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背根神经节细胞的原代培养实验

实验方法原理 背根神经节(dorsalrootganglion,DRG)细胞起源千神经峙,外源性神经营养因子(NGF)能刺激DRG细胞生长发育并形成广泛的神经网络。目前,利用培养的DRG细胞进行轴突生长发育的研究,是最为经典和常用的方法之一。实验材料 孵化8-12d的鸡胚。孕15d及新生1-3d的大、小鼠仔鼠试剂、试剂盒 含10%胎牛血清的DMEM培养基神经元维持培养基(Neurobasal+B27+谷氨酰胺+20ng mlNGF)10µM阿糖胞苷(ARA-C)仪器、耗材 培养瓶实验步骤 获得消毒动物后详细的步骤如下:1.无菌条件下仰卧放置胚胎或仔鼠于冰D-PBS液中,断头后打开胸腹腔,除去内脏器官。从颈部椎管开口插入显微剪,沿脊柱背侧中线两侧剪开椎管,去除暴露脊髓后,即在椎间孔旁可见到沿脊柱两侧排列的背根节,用精细显微摄小心提取,并剥除其被膜。2.若施行组织块培养,可用精细显微剪将每个背根节剖为2-3个植块,直接接种于涂有鼠尾......阅读全文

背根神经节细胞的原代培养实验

            实验方法原理 原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养,也叫初代培养。原代培养离体时间短,遗传性状和体内细胞相似,适于做细胞形态、功能和分化等研究。较为严格地说是指成功传代之前

背根神经节细胞的原代培养实验

实验方法原理原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养,也叫初代培养。原代培养离体时间短,遗传性状和体内细胞相似,适于做细胞形态、功能和分化等研究。较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞

神经组织块膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理 通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言,细胞更接近原始的生理环境,细胞具有更好的生理状态,封接后可维持更长的时间。实验材料 细胞试剂、试剂盒 人工脑脊液(ACSF)消化酶浓缩液ACSF通混合气尼龙网准备

神经组织块膜片钳全细胞记录实验

基本方案             实验方法原理 通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。

施万细胞的原代培养

实验方法原理 施万细胞是周围神经系统的成髓鞘胶质细胞,能有效地促进外周神经的再生。近年的研究表明,施万细胞也能改善中枢神经再生的微环境,因此体外培养施万细胞势在必行。目前最简便、快捷分离纯化施万细胞的方法是差速贴壁法,即根据不同细胞在培养器皿上贴壁速度的差异,去除成纤维等污染细胞,以获得高纯度施万细

神经组织块膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言,细胞更接近原始的生理环境,细胞具有更好的生理状态,封接后可维持更长的时间。实验材料细胞试剂、试剂盒人工脑脊液(ACSF)消化酶浓缩液ACSF通混合气尼龙网准备电极内

施万细胞的原代培养实验

基本方案实验方法原理施万细胞是周围神经系统的成髓鞘胶质细胞,能有效地促进外周神经的再生。近年的研究表明,施万细胞也能改善中枢神经再生的微环境,因此体外培养施万细胞势在必行。目前最简便、快捷分离纯化施万细胞的方法是差速贴壁法,即根据不同细胞在培养器皿上贴壁速度的差异,去除成纤维等污染细胞,以获得高纯度

施万细胞的原代培养实验

基本方案实验方法原理施万细胞是周围神经系统的成髓鞘胶质细胞,能有效地促进外周神经的再生。近年的研究表明,施万细胞也能改善中枢神经再生的微环境,因此体外培养施万细胞势在必行。目前最简便、快捷分离纯化施万细胞的方法是差速贴壁法,即根据不同细胞在培养器皿上贴壁速度的差异,去除成纤维等污染细胞,以获得高纯度

施万细胞的原代培养实验

实验方法原理施万细胞是周围神经系统的成髓鞘胶质细胞,能有效地促进外周神经的再生。近年的研究表明,施万细胞也能改善中枢神经再生的微环境,因此体外培养施万细胞势在必行。目前最简便、快捷分离纯化施万细胞的方法是差速贴壁法,即根据不同细胞在培养器皿上贴壁速度的差异,去除成纤维等污染细胞,以获得高纯度施万细胞

表达蛋白的生物学活性的检测

一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理    活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、   青链霉素溶

北京大学JBC新文章

  来自北京大学生命科学学院的研究人员在新研究中证实PACSIN1作为一种重要的Tau结合伴侣通过促进微管动力学调控了轴突延伸和分支。相关论文发表在11月16日的《生物化学杂志》(JBC)上。   来自北京大学生命科学学院的陈建国(Jianguo Chen)教授和滕俊琳(Junlin Teng

华人Nature子刊:出乎意料的癌症免疫疗法与疼痛的关联

  癌症免疫疗法被誉为癌症治疗中的里程碑突破,但是越来越多的医师们注意到此类疗法引发了新的副作用,如严重过敏反应,急性发作的糖尿病和心脏损伤。一些通过释放免疫系统来抵抗癌症的药物仅仅在约五分之一的病例中有效,这令许多患者开始怀疑这一疗法的可靠性。  不过最新一项研究指出,可以通过一种快速简单的方法来

细胞内钙成像实验

暂未评分点评实验,有机会获丁当奖励 +收藏                                   &n

内源性FSTL1 通过激活钠-钾泵引起的膜超极化调节痛觉...

内源性FSTL1 通过激活钠-钾泵引起的膜超极化调节痛觉信息传递突触是神经细胞间信息传递的关键部位,信号从一个神经元传递到另一个神经元需要通过突触这一“关卡”。神经元的膜电位和兴奋性对于调节其功能起十分重要的作用。神经元消耗能量,通过钠‐钾泵(Na+, K+‐ATPase,NKA)在细胞浆中

厦大夏宁邵最新综述:疾病病毒皮层蛋白功能

  水痘带状疱疹病毒(VZV)初次感染可引发水痘并可长期潜伏在宿主神经节内, 一旦再激活即可引起带状疱疹. VZV病毒具有疱疹病毒典型结构, 从内向外依次是DNA核心、衣壳、皮层和囊膜. VZV皮层是核衣壳与囊膜之间一层无固定形状的蛋白层. VZV皮层由多种蛋白组成, 但种类和功能仍未全部确定.  

长江学者JBC解析香豆素镇痛机制

  香豆素(Coumarin)及其衍生物是从九里香属植物中提取的一种天然芳香化合物。九里香属植物(Murraya)是广泛分布在东亚、澳大利亚和太平洋岛屿的一种开花植物,已被广泛用作药材,缓解各种疼痛,如头痛、风湿病疼痛、牙痛和毒蛇咬伤。然而,它们的镇痛成分和缓解疼痛的分子机制,仍然还知之甚少。延伸阅

(-)黄皮酰胺酰胺有利于海马回CA1区突触的突触传递

中国医学科学院北京协和医学院陈乃宏研究员团队近日在European Journal of  Pharmacology发表文章,主要探讨了(-)黄皮酰胺酰胺对海马回CA1区突触(hippocampal Schaffer  collateral-CA1 synapses)信号传递的作

华中科大刘剑峰教授团队Cell又发表重要研究成果

感知寒冷的能力对生命体至关重要。过度的寒冷刺激,轻则导致动物和人类发生组织损伤(冻伤)和引起疼痛,重则危及生命。为了生存,生物进化出了精巧的感知系统来感受外界的温度变化。尽管经过几十年的深入研究,人们对感知寒冷的分子机制仍然知之甚少。  9月5日,生命学院教育部分子生物重点实验室/科技部感知生物与技

人胚胎干细胞诱导产生之心肌细胞集群的新筛选方法,...

人胚胎干细胞诱导产生之心肌细胞集群的新筛选方法,可用于评估QT间隔所受影响程度问题:在心肌细胞复极化延迟研究中,常利用人胚胎干细胞诱导产生的心肌细胞集群进行药物的筛选。但由于诱导所获得的不同心肌细胞集群对离子通道阻塞(或激活)的反应(QT间隔)差别很大,因此,直接诱导产生的心肌细胞不能很好应用于药物

eLife:病患福利!胆汁淤积瘙痒的分子机制终于被破解了

  2019年9月10日,北京大学生命科学学院李毓龙课题组与宾夕法尼亚大学罗文琴课题组合作在国际知名学术期刊eLife上发表了题为“MRGPRX4 is a bile acid receptor for human cholestatic itch”的研究论文,报道了肝病胆汁淤积瘙痒的分子机制。  

研究发现KIF5B促进电压门控钠离子通道运输及功能

  电压门控钠离子通道是可兴奋细胞产生动作电位的基础,其亚型1.8(Nav1.8)选择性分布于外周神经系统,并对炎性痛和神经病理性痛有重要贡献。之前的研究显示,Nav1.8主要定位于背根神经节(DRG)神经元的细胞质内,外周炎症和神经损伤时聚集到坐骨神经中,但是Nav1.8在神经纤维中发生聚集的分子

鲍岚研究组J Neurosci解析钠离子通道作用机制

  电压门控钠离子通道是可兴奋细胞产生动作电位的基础,其亚型1.8(Nav1.8)选择性分布于外周神经系统,并对炎性痛和神经病理性痛有重要贡献。之前的研究显示,Nav1.8主要定位于背根神经节(DRG)神经元的细胞质内,外周炎症和神经损伤时聚集到坐骨神经中,但是Nav1.8在神经纤维中发生聚集的分子

中科院学者综述:总结miRNAs的研究进展与实验方法

  中科院生化细胞所课题组长鲍岚研究员课题组近年来致力于初级感觉神经元轴突中非编码RNA 的功能和调控机制研究,近期她与王斌博士受邀发表题为“Axonal miRNAs: Localization, Function and Regulatory Mechanisms During Axon Dev

显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程

实验概要本实验详细介绍了显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程。实验原理转基因小鼠制备的基本原理是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射法注入供体小鼠的受精卵(或着床前胚胎细胞),然后将此受精卵(或着床前胚胎细胞)再植入受体动物的输卵管(或子宫)中,使其发育成携带有外源基因的转基因动物,通过分