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干法装柱的操作方法

干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧,至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装的很结实。接着是用淋洗剂“走柱子”,一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。通常上面加压,下面再用油泵抽,这样可以加快速度。干法装柱较方便,但最大的缺陷在于“走柱子”时,由于溶剂和硅胶之间的吸附放热(可以用手摸柱子明显感觉到),容易产生气泡,这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚,二氯甲烷更为明显。虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉,但是,一旦撤去压力,如在上样、加溶剂等操作的时候,气泡就会释放出来,严重时,整个柱子变花,样品不可能平整地通过,当然也就谈不上分离了。解决的办法是:第一、硅胶一定要填结实;第二、一定要用较多的溶剂“走柱子”,一定要到柱子的下端不再发烫,恢复到室温后再撤去压力。......阅读全文

层析法介绍

一、纸层析纸层析创立于1944年,和薄层层析一样,纸层析不仅可以用来分离、检识、测定中药中复杂的有效成分,而且可以于少量成分的提取精制。它是一种以滤纸上吸附的水为固定相,滤纸作为支持剂的分配层析法。纸层析应用较广,其主要用途是为分配薄层及分配柱层析摸索条件。虽然纸层析比较费时,易产生拖尾、不耐腐蚀性

色谱柱相关的100个问题

色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。   1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是

色谱柱相关的100个问题

  色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。  1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是反着用。具体到各型号

液相色谱柱的填装

   液相色谱柱、特别是高效液相色谱柱的填装,需要有较高的技巧和熟练的技能。因此,有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”。但是,只要掌握了一些基本的规律和方法,任何实验室都可以填装出具有较高柱性能的色谱柱。当然,目前大多数实验室多是购买商品预填装柱来满足分离、分析之需。但是在

硅胶柱层析的操作技术

硅胶柱层析的原理利用吸附原理,即利用硅胶对中药混合物中各种成分吸附能力的差异,而使混合物中各成分得以分离的色谱方法。硅胶柱层析的操作方法及注意事项 :装柱 操作要点:装柱前柱底要垫一层脱脂棉以防吸附剂外漏。 有干法装柱和湿法装柱两种方法(1)干法装柱:将硅胶通过漏斗装入柱内,中间不应间断,

工业制备色谱/动态轴向压缩系统在制药行业中的应用

1 前言 随着制药、生物化工等行业的迅速发展,制备型液相色谱分离技术得到越来越广泛的开发和应用,已成为分离和纯化复杂混合物的重要方法,尤其适用于天然产物和生物大分子(多肽,蛋白质等)的分离。为使样品得到有效的分离,色谱柱的装填必须满足床层的连续性、均匀性、稳定性和紧密性的要求。

工业制备色谱/动态轴向压缩系统在制药行业中的应用

1 前言随着制药、生物化工等行业的迅速发展,制备型液相色谱分离技术得到越来越广泛的开发和应用,已成为分离和纯化复杂混合物的重要方法,尤其适用于天然产物和生物大分子(多肽,蛋白质等)的分离。为使样品得到有效的分离,色谱柱的装填必须满足床层的连续性、均匀性、稳定性和紧密性的要求。色谱柱的装填,尤其是工业

工业制备色谱/动态轴向压缩系统在制药行业中的应用

1 前言  随着制药、生物化工等行业的迅速发展,制备型液相色谱分离技术得到越来越广泛的开发和应用,已成为分离和纯化复杂混合物的重要方法,尤其适用于天然产物和生物大分子(多肽,蛋白质等)的分离。为使样品得到有效的分离,色谱柱的装填必须满足床层的连续性、均匀性、稳定性和紧密性的要求。色谱柱的装填,尤其是

工业制备色谱/动态轴向压缩系统在制药行业中的应用

1 前言  随着制药、生物化工等行业的迅速发展,制备型液相色谱分离技术得到越来越广泛的开发和应用,已成为分离和纯化复杂混合物的重要方法,尤其适用于天然产物和生物大分子(多肽,蛋白质等)的分离。为使样品得到有效的分离,色谱柱的装填必须满足床层的连续性、均匀性、稳定性和紧密性的要求。色谱柱的装填,尤其是

色谱柱相关的100个问题,太实用,值得收藏!

导读色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。今天整理相关网络资料给大家学习交流。本文较长欢迎收藏。1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什

5大容易上手的高效液相色谱柱的填装方法大揭秘(一)

目前大多数实验室是购买商品预填装柱来满足分离、分析之需。液相色谱柱、特别是高效液相色谱柱的填装,需要有较高的技巧和熟练的技能。因此,有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”。但是只要掌握了一些基本的规律和方法,任何实验室都可以填装出具有较高柱性能的色谱柱。在有关色谱基本理论的讨论中可以得知,发生在色谱

5大容易上手的高效液相色谱柱的填装方法大揭秘(二)

干法装填对于粒径较大的填料(多用于制备色谱),如粒径≥20μm的填料,可以用干法装填,其基本方法与填装气相色谱柱类似。但需注意的一点是,在干法填装制备液相色谱柱时,不要过分剧烈地振动和敲打。振动和敲打会使填料因自身粒径的不均匀性而产生柱子整体上的不均一性,即较大的填料粒子靠近柱壁,而较细粒径者则倾向

Tips!10分钟了解液相色谱柱填装技术!

  目前大多数实验室通过购买商品色谱柱来满足分离/分析之需  液相色谱柱的填装,一般需要有较高的技巧和熟练的技能。因此,有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”  但是只要掌握了一些基本的规律和方法,任何实验室都可以填装出具有较高柱性能的色谱柱  高压匀浆法  将填料悬浮在适宜的匀浆液中制成匀浆,在其

有机合成民工呕心沥血总结的过柱子经验

  由于部分新手刚接触过柱,需要系统地了解过柱的方法技巧,我把一个从事多年化学工作,有丰富实验经验的先生的过柱经验转载过来,希望对大家有用。(看了请及时回帖,谢谢~~)  常说的过柱应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过

粉防己生物碱的提取分离与鉴定

汉防己为防己科千金藤属物Stephania tetrandra S. Mcore的根,是祛风解热镇痛药物,其有效成分为生物碱。主要是汉防己甲素和汉防已乙素。临床上除用作治疗高血压、神经性疼痛、抗阿米巴原虫外,还将粉防已生物碱的碘甲基、或溴甲基化合物作为肌肉松弛剂应用,此外汉防已甲素在动物实验

粉防己生物碱的提取分离与鉴定——低压柱层析分离法

实验材料汉防已试剂、试剂盒硫酸石灰乳季胺碱乙醚静砂乙醇氯化钠蒸馏水改良碘化铋钾试剂盐酸丙酮洗脱剂苦味酸仪器、耗材渗漉桶索氏提取器水浴锅微波炉锥形瓶玻璃棒烘箱提取玻筒烧瓶硅胶滴管长颈漏斗滤纸片空压机玻璃蒸发器汉防己为防己科千金藤属物Stephania tetrandra S. Mcore的根,是祛风解

粉防己生物碱的提取分离与鉴定(二)

生物碱的提取分离1.总生物碱的提取和亲脂性与亲水性生物碱的分离注一:将汉防已粗粉加适量酸水液,以能将生药粉末润湿为度(约150ml),充分拌匀,放置半小时,均匀而致密地装入渗筒内,用锥形瓶底部或其它平底工具压紧,供渗漉用,流速约1.5ml/分。 注二:净砂必须事前洗净烘干,拌和量最好不要超过120g

过柱的实验方法和技巧

   常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。    一:柱子可以分为:加压,常压,减压    1.压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板

过柱的实验方法和技巧

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。 一:柱子可以分为:加压,常压,减压1.压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件

生化分离技术--柱层析分离

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望 能有所帮助。 柱子可以分为:加压,常压,减压。 压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所

关于柱层析的实验方法和技巧

(注意:有机溶剂对身体特有害别是心肺;肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行!!)常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。 1、柱子可以分为:加压,常压,减压压力可以增

关于过柱的实验方法和技巧

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。 1、柱子可以分为:加压,常压,减压压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常

色谱柱分离经验

色谱柱子可以分为:加压,常压,减压。    压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。   

挑选和使用色谱柱的正确方法

色谱是一种分离分析手段,分离是核心,所以担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相以及色谱柱的制备、操作条件。那么,关于色谱柱的常识你知道多少呢?又应该如何选择合适的色谱柱?下面就来科普一些色谱柱的小知识。   一、柱子可以分为:加压,常压

色谱实验室技巧大汇总

常说的过柱子应该叫柱层析分离, 也叫柱色谱。 我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,就关于色谱柱的使用,小编代搜集了一下资料,希望对您能有所帮助。   柱子可以分为:加压,常压,减压   压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但

生化分离技术——柱层析(colum chromatography)分离(2)

由于某些原因,用到的淋洗剂多是大包装的(便宜嘛),我们这里是用10升或25升的塑料桶装的,就要注意这些工业品的纯度是较低的。经常能够从送来的大桶底部看见有色的杂质,其他的杂质就可想而知了,所以在比较严格的柱分时就要对溶剂重蒸。当然过原料时就可以免去这一步了,反正下面还有提纯的方法。另外溶剂在过柱子后

色谱实验室技巧大汇总

  常说的过柱子应该叫柱层析分离, 也叫柱色谱。 我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,就关于色谱柱的使用,小编代搜集了一下资料,希望对您能有所帮助。   柱子可以分为:加压,常压,减压   压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低

常用溶剂物理常数和精制方法3

三. 薄层板上原位化学反应   本法使直接在薄层板上进行的化学反应,又称原位反应薄层。先将样品滴加在薄层板上,然后滴上适当的溶剂展开反应物。有时先在试官内进行反应,而后在薄层板上进行层析检识。根据原化合物的Rf值再联系产物的层析行为,Rf值,可供鉴别一个化合物或者提供鉴定一个化合

液固吸附色谱仪的操作步骤

液固吸附色谱仪的操作包括装柱、上样、洗脱、检测和收集等步骤。一、装柱:装柱是液固吸附色谱仪能否成功分离纯化物质的关键步骤之一。装柱的主要问题是保证固定相在色谱柱中均匀紧凑,不能有气泡和裂痕出现。一般色谱柱的直径与长度比为1:10~1:50,硅胶量是样品量的30~40倍,具体的选择要具体分析。装柱步骤

色谱柱分离经验

柱子可以分为:加压,常压,减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂