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一、活细胞研究遇到的问题：蛋白质或其他分子在活细胞内互相结合的时间和地点是了解它们功能的关键问题。要回答这一问题，需将蛋白质标上不同的荧光团。但是，光学显微镜的分辨率将蛋白质检测精度限制在大约0.2μm左右。要研究蛋白质成分的相互物理作用，需要高的分辨率。二、什么是FRET？FRET就是采用非放射方法，在供体和受体相互靠得很近（1-10 nm）时，将光子能从一个受激发的荧光团（供体）转移到另一个荧光团（受体）。 采用FRET，可以解决超过光学显微镜分辨率限制的分子相对邻近度问题，来显示（例如）（1）二个蛋白质成分间分子相互作用；（2）一个分子内部（如酶活动能力、DNA/RNA形态）的结构变化；（3）采用象CFP-YFP Cameleon这样特别的FRET-工具的离子浓度CFP受光激发后便发射光 &n......阅读全文
荧光寿命成像（FLIM）与Förster共振能量转移（FRET）相结合，已被证明非常有利于生物医学研究中各种结构和细胞动态变化的研究。因为FRET信号强烈依赖于FRET配体和受体的距离，所以FRET允许监测分子相互作用。这允许研究分子的相互作用，如配体-受体复合物，蛋白质-蛋白质相互作用、效应蛋白与
荧光共振能量转移 (fluorescence resonance energy transfer，FRET)，是指能量从一种受激发的荧光基团 (fluorophore)以非辐射的方式转移到另一种荧光基团的物理现象。FRET的能量转移效率是两个荧光基团间距离的函数，并对此距离十分敏感，它的有效
荧光寿命成像（FLIM）与Förster共振能量转移（FRET）相结合，已被证明非常有利于生物医学研究中各种结构和细胞动态变化的研究。因为FRET信号强烈依赖于FRET配体和受体的距离，所以FRET允许监测分子相互作用。这允许研究分子的相互作用，如配体-受体复合物，蛋白质-蛋白质相互作用、效应蛋白与
五、激光扫描共焦显微镜技术的应用定位、定量三维重组动态测量¨ 活细胞或组织内游离Ca2+浓度的测量¨ 活细胞内H+浓度（ pH值）的测量¨ 自由基的检测¨ 药物进入细胞的动态过程、定位分布及定量 应用：细胞膜电位的测量 荧光漂白恢复（FRA
时间分辨荧光：理论上，荧光是最灵敏的检测手段，由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此，很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。而现在偏振，淬灭，时间关联，荧光寿命改变以及荧光共振能量转移（FRET）已经被广泛应用在对分子间作用的研究中。在生物溶液或血清中的很多化合物和蛋白质是自发
一、FRET技术基本原理荧光共振能量转移是指两个荧光发色基团在足够靠近时，当供体分子吸收一定频率的光子后被激发到更高的电子能态，在该电子回到基态前，通过偶极子相互作用，实现了能量向邻近的受体分子转移（即发生能量共振转移）。FRET是一种非辐射能量跃迁，通过分子间的电偶极相互作用，将供体激发态能量转移
随着人类和许多其他物种基因组测序工作的完成，生物学家开始将研究重点转移到调控基因如何开启和关闭功能基因的表达上，该类研究的进行需要依靠新技术和新工具的发明应用。近期在《自然—方法学》(Nature Methods)杂志上发表的相关文章表明，美国佛罗里达州立大学国家高磁实验室研究人员与加拿大阿尔伯塔大
荧光和均相性分析理论上，荧光是最灵敏的检测手段。由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此，很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。偏振，淬灭，时间关联，荧光寿命改变以及荧光共振能量转移（ FRET）已经被广泛应用在对分子间作用的研究中 1-5 。然而，在这些应用中，一些技术条件严重
1．荧光染料荧光基团通常各自拥有单一的光吸收峰。在光的刺激下，荧光基团吸收光的能量后通常以三种方式释放出能量：1) 光能 许多荧光基团吸收光能后仍旧以光能形式释放能量，并且发射光的峰值大于吸收峰。比如荧光染料Fam的光吸收峰为490nm，而发射峰为530nm。 2) 热能 某些荧光基团吸收
多聚集链反应（polymerase chain reaction,PCR）技术发明至今已近20年了，在这期间技术得到了不断的发展，近年来出现的实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR）技术实现了PCR从定性到定量的飞跃，它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、
fff简介分子之间的能量转移大多是由辐射导致的。然而当不同荧光物质非常靠近时（<10nm），会发生共振能量转移（RET）。荧光共振能量转移（FRET）是一种的型的 RET现象。图1 所示在 FRET 中，使用强光照射以激发供体能量，处于激发态的供体将一部
同无标记技术相比，利用荧光技术检测分子间相互作用的实验成本较低，例如荧光共振能量转移和凝胶迁移实验，无需昂贵的仪器便可完成结合分析。然而，基于荧光标记的检测技术也存在自己的局限性，像凝胶迁移实验就只能用来检测蛋白和核酸间的相互作用。那么在具体的实验中，研究人员该如何选择合适的检测技术呢？不要着急，下
(张蓓，沈立松 上海第二医科大学附属新华医院上海儿童医学中心实验诊断中心)摘要:多聚酶链反应飞速的发展使其成为了分子生物学实验室重要的工具，实时荧光定量PCR(real-timequantitative PCR)技术以其敏感性高、重复性好、速度快和污染少使PCR技术又
1.概述室温下，大多数分子处于基态的zui低振动能级，处于基态的分子吸收能量（光能、化学能、电能或热能）后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量，这种现象称为“发光现象”。分子发光包括荧光，磷光，化学发光，生物发光等。受到光照时发光，光照切断时发光立即消失的叫荧光，光照切断
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用，如TECAN(M1000、M200等)，Thmeral(Varioskan Flash)，Bio-tek(Synergy 4等)，MD(M2、M5)都可以应用于荧光检测。
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用，如TECAN(M1000、M200等)，Thmeral(Varioskan Flash)，Bio-tek（Synergy 4等），MD（M2、M5）都可以应用于荧光检测。1.
分析测试百科网讯 2016年4月19日，2016国际荧光前沿技术高端论坛（2016 FluoroFest）在北京大学开幕。FluoroFest 是一个全球性的荧光学术论坛，旨在促进相关领域的广大科技工作者交流最新荧光技术，推动跨学科及领域的经验分享与合作。
表1 主要成像技术及应用场合（Nature Reviews 2002）成像方法 主要应用场合磁共振成像（MRI） 高对比度，用于表型、生理成像和细胞跟踪的最好的全方位成像系统。计算机层析成像（CT） 肺和骨癌成像超声成像 血管和介入成像正电子发射断层成像PET 分子代谢，如葡萄糖，胸腺嘧啶核苷等的成
1. 同步荧光光谱 同步荧光技术是在同时扫描激发和发射波长的情况下来测绘荧光光谱图。由测得的荧光强度信号对发射或激发波长作图，即为同步荧光光谱。它包括固定波长的同步荧光和固定能量的同步荧光两种光谱。固定波长的同步荧光光谱首先由Lloyd[8]提出，固定能量的同步荧光光谱则随后由Imman[
近几十年，糖尿病的患病率逐年攀升，糖尿病在世界各地都正成为日益严重的公共健康问题。在预防、诊断和治疗糖尿病方面，定期监测血糖水平一直被公认为疾病评估和管理的重要手段。在过去的几年中，对于血糖检测，大多数研究人员关注的是基于酶的电化学传感器的开发，然而该方法还需要克服一些缺点：包括复杂的酶净化过程
2012年11月，新一期的冷泉港实验方案《Cold Spring Harbor Protocols》发布。本期主要聚焦了双光子成像、淋巴管造影以及CLIP技术。 1. CLIP (Cross-Linking and Immunoprecipitation) Identification
近几十年，糖尿病的患病率逐年攀升，糖尿病在世界各地都正成为日益严重的公共健康问题。在预防、诊断和治疗糖尿病方面，定期监测血糖水平一直被公认为疾病评估和管理的重要手段。在过去的几年中，对于血糖检测，大多数研究人员关注的是基于酶的电化学传感器的开发，然而该方法还需要克服一些缺点：包括复杂的酶净化过程
图5 通过共聚焦软件对荧光信号共定位情况进行分析：选中quantify-colocalization选项，通过ROI工具框选待分析区域，在窗口中间即显示所选两个通道的共定位参数，包括Pearson系数、共定位比率等。多点扫描及拼图假如你的样品需要拍摄大视野而同时又需要高分辨率怎么办呢?不用着急，我们
荧光共振能量转移(fluorescence resonance energytransfer，FRET)，是指能量从一种受激发的荧光基团(fluorophore)以非辐射的方式转移到另一种荧光基团的物理现象.FRET的能量转移效率是两个荧光基团间距离的函数，并对此距离十分敏感，它的有效响应距离一
分析测试百科网讯 2017年5月7日，由国际纯粹与应用化学联合会（IUPAC）和中国化学会（CCS）主办的2017 年国际分析科学大会（ICAS 2017）光谱分析分会场的报告继续进行。分析测试百科网注意到，本届光谱分析分会场的报告从数量上来说，主体为拉曼及相关技术。光谱分析分会场主持人，韩国汉
多聚集链反应（polymerasechainreaction,PCR）技术发明至今已近20年了，在这期间技术得到了不断的发展，近年来出现的实时荧光定量PCR（real-timequantitativePCR）技术实现了PCR从定性到定量的飞跃，它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全
定量PCR 定义 以参照物为标准对PCR终产物进行分析或对PCR过程的进行监测，来评估样本中靶基因的拷贝数，称为定量PCR相对定量→绝对定量， 手工操作→自动化检测， 灵敏度与特异性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR扩增的指数期进行的。 特定的待扩增基因片段 起始含量越大，则指
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用。 1.概述 室温下，大多数分子处于基态的zui低振动能级，处于基态的分子吸收能量(光能、化学能、电能或热能)后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用。 1.概述 室温下，大多数分子处于基态的zui低振动能级，处于基态的分子吸收能量(光能、化学能、电能或热能)后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量
论文摘自山东师范大学化学化工与材料科学学院，济南 250014摘 要 荧光显微镜与荧光光谱仪耦合系统可获取显微荧光成像及微区荧光光谱、荧光寿命的测定信息，广泛应用于细胞、组织中蛋白质的结构功能分析，核酸的识别检测，金属离子、自由基的定量测定，以及纳米生物探针的研制等生物分析研究的热点领域。1 引 言