNA 的分离、纯化和鉴定 第二章DNA 酶切及凝胶电泳 第三章大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重组质粒的连接、转化及筛选 第六章基因组DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技术 第八章聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆 第九章分
试剂、试剂盒 IPTG溶源菌抽提缓冲液氯化钠溶菌酶LB 琼脂平板仪器、耗材 气体恒溫箱液氮Millipore 滤纸水浴摇床牙签或接种环噬菌体λgt11λgt18-23λZAP 和λZipLox 重组子大肠杆菌 Y1090 hsdR 菌株及 Y1089 菌株实验步骤 材料
细菌克隆的溶解实验 实验方法原理 具有原噬菌体的细菌称为溶原性细菌。噬菌体分为烈性噬菌体和溶原性噬
第一节 支原体及其检验方法 3无细胞壁，能在人工培养基上生长的最小的微生物 一、分类：对人有致病性的有13个种 吸吸道：肺炎支原体 泌尿生殖道：人型支原体，解脲支原体，生殖道支原体 滑膜液：人型支原体 二、生物学性状 （一）形态：多形性，无细胞壁，由三层膜组成 很难染色 G- （二
细菌克隆的溶解实验可以用于：（1）从表达特定融合蛋白质的重组噬菌体构建噬菌体溶源菌；（2）从该溶源菌诱导合成并纯化出融合的目的蛋白质。实验方法原理具有原噬菌体的细菌称为溶原性细菌。噬菌体分为烈性噬菌体和溶原性噬菌体，在感染于寄主细菌细胞时，前者往往在菌体内增殖并将菌体裂解。实验材料大肠杆菌噬菌体试剂
实验概要本实验介绍了噬菌体抗体库的菌落筛选操作流程。实验步骤1. 将每轮筛选洗脱的噬菌体用来感染新鲜的XLIBlu菌，以10μl、20μl等不同量菌液涂于LB氨苄青霉素平皿，37℃ 4~5h。2. 事先将硝酸纤维素膜在5mmol/L的IPTG溶液中浸泡10min，在超净台中晾干后，铺在上述涂有细菌的
RNA样品质量分析：完整的总RNA样品应呈现出三条条带，分别为28S rRNA、18S rRNA、5S rRNA。其中28S rRNA条带的亮度应约为18S rRNA条带亮度的2倍，这表明RNA样品比较完整，基本无降解。如果两条带的亮度反过来，则说明RNA样品已发生降解。如果在点样槽内或槽附近有
实验材料：异丙基 β-D-硫代半乳糖苷 试剂、试剂盒：非变性裂解液
实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠，而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制备也简单易行，但得到的DNA比较粗制。高纯度的质粒DNA可通过氯化铯/溴化乙锭平衡离心法或层析法进一步纯化粗制DNA得到。实验材料 培养基菌株试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇乙酸钾异丙醇仪器、耗材 离心管实验
实验材料 异丙基 β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒 非变性裂解液非变性洗涤液非变性洗脱液苯甲基磺酰氟仪器、耗材 超声匀浆器聚丙烯柱实验步骤 3.1 非变性条件下重组激酶的纯化用于磷酸化筛选的激酶必须是可溶和有活性的，且无其他激酶参杂的纯化激酶。因此，我们可以从 cDNA
从重组溶源菌中制备粗提物鉴定DNA结合蛋白的活性实验材料大肠杆菌 Y1089试剂、试剂盒含有或不含10 mmol L MgCl2的LB培养液1010pfu mLλgtU重组噬菌体液1 mol L IPTG抽提缓冲液5 mg mL溶于抽提缓冲液中的溶菌酶（保存于-20℃)仪器、耗材4 mol L Na
尿液蛋白为尿液化学成分检查中最重要的项目之一。正常人的肾小球滤液中存在小分子量的蛋白质，在曲小管时绝大部分又被重吸收，因此终尿中的蛋白质含量很少，仅为30-130mg/24h。随机一次尿中蛋白质为0.80mg/L。尿蛋白定性试验呈阴性反应。当尿液中蛋白质超过正常范围时称为蛋白尿，含量大于0.1g/L
尿液蛋白为尿液化学成分检查中最重要的项目之一。正常人的肾小球滤液中存在小分子量的蛋白质，在曲小管时绝大部分又被重吸收，因此终尿中的蛋白质含量很少，仅为30-130mg/24h。随机一次尿中蛋白质为0.80mg/L。尿蛋白定性试验呈阴性反应。当尿液中蛋白质超过正常范围时称为蛋白尿，含量大于0.1g/
肠球菌是医院感染的重要病原菌 [1] ，对多种抗菌药产生耐药性，而且耐药菌株不断增加，接合转移是导致肠球菌庆大霉素等耐药基因转移、耐药性播散的重要原因，深入研究接合转移试验有助于了解肠球菌耐药性的产生机理。我们研究了不同培养基和不同转移方法对肠球菌质粒转移试验结果的影响，并对接
葡萄球菌属细菌的微生物学检验:一、生物学特性葡萄球菌是革兰阳性球菌，大小0．5～1．5μm ，呈单、双、四联、短链状或无规则葡萄状排列。无动力、无芽胞。其代谢方式是呼吸兼发酵。触酶阳性。通常氧化酶阴性，还原硝酸盐，能被溶葡萄球菌素溶菌，但不被溶菌酶溶菌。能利用多种碳水化合物，产酸。产生胞外酶，如葡萄
实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒氨苄青霉素IAAIPTGPBS盐酸胍Tris·Cl仪器、耗材超声波发生器透析袋转子离心机实验步骤利用pUR载体表达lacZ融合蛋白： 1a. 按正确的读框将目的基因亚克隆入pUR载体中，转化大肠杆菌感受态细胞，在LB/氨苄青霉素平皿上挑选转化子。2a
（4）蛋白摩尔换算： 100pmol分子量100，000蛋白质=10μg 100pmol分子量50，000蛋白质=5μg 100pmol分子量10，000蛋白质=1μg 氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿 （5）蛋白质/DNA换算： 1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×1
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 氨苄青霉素IAAIPTGPBS盐酸胍Tris·Cl仪器、耗材 超声波发生器透析袋转子离心机实验步骤 利用pUR载体表达lacZ融合蛋白： 1a. 按正确的读框将目的基因亚克隆入pUR载体中，转化大肠杆菌感受态细胞，在LB/氨苄青霉素平皿上挑选转化
一、目的要求: 了解原生质体融合技术的原理. 学习并掌握以细菌为材料的原生质体融合技术. 二、基本原理: 原核微生物基因重组主要可通过转化、转导、接合等途径,但有些微生物不适于采用这些途径,从而使育种工作受到一定
基本方法 实验材料 大肠杆菌