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人胚肾 293 (HEK293) 细胞在重组蛋白表达中是最常见的宿主细胞。 这类细胞能够表达大量的膜蛋白，如 G 蛋白偶联受体 (GPCR) ，是无法在最常见的生物制药生产宿主，如：中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中作表达。 HEK293 虽然是蛋白表达的极好宿主，然而 HEK293 细胞在大规模悬浮培养细胞其结团的问题限制了其在生物过程中的使用。近来许多公司都开发了特殊的培养基配方和抗结团剂，以协助解决这个问题。本文为一成功案例利用 New Brunswick S41i CO2 恒温摇床进行人类重组蛋白表达的HEK293细胞系从血清贴壁培养驯化至无血清单细胞悬浮培养。驯化过的HEK293细胞系如同典型不结团的悬浮细胞系。我们预期这类细胞系能在生物过程中进行标准的批次或流加培养，如同传统的CHO细胞在搅拌式生物反应器进行扩增培养。Solving the Aggregation Problem......阅读全文
人胚肾 293 (HEK293) 细胞在重组蛋白表达中是最常见的宿主细胞。 这类细胞能够表达大量的膜蛋白，如 G 蛋白偶联受体 (GPCR) ，是无法在最常见的生物制药生产宿主，如：中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中作表达。 HEK293 虽然是蛋白表达的极好宿主，然而 H
制药公司的管线充满了生物药物。许多是创新的治疗蛋白质，但越来越多的代表生物仿制药和biobetters（图1）（1）。biobetters通常被定义为“基于创新生物制品，但具有改进的性质”（2）。 他们的发展受益于已知的治疗方法和作用机制，从而导致低风险，快速通向临床，从而降低成本。优势是通过延
重组蛋白是研究生物学过程的重要工具。需要使用表达系统来对其进行制备。合适表达系统的选择取决于重组蛋白的特性、重组蛋白的预期应用以及该系统能否生产足够量的蛋白质。作者： 伯吉斯等,主译：陈薇，本实验来自「蛋白质纯化指南」实验步骤一、引言选 择 合 适 醜 组 蛋 白 表 达 方 法 对 于 能 否 及
实验步骤 一、引言 选 择 合 适 醜 组 蛋 白 表 达 方 法 对 于 能 否 及 时 获 取 所 需 数 量 和 质 量 的 重z组蛋白非常关键。选 择 了 错 误 的表达宿主可 能 导 致 蛋 白 质错 误 折 叠 或
在细胞生物学中，一个常见的问题是如何获取与细胞功能相关的各种定量测量信息。在免疫细胞化学中也存在同样的问题。制作免疫细胞化学标本环节 较多，只要有一个环节 失误就会影响实验结果，除了需要精制的药品外，还需要熟练的技术。那么，做成了理想的标本后，如何进行观察，才能获得尽量多的的各种定量信息，而且使这些
在细胞生物学中，一个常见的问题是如何获取与细胞功能相关的各种定量测量信息。在免疫细胞化学中也存在同样的问题。制作免疫细胞化学标本环节 较多，只要有一个环节 失误就会影响实验结果，除了需要精制的药品外，还需要熟练的技术。那么，做成了理想的标本后，如何进行观察，才能获得尽量多的的各种定量信息，而且使这些
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验 实验步骤
1、核酸抽提原理 简单地讲，核酸抽提包含样品的裂解和纯化两大步骤。裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程，纯化则是使核酸与裂解体系中的其它成分，如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。 经典的裂解液几乎都含有去污剂 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等
艾滋病(AIDS)又称获得性免疫缺陷综合征，是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一种免疫缺陷性疾病。HIV感染的诊断是艾滋病预防控制 工作的重要组成部分，建立敏感实用的检测方法对于监测、诊断或血液筛查，控制艾滋病的流行显得尤为重要。以下本文就HIV的检测技术现状及进展做一综述。1
基因组编辑技术CRISPR/Cas9被《科学》杂志列为2013年年度十大科技进展之一，受到人们的高度重视。CRISPR是规律间隔性成簇短回文重复序列的简称，Cas是CRISPR相关蛋白的简称。CRISPR/Cas最初是在细菌体内发现的，是细菌用来识别和摧毁抗噬菌体和其他病原体入侵的防御系统。
二、用 于 鉴 定 P T M 的富 集 技 术2.1 磷酸化丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的可逆磷酸化也许是研究最为深人的 PT M 。蛋白质磷酸化信号网络介导细胞对与不同的应激因子、生长因子、细胞因子以及细胞间相互作用作出响应。憐酸化还影响多种细胞进程，如增殖、凋亡 、迁移 、转录和蛋白质翻译（W
SSR分子标记实验: PCR反应实验操作注意事项:PCR 反应过程中应特别注意不要使样品相互污染， 以免造成试验结果不准确， 同时也要注意所加试剂或样品必须是经过混匀后的液体， 这样才能保证反应液各成分的浓度和体积的均一性 所用试剂需从正规商家购进， 以保证试剂的质量。BEAS-2B细
实验步骤 一、常规操作方案 下面这个典型流程对许多蛋白质都有很好的效果。本 操 作 方 案 是 根 据 N g u y e n 等(1993)首先开发的方案改编而成，并用于冷泉港蛋白质纯化与鉴定课程的不溶性重组蛋白纯化部分（Bu
实验步骤一、常规操作方案下面这个典型流程对许多蛋白质都有很好的效果。本 操 作 方 案 是 根 据 N g u y e n 等(1993)首先开发的方案改编而成，并用于冷泉港蛋白质纯化与鉴定课程的不溶性重组蛋白纯化部分（Burgess and K n u t h ， 1996)。其他类似的流程也可能
图a. 用ELISA法测得培养液中IgG的含量；横轴为天数，纵轴为IgG滴度。 采用高密度瞬时转染（High-density transfection）的方法，可以在HEK-293 EBNA1细胞中大量表达重组蛋白。实验表明，该方法具有操作简单，培养周期短，转染效率高，批次产量高的优
当你读到这篇文章时，又一波CRISPR工具将会浮出水面。它们将需要接受测试和优化。不过，如果你询问开发者你在开展概念验证研究时是否应当试用它们时，你将仅获得鼓励。毕竟，迄今为止它们还不能从Addgene公司获得，但是将会很快上市了。 最新发布的一系列CRISPR工具包括新的谱系追踪方法，该方法
问世间谁人无忧，唯神仙逍遥自在。 作为一名终日泡在实验室的实验君， 如何在细胞实验中无所不能，超脱轮回 做到一个人人羡慕的细胞大神呢？ 且看向这里，成为细胞大神的六个细节。 1. 过滤体系 自从出现瓶装培养基之后，培养基过滤的需求就减少了。有些时候，一些特定细胞培养支持物的添加可能
问世间谁人无忧，唯神仙逍遥自在。作为一名终日泡在实验室的实验君，如何在细胞实验中无所不能，超脱轮回做到一个人人羡慕的细胞大神呢？且看向这里，成为细胞大神的六个细节。 1. 过滤体系 自从出现瓶装培养基之后，培养基过滤的需求就减少了。有些时候，一些特定细胞培养
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，这些问题从细胞生长角度来说，针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好，甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞不贴壁可能原因： •胰蛋白酶消化过度；•支原体污染；•培养基pH值过碱（NaHCO3分解）；•细胞老化；•接种细胞起始浓
创建低温保存T细胞库和冷冻培养基配方创建细胞库对本研究而言非常重要， 因为在进行广泛研究时， 购买多瓶原代人类 T细胞会使得成本过高。 一旦发现T细胞扩增的最佳条件， 便选择一包密度最高、 生存能力最强的Evolve袋复冻回细胞库中。 低温保存的培养基配方如表2所示。 首先，向已用培养基的细
在New Brunswick S41i CO2恒温摇床内采用透气袋实现人类T细胞快速扩增摘要近年来细胞治疗领域取得的进步大大提升了对T细胞扩增技术的需求。 T细胞必须能够迅速扩增， 才能在维持高存活率和T细胞属性的同时达到高细胞密度。 搅拌罐生 物反应器是实现大规模扩增的最佳细胞培养工具之一。
不仅如此，奥豪斯的每一款摇床都有其独特之处，以适应不同实验的需求。为此，专为适应实验室极端环境的分体式摇床诞生了！能实现精准温度控制的冷冻式恒温摇床也出现了！可以在大负载振荡实验下保证准确的速度控制和振荡一致性的大负载圆周式摇床也应运而生！ 极端环境
慢病毒作为基因载体在治疗各类遗传性和后天性的人类疾病中倍受欢迎。从基础研究发展到临床阶段，高浓度纯化的载体需求量越来越大，相应的方法也层出不穷。目前大多数慢病毒的生产是在方瓶、平皿等体系中加入胎牛血清贴壁培养HEK293细胞系（293T和293E），通过多质粒瞬时转染包装得到病毒，但是该方法难以
对恒温培养振荡器的转速和温度实行精确控制的技术探讨唐新南 沈水兴 严广号，上海智城分析仪器制造有限公司 上海~恒温培养振荡器（以下简称：恒温摇床）是医学、生物学、分子学、制药、食品、环保等研究应用领域有着重要应用的样品前处理设备。鉴于作为样品的细菌、细胞等微量活性物质在生长过程中需要一个优良的生长环
免疫细胞化学的发展对许多领域的研究起到很大的推动作用，在神经科学的研究中尤为突出。本章 仅就免疫细胞化学在神经科学的基础研究方面的应用做一简要介绍。 一、确定神经递质的性质、定性和分布 早期的神经科学工作者应用传统的神经解剖学研究方法如甲基蓝染色法、镀银染色法等对中枢及外周神经系统的结构做了大量
《Cell Stem Cell》杂志是2007年Cell出版社新增两名新成员之一(另外一个杂志是Cell Host & Microbe)，这一杂志内容涵盖了从最基本的细胞和发育机制到医疗软件临床应用等整个干细胞生物学研究内容。这一杂志特别关注胚胎干细胞、组织特异性和癌症干细胞的最新成
实验步骤 总蛋白质的检测 1. 总蛋白质色度法染色 简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群，使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度，那么银
微生物检测涉及多行业和领域，在实验室检测中有着重要的地位，今天和大家一起对微生物检测中的一些基础操作进行汇总和梳理！ 接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。接种和分离工具1. 接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.
常规的转染包括脂质体，电转化和病毒法。普通的293、Hela等细胞系，脂质体转染也能达到70-80%。而对于其他一些极难转染的细胞，如原代神经元，原代神经干细胞，免疫细胞等来说，脂质体转染不仅转化效率很低（约10%），而且细胞死亡率极高。因此有些研究人员不得不转用更加昂贵而且毒性更大的病毒包被法。病
来自国家自然科学基金委员会的消息，国家自然科学基金委员会公布了2012年度面上项目、重点项目、重大国际(地区)合作研究项目、青年科学基金项目、地区科学基金项目、海外及港澳学者合作研究基金项目、科学仪器基础研究专款项目等方面的评审结果。有关评审结果将通知相关依托单位，其科研管理人员可登录