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方案3多蛋白质复合体的非变性琼脂糖凝胶电泳实验

实验材料含有目标蛋白的细胞提取物试剂、试剂盒琼脂糖凝胶脱色液凝胶染色液甘油2 X 上样缓冲液SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材玻璃纸锥形瓶凝胶电泳装置微量离心过滤装置小型离心机微波炉Ultrafree-DA 装置实验步骤一、非变性凝胶的制备在非变性凝胶缓冲液中,制备水平的 0.8% 琼脂糖凝胶,规格约为 8 cm X 5.5 cm X 3 mm。(1)将琼脂糖粉末加到有 3?4 倍体积的非变性凝胶缓冲液的锥形瓶中,称重。(2)用倒置的烧杯盖住锥形瓶,放到微波炉中加热,直至琼脂糖熔化。(3)再称重,如必要加水补到原来的重量。(4)让琼脂糖在 45°C 水浴中冷却。(5)把梳子插到凝胶灌制装置中央,倒入琼脂糖溶液。(6)让琼脂糖凝固。(7)把凝胶放入装有非变性凝胶缓冲液的水平电泳装置中,保证凝胶完全浸没。小心拔出梳子。二、蛋白质复合体的鉴定2.用纯化的蛋白质在有利于蛋白质复合体形成的条件下,共同温育目标蛋白。要确定细胞提取物中的蛋白质......阅读全文

方案3 多蛋白质复合体的非变性琼脂糖凝胶电泳实验

实验材料含有目标蛋白的细胞提取物试剂、试剂盒琼脂糖凝胶脱色液凝胶染色液甘油2 X 上样缓冲液SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材玻璃纸锥形瓶凝胶电泳装置微量离心过滤装置小型离心机微波炉Ultrafree-DA 装置实验步骤一、非变性凝胶的制备在非变性凝胶缓冲液中,制备水平的 0.8% 琼脂糖凝胶,规格约

蛋白质的非变性 PAGE 实验

实验材料蛋白溶液或块状细胞蛋白试剂、试剂盒丙烯酰胺过硫酸铵电泳缓冲液5X样品缓冲液分离胶缓冲液浓缩胶缓冲液仪器、耗材微量注射器移液器吸头或凝胶上样吸头实验步骤1.安装凝胶灌制模具、灌制凝胶、开始电泳,以及对凝胶进行的操作、保存、染色等步骤均与方案 1 中所述一致。2.若要通过检测生物学活性来确定蛋白

甲醛变性琼脂糖凝胶电泳

            试剂、试剂盒 10XMOPS 电泳缓冲液 甲醛 甲酰胺 10X 加样缓冲液 溴化乙锭 琼脂糖

甲醛变性琼脂糖凝胶电泳

试剂、试剂盒 10XMOPS 电泳缓冲液 甲醛 甲酰胺 10X 加样缓冲液 溴化乙锭 琼脂糖 DEPC 处理的水仪器、耗材 水平电泳装置 水浴实验步骤 (一)材料与设备1) 水平电泳装置2) 水浴3)10XMOPS 电泳缓冲液:0.2mol/LMOPS(PH7.0),20 mmol/L 乙酸钠,10

变性凝胶电泳实验——基本方案

DNA序列测定的准确性很大程度取决于测序产物在变性聚丙烯酰胺凝胶上的分离度。一般说来,用于DNA测序的凝胶需要长40  cm,厚度均匀,含有4%~8%丙烯酰胺和7 mol/l 尿素。实验材料DNA试剂、试剂盒乙醇异丙醇二甲基二氯硅烷TEMED变性丙烯酰胺溶液SDS仪器、耗材电泳仪注射器巴斯德吸管干胶

蛋白质复合体性质的研究

方案1 用 FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀 方案2 细胞裂解液中相互作用蛋白的亲和纯化 方案3 多蛋白质复合体的非变性琼脂糖凝胶电泳实验 方案4 BN-PAGE 蛋白质分析法 方案5 采用交联法和质谱法对蛋白质复合体进行拓扑

5.2.1 甲醛变性琼脂糖凝胶电泳

试剂、试剂盒10XMOPS 电泳缓冲液甲醛甲酰胺10X 加样缓冲液溴化乙锭琼脂糖DEPC 处理的水仪器、耗材水平电泳装置水浴实验步骤(一)材料与设备1) 水平电泳装置2) 水浴3)10XMOPS 电泳缓冲液:0.2mol/LMOPS(PH7.0),20 mmol/L 乙酸钠,10 mmol/LEDT

RNA的变性琼脂糖凝胶电泳实验原理、材料和操作步骤

实验方法原理RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定分子量。只有在变性情况下,RNA分子完全伸展,其泳动率才与分子量成正比。判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的电泳图谱应可清晰看到18s

RNA的变性琼脂糖凝胶电泳实验原理、材料和操作步骤

            实验方法原理 RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定分子量。只有在变性情况下,RNA分子完全伸展,其泳动率才与分子量成正比。判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的

RNA的变性琼脂糖凝胶电泳实验原理、材料和操作步骤

一、实验目的学习RNA琼脂糖凝胶电泳的使用技术。二、实验原理RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定分子量。只有在变性情况下,RNA分子完全伸展,其泳动率才与分子量成正比。判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的