N糖基化治疗性抗体结构表征方法和治疗潜力的研究

自20世纪80年代以来,单克隆抗体作为治疗性药物得到快速的发展。与小分子药物相比,单克隆抗体的优势在于具有较高的靶向特异性、毒副作用小和半衰期长的优势。而不足之处包含复杂的生产、纯化过程,以及翻译后修饰(PTM)导致单克隆抗体结构和功能的异质性。 在这些翻译后修饰的情况中,Fc区域的糖基化是导致功能异质性的关键,Fc区第297位天冬氨酸(Asn)上有两个保守的N-糖基化位点,其在抗体的效应功能中起重要作用,包括抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)、补体依赖的细胞毒作用(CDC),抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)。此外,有研究结果显示Fc区部分唾液酸化可以使抗体获得抗炎作用。为了更好的利用N-糖基化治疗性抗体的优势,本篇文章作者主要对对Fc区N-糖基化聚糖的结构、表征方法和治疗能力进行详细介绍。 1.N-聚糖的形成 在真核生物中,N-聚糖的形成首先通过寡糖基转移酶复合体识别天冬酰胺-X-丝氨酸/苏氨酸(NXS/T......阅读全文

N糖基化治疗性抗体结构-表征方法和治疗潜力的研究

  自20世纪80年代以来,单克隆抗体作为治疗性药物得到快速的发展。与小分子药物相比,单克隆抗体的优势在于具有较高的靶向特异性、毒副作用小和半衰期长的优势。而不足之处包含复杂的生产、纯化过程,以及翻译后修饰(PTM)导致单克隆抗体结构和功能的异质性。  在这些翻译后修饰的情况中,Fc区域的糖基化是导

N糖基化治疗性抗体—结构、表征方法和治疗潜力的研究

  自20世纪80年代以来,单克隆抗体作为治疗性药物得到快速的发展。与小分子药物相比,单克隆抗体的优势在于具有较高的靶向特异性、毒副作用小和半衰期长的优势。而不足之处包含复杂的生产、纯化过程,以及翻译后修饰(PTM)导致单克隆抗体结构和功能的异质性。  在这些翻译后修饰的情况中,Fc区域的糖基化是导

重组人EPO-N联糖基化和O联糖基化的全面表征

"免疫球蛋白G(IgG)形态是许多蛋白质治疗药物的开发方向。与此同时,各种重组人体激素和酶的问世也让许多高效的患者疗法得以实现。例如,促红细胞生成素(EPO)α等刺激红细胞生成的治疗药物很早以前就被用于治疗贫血症。这一增加患者红细胞数的疗法最早由Epogen®公司商品化,该产品于1989年经FDA批

N糖基化的过程

N-糖的合成起始于内质网膜胞质一侧,多萜醇(dolichol)磷酸化后形成活化态,在糖基转移酶ALG7和ALG13/14的作用下将两个N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)与磷酸多萜醇链接,后在ALG1,ALG2和ALG11的作用下加上5个甘露糖(mannose)分子,通过Flipase转运至内质网腔一侧。

关于N糖基化的简介

  N-连接糖基化(N-linked glycosylation) 是一种新生肽链的共翻译或翻译后修饰方式,糖链通过与新生肽链中特定天冬酰胺(N-X-S/T,X!=P)的自由-NH2基连接,所以将这种糖基化称为N-连接的糖基化。N-糖基化的过程在内质网(Endoplasmic reticulum,E

简述N糖基化的修饰

  在内质网中糖链的修饰包括切除末端的3分子葡萄糖和b支的末端甘露糖,进入内质网后在各种糖基转移酶和糖苷酶的剪切和加工后最终形成复杂型,杂交型和高甘露糖型的N-糖链。在植物中复杂糖和杂交糖第二个N-乙酰葡糖胺还连接一个木糖,形成植物特有的复杂N-糖的糖型。

N连接糖基化的概念

N-连接糖基化(N-linked glycosylation) 是一种新生肽链的共翻译或翻译后修饰方式,糖链通过与新生肽链中特定天冬酰胺(N-X-S/T,X!=P)的自由-NH2基连接,所以将这种糖基化称为N-连接的糖基化。N-糖基化的过程在内质网(Endoplasmic reticulum,ER)

从罗氏无N糖基化的PDL1抗体说起

  Fc融合蛋白一般通过Fc的FcRn 介导的循环提高目标蛋白药物的半衰期,改善药代动力学特征,作用机制不依赖于ADCC/CDC活性。一些非癌适应症抗体药物,以及肿瘤免疫疗法抗体药物如PD-1/PD-L1抗体,其作用机制同样不依赖于ADCC、CDC活性。这时Fc的细胞毒性作用ADCC、CDC可能带来

关于N糖基化的合成介绍

  N-糖的合成起始于内质网膜胞质一侧,多萜醇(dolichol)磷酸化后形成活化态,在糖基转移酶ALG7和ALG13/14的作用下将两个N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)与磷酸多萜醇链接,后在ALG1,ALG2和ALG11的作用下加上5个甘露糖(mannose)分子,通过Flipase转运至内质网腔一

N糖基化的主要内容

N-糖基化主要包括N-糖的合成,转移和修饰三个过程。N-糖的合成和转移在内质网中进行,其修饰过程在内质网和高尔基体中都存在。

关于N糖基化的转移介绍

  N-糖参与新生肽链的修饰是通过寡糖基转移酶(oligosaccharyltransferase,OST)复合体进行的。该糖基转移酶是一个多聚复合体,在酵母中由Wbp1p,Stt3p,Ost1p,Swp1p,Ost1p,Ost4p,Ost5p和Ost3p/Ost6p组成,负责将合成的寡糖链转移至新

【综述】重组蛋白糖基化表征的进展与展望

  内容  1. 前言:生物制品糖基化表征的重要性  2. 糖蛋白表征用分析方法  2.1 糖基化特性  2.1.1 多糖的直接分析  2.1.2 糖谱分析  2.1.3 N-糖的异质性分析  2.1.4 单糖的分析  2.2 多糖分析用技术  2.2.1 糖分离技术  2.2.2 多糖检测技术  

Cell:不同生物的N糖基化修饰途径

  蛋白质翻译后修饰是指蛋白质在翻译后的化学修饰,它包含磷酸化、乙酰化、泛素化和甲基化等类型, 在调节蛋白质活性、结构和功能等方面发挥着重要的作用, 其重要性已被人们广泛认知。  随着许多新的翻译后修饰类型的出现, 蛋白质翻译后修饰这一研究领域变得越来越复杂而有趣。其中糖类的翻译后修饰能帮助蛋白定位

控制融合蛋白生产中的糖基化生成有潜力的biobetter

  制药公司的管线充满了生物药物。许多是创新的治疗蛋白质,但越来越多的代表生物仿制药和biobetters(图1)(1)。biobetters通常被定义为“基于创新生物制品,但具有改进的性质”(2)。 他们的发展受益于已知的治疗方法和作用机制,从而导致低风险,快速通向临床,从而降低成本。优势是通过延

沃特世HILIC糖蛋白分析柱-为生物治疗提供多聚糖占比信息

  沃特世介绍了一种新型ACQUITY UPLC® BEH Amide 300Å 1.7-µm 糖蛋白分析专用柱,它可帮助生物制药公司更深入地了解他们所研发的治疗性蛋白中糖基分子的位置。精确鉴定糖基在蛋白质结构中的位置对于获得安全和有效的生物治疗性蛋白而言至关重要。  正在申请ZL的新型ACQUIT

布鲁克糖基化分析用户技术交流研讨会圆满落幕

  分析测试百科网讯 2016年4月8日,布鲁克糖基化分析用户技术交流研讨会在上海金茂君悦大酒店举办,会议吸引了中国生物制药企业的研发高层参加,包括强生、信达、药明康德等,邀请来自韩国、德国、日本的用户及布鲁克生物制药专家就质谱技术应用于生物制药研发的糖基化应用及未来趋势作精彩的演讲报告,更好地阐明

抗体结构

抗体(antibody,Ab)是机体免疫细胞被抗原激活后,由分化成熟的终末B细胞--浆细胞合成、分泌的一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗体是具有4条多肽链的对称结构,其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链),含450?550个氨基酸残基,相对分子质量在55000?700

为何要关注抗体药物的糖基化修饰?

   在众多的蛋白质翻译后修饰中,糖基化修饰是最重要和最复杂的修饰之一,也是评价抗体的关键质量属性之一。单抗药物功能的实现与其糖基化修饰密切相关,糖基化修饰会影响蛋白的性能,如构象、稳定性、溶解度、药物代谢动力学、活性及免疫原性。本文中,笔者就糖基化及其对抗体药物的稳定性/半衰期、安全性及生物活性进

研究抗体药物的糖基化修饰为何重要?

  在众多的蛋白质翻译后修饰中,糖基化修饰是最重要和最复杂的修饰之一,也是评价抗体的关键质量属性之一。单抗药物功能的实现与其糖基化修饰密切相关,糖基化修饰会影响蛋白的性能,如构象、稳定性、溶解度、药物代谢动力学、活性及免疫原性。本文中,笔者就糖基化及其对抗体药物的稳定性/半衰期、安全性及生物活性进行

孙士生张军英报道糖基化位点特异性糖链结构解析新方法

  N-连接糖蛋白广泛分布于细胞膜表面和各种体液中,参与着细胞间识别和通讯、免疫应答、及病原体的宿主识别等重要生物过程。因此,对于蛋白糖基化的精确解析对于理解其生物学功能具有重要意义。近年来,随着完整糖肽分析方法的发展,同时解析糖基化位点和糖链组成信息已基本可以实现。但由于受到糖基化微不均一性和结构

N乙酰神经氨酸的分子结构数据

1、摩尔折射率:65.662、摩尔体积(cm3/mol):188.03、等张比容(90.2K):588.14、表面张力(dyne/cm):95.75、极化率(10-24cm3):26.03

关于糖基化的基本概念介绍

  指在糖基转移酶作用下,非糖生物分 子与糖共价结合的过程或反应。根据连接方式可将 糖基化分为D连接糖基化和Ⅳ-链糖基化。上市的重组单克隆抗体(单抗)药物除不含Fc段的 5个片段抗体为非 糖基化抗体外,其余全部为N-连接糖基化单抗,Fc 融合蛋白(如Etanercept等)还存在有连接糖基 化。N-

糖基化的概念和举例

指在糖基转移酶作用下,非糖生物分 子与糖共价结合的过程或反应。根据连接方式可将 糖基化分为D连接糖基化和Ⅳ-链糖基化。上市的重组单克隆抗体(单抗)药物除不含Fc段的 5个片段抗体为非 糖基化抗体外,其余全部为N-连接糖基化单抗,Fc 融合蛋白(如Etanercept等)还存在有连接糖基 化。N-糖基

微生物所在PD1糖基化修饰与抗体药物作用机制中获进展

  近年来,学界在以PD-1/PD-L1为靶点的单克隆抗体治疗在肿瘤免疫治疗中获进展。PD-1是一个高度糖基化的免疫分子,肿瘤的发生发展常伴随糖基化修饰的异常,且PD-1的N-糖基化位点在人群中存在一定多态性。因此,研究PD-1的糖基化修饰及其对抗体药物作用的影响,对于理解以PD-1为靶点的抗体药物

糖基化与免疫

   蛋白糖基化是真核生物常见的蛋白质翻译后修饰过程,合成后的或正在合成的蛋白质在糖基转移酶的作用下,将活化的单糖加到肽链上。根据糖与肽链中氨基酸的连接方式不同,可将糖基化修饰分为三种形式:N-糖苷(N-glycan)、O-糖苷(O-gly-can)、糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphat

PPTD-2018分论坛:药物表征与质量保证

  分析测试百科网讯 2018年10月10日,由国际计量局(BIPM)、中国计量科学研究院(NIM)和中国食品药品检定研究院(NIFDC)主办,中国分析测试协会(CAIA) 承办,国际检验医学溯源性联合委员会、成都医学城、全国临床医学计量技术委员会协办的“2018年蛋白和肽类药物及诊断试剂研发与质控

让高通量的蛋白分析成为可能

  抗体药物研发是目前药物研究的热点之一。在疫苗工程,治疗性抗体筛选以及糖基化研究中都会有大量的蛋白样品需要被分析。目前许多实验室仍依赖于SDS- PAGE技术,这一方法耗时耗力不说,且通量有限,而诸如CE和HPLC等方法则无法进行高通量分析,这导致了整个研究进程无法高效运行。   为了推动这

武汉病毒所揭示拉沙热病毒囊膜糖蛋白N糖基化修饰机制

  病毒学国际学术期刊Journal of Virology 近期在线发表了生物安全大科学中心/中国科学院武汉病毒研究所肖庚富团队的最新研究成果,论文题为Comprehensive Interactome Analysis Reveals that STT3B is Required for the

科学家揭示拉沙热病毒囊膜糖蛋白N糖基化修饰机制

  病毒学国际学术期刊Journal of Virology 近期在线发表了生物安全大科学中心/中国科学院武汉病毒研究所肖庚富团队的最新研究成果,论文题为Comprehensive Interactome Analysis Reveals that STT3B is Required for the

干货!扫描电镜表征方法:结构、性能、原理

  在材料领域中,扫描电镜技术发挥着极其重要的作用,利用扫描电镜可以直接研究晶体缺陷及其产生过程,可以观察金属材料内部原子的集结方式和它们的真实边界,也可以观察在不同条件下边界移动的方式,还可以检查晶体在表面机械加工中引起的损伤和辐射损伤等。  扫描电镜的结构及主要性能  扫描电镜可粗略分为镜体和电