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实验方法原理 原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养，也叫初代培养。原代培养离体时间短，遗传性状和体内细胞相似，适于做细胞形态、功能和分化等研究。较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。 实验材料 孵化8-12d的鸡胚。孕15d及新生1-3d的大、小鼠仔鼠 试剂、试剂盒 含10%胎牛血清的DMEM培养基 神经元维持培养基(Neuroba......阅读全文
背根神经节（DRG）属外周感觉神经节，背根神经节神经元是躯干、四肢痛觉的初级传入神经元，具有传输和调节机体感觉、接受和传导伤害性感受的功能。痛觉产生过程中，背根神经节作为痛觉传入的初级神经元，在疼痛机制中发挥重要作用，主要表达于背根神经节神经元，与疼痛机制密切相关的离子通道及其受体是实现背根神经
免疫细胞化学的发展对许多领域的研究起到很大的推动作用，在神经科学的研究中尤为突出。本章 仅就免疫细胞化学在神经科学的基础研究方面的应用做一简要介绍。 一、确定神经递质的性质、定性和分布 早期的神经科学工作者应用传统的神经解剖学研究方法如甲基蓝染色法、镀银染色法等对中枢及外周神经系统的结构做了大量
实验方法原理 背根神经节(dorsalrootganglion,DRG)细胞起源千神经峙，外源性神经营养因子(NGF)能刺激DRG细胞生长发育并形成广泛的神经网络。目前，利用培养的DRG细胞进行轴突生长发育的研究，是最为经典和常用的方法之一。实验材料 孵化8-12d的鸡胚。孕15d及新生1-3d的大
实验方法原理原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养，也叫初代培养。原代培养离体时间短，遗传性状和体内细胞相似，适于做细胞形态、功能和分化等研究。较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞
肌萎缩侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis，ALS）是一种选择性侵犯上、下运动神经元，引起进行性瘫痪和肌肉萎缩的致命性神经系统退行性疾病，俗称“渐冻症”。目前由于ALS病因仍不清楚，发病机制错综复杂，因此，临床尚缺乏有效的预防和治疗措施。 近年来，多项研究表明
基本方案 实验方法原理 通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动，是电生理实验的基本方法。
实验方法原理 通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动，是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言，细胞更接近原始的生理环境，细胞具有更好的生理状态，封接后可维持更长的时间。实验材料 细胞试剂、试剂盒 人工脑脊液(ACSF)消化酶浓缩液ACSF通混合气尼龙网准备
实验方法原理通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动，是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言，细胞更接近原始的生理环境，细胞具有更好的生理状态，封接后可维持更长的时间。实验材料细胞试剂、试剂盒人工脑脊液(ACSF)消化酶浓缩液ACSF通混合气尼龙网准备电极内
绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如
许多PNS类型的神经元在离体状态时表现出简单的营养需求，只需提供单一的营养因子就足以使其在低密度时增殖。例如，大鼠交感神经元仅需NGF即能存活，在其生存期间，这些神经元可在严格局限条件下生长好几个月（即在无血清培养基中、或缺乏胶质细胞、或在化学限定基质上）。有证据表明NGF是活体中交感神经元存活的生
许多PNS类型的神经元在离体状态时表现出简单的营养需求，只需提供单一的营养因子就足以使其在低密度时增殖。例如，大鼠交感神经元仅需NGF即能存活，在其生存期间，这些神经元可在严格局限条件下生长好几个月（即在无血清培养基中、或缺乏胶质细胞、或在化学限定基质上）。有证据表明NGF是活体中交感神经元存活的生
许多PNS类型的神经元在离体状态时表现出简单的营养需求，只需提供单一的营养因子就足以使其在低密度时增殖。例如，大鼠交感神经元仅需NGF即能存活，在其生存期间，这些神经元可在严格局限条件下生长好几个月（即在无血清培养基中、或缺乏胶质细胞、或在化学限定基质上）。有证据表明NGF是活体中交感神经元存活的生
本期为大家带来的是神经生物学领域最近的研究进展，希望读者朋友们能够喜欢。 1. Nature：新研究首次揭示抑制年龄相关的神经活动增加竟可延长寿命 doi:10.1038/s41586-019-1647-8. 在一项针对线虫、小鼠和人类的研究中，来自美国哈佛医学院的研究人员发现在整个动物界
12月22日的Cell Research 杂志在线报道，中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所张旭研究组研究发现，通过高覆盖的单细胞测序和以神经元大小为参考的层次聚类，可对小鼠背根神经节初级感觉神经元进行分类，又通过全细胞膜片钳在体记录结合单细胞PCR方法可检测各类初级感觉神经元对外周皮肤刺
12月22日的Cell Research 杂志在线报道，中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所张旭研究组研究发现，通过高覆盖的单细胞测序和以神经元大小为参考的层次聚类，可对小鼠背根神经节初级感觉神经元进行分类，又通过全细胞膜片钳在体记录结合单细胞PCR方法可检测各类初级感觉神经元对外周皮肤刺
12月22日的Cell Research 杂志在线报道，中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所张旭研究组研究发现，通过高覆盖的单细胞测序和以神经元大小为参考的层次聚类，可对小鼠背根神经节初级感觉神经元进行分类，又通过全细胞膜片钳在体记录结合单细胞PCR方法可检测各类初级感觉神经元对外周皮肤刺
血液中循环流动的抗体能够进入大部分组织对病原体进行清除。而“免疫豁免“的组织与器官，比如大脑与外周神经系统，则会通过血-脑屏障以及血-神经屏障阻止抗体的进入。然而，在某些情况下抗体能够通过某种方式进入这些组织器官内部发挥免疫效应。为了研究这一现象背后的机制，来自耶鲁大学医学院的Akiko Iwa
实验方法原理 施万细胞是周围神经系统的成髓鞘胶质细胞，能有效地促进外周神经的再生。近年的研究表明，施万细胞也能改善中枢神经再生的微环境，因此体外培养施万细胞势在必行。目前最简便、快捷分离纯化施万细胞的方法是差速贴壁法，即根据不同细胞在培养器皿上贴壁速度的差异，去除成纤维等污染细胞，以获得高纯度施万细
基本方案实验方法原理施万细胞是周围神经系统的成髓鞘胶质细胞，能有效地促进外周神经的再生。近年的研究表明，施万细胞也能改善中枢神经再生的微环境，因此体外培养施万细胞势在必行。目前最简便、快捷分离纯化施万细胞的方法是差速贴壁法，即根据不同细胞在培养器皿上贴壁速度的差异，去除成纤维等污染细胞，以获得高纯度
实验方法原理施万细胞是周围神经系统的成髓鞘胶质细胞，能有效地促进外周神经的再生。近年的研究表明，施万细胞也能改善中枢神经再生的微环境，因此体外培养施万细胞势在必行。目前最简便、快捷分离纯化施万细胞的方法是差速贴壁法，即根据不同细胞在培养器皿上贴壁速度的差异，去除成纤维等污染细胞，以获得高纯度施万细胞
基本方案实验方法原理施万细胞是周围神经系统的成髓鞘胶质细胞，能有效地促进外周神经的再生。近年的研究表明，施万细胞也能改善中枢神经再生的微环境，因此体外培养施万细胞势在必行。目前最简便、快捷分离纯化施万细胞的方法是差速贴壁法，即根据不同细胞在培养器皿上贴壁速度的差异，去除成纤维等污染细胞，以获得高纯度
实验方法原理 作为中枢神经的重要组成部分，视神经及其胞体已成为中枢神经损伤修复的重要研究对象。中枢神经损伤修复研究中的许多重大发现，最初都是以视神经损伤为模型开展的。其中最为著名的，是苏国辉和Aguayo采用周围神经移植诱发视网膜神经节细胞（以下简称节细胞）再生的开拓性研究。视神经由众多神经纤维组成
视神经横断模型及荧光金逆行标记 坐骨神经移植及荧光金逆行性标记 荧光金逆行性标记（上丘及外侧膝状体）
实验方法原理作为中枢神经的重要组成部分，视神经及其胞体已成为中枢神经损伤修复的重要研究对象。中枢神经损伤修复研究中的许多重大发现，最初都是以视神经损伤为模型开展的。其中最为著名的，是苏国辉和Aguayo采用周围神经移植诱发视网膜神经节细胞（以下简称节细胞）再生的开拓性研究。视神经由众多神经纤维组成，
来自北京大学生命科学学院的研究人员在新研究中证实PACSIN1作为一种重要的Tau结合伴侣通过促进微管动力学调控了轴突延伸和分支。相关论文发表在11月16日的《生物化学杂志》(JBC)上。 来自北京大学生命科学学院的陈建国(Jianguo Chen)教授和滕俊琳(Junlin Teng
一、MTT比色法检测细胞活性（一）原理活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷，其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。（二）试剂准备1、青链霉素溶液（100X）：青霉素100万U，链霉素100万U，溶于100mlddH2
癌症免疫疗法被誉为癌症治疗中的里程碑突破，但是越来越多的医师们注意到此类疗法引发了新的副作用，如严重过敏反应，急性发作的糖尿病和心脏损伤。一些通过释放免疫系统来抵抗癌症的药物仅仅在约五分之一的病例中有效，这令许多患者开始怀疑这一疗法的可靠性。 不过最新一项研究指出，可以通过一种快速简单的方法来
一、MTT比色法检测细胞活性（一）原理 活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷，其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。（二）试剂准备1、 青链霉素溶
瑞芬太尼是一种选择性、超短效阿片受体激动剂，因其独特的脂性结构使其通过血液和组织中的非特异性酯酶快速水解，终末清除半衰期小于10 min。由于瑞芬太尼生物转化非常快速、完全，因此，其输注时间长短基本对苏醒时间无影响。不论输注时间长短和剂量多少，其时量相关半衰期大约3 min，且不易蓄积。肝肾功能
内源性FSTL1 通过激活钠-钾泵引起的膜超极化调节痛觉信息传递突触是神经细胞间信息传递的关键部位，信号从一个神经元传递到另一个神经元需要通过突触这一“关卡”。神经元的膜电位和兴奋性对于调节其功能起十分重要的作用。神经元消耗能量，通过钠‐钾泵（Na+, K+‐ATPase，NKA）在细胞浆中