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实验原理 琼脂糖凝胶电泳常用于分离、鉴定 DNA、RNA 分子混合物，以琼脂凝胶作为支持物，利用 DNA 分子在电场中时的电荷效应和分子筛效应，达到分离混合物的目的。DNA 分子在高于其等电点的溶液中带负电，在电场中由阴极向阳极运动。在一定的电场强度下，忽略DNA分子携带的电荷，DNA 分子的迁移速度取决于分子筛效应，即分子本身的大小和构型是主要的影响因素。DNA 分子的迁移速度与相对分子量成反比。 不同构型的 DNA 分子的迁移速度不同。如环形 DNA 分子样品，其中有三种构型的分子：超螺旋分子（cccDNA）、开环分子(ocDNA)、和线形 DNA 分子(IDNA)。这三种不同构型分子进行电泳时的迁移速度大小顺序为:cccDNA＞IDNA＞ocDNA。 核酸电泳通常使用琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶两种介质。琼脂糖是一种聚合链线性分子；聚丙烯酰胺凝胶由丙烯酰胺（Acr）在 N,N,N′-四甲基乙二胺（......阅读全文
【概述】带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动，称为电泳(electrophoresis, EP)。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。 1807年，由俄国莫斯科大学的斐迪南·弗雷德里克·罗伊斯（Ferdinand Frederic Reuss）最早发现。
【实验目的】了解和掌握双向电泳技术,并学习用它来研究与DNA 复制相关的问题.【实验原理】DNA 分子有线状的,还有一些非线状的,如复制叉和重组DNA 结构.双向琼脂糖凝胶电泳技术就是被人们开发用以研究一些非线状DNA 分子的.双向琼脂糖凝胶电泳技术(2-D gel)实际上可分为两类：中性/
电泳技术原理（以琼脂糖凝胶电泳为例） 1、首先介绍使用的载体--琼脂糖。 琼脂糖是线性的多聚物，基本结构是1,3连结的β-D-半乳呋喃糖和1,4连结的3,6-脱水α-L-半乳呋喃糖。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解，温度下降到35-40℃时形
一、琼脂糖凝胶的特点 天然琼脂（agar）是一种多聚糖，主要由琼脂糖（agarose，约占80％）及琼脂胶（agaropectin）组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质，不带电荷，而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖，由于这些基团带有电荷，
本实验采取碱裂解法的方法来提取质粒 ，之后经琼脂糖凝胶电泳来检测DNA。质粒DNA 的提取与鉴定(一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变
分散介质中的带电粒子在直流电场的作用下，向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳（electrophoresis）。蛋白质为两性电解质，在不同pH溶液中带不同的电荷，从而在直流电场中能够泳动，这就是蛋白质的电泳现象。1937年瑞典化学家Tiselius首先建立了蛋白质的界面电泳技术，并成功地将血清
分散介质中的带电粒子在直流电场的作用下，向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳（electrophoresis）。蛋白质为两性电解质，在不同pH溶液中带不同的电荷，从而在直流电场中能够泳动，这就是蛋白质的电泳现象。1937年瑞典化学家Tiselius首先建立了蛋白质的界面电泳技术，并成功地将血清蛋
实验方法原理常规聚丙烯酰胺凝胶电泳后的检测，对于不同的目的，应采用不同的检测方法。由于这种电泳方法不破坏蛋白质的生物活性，所以可选用的检测方法很多。试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤一、早期染色方法用染料和生物大
摘 要：当今生物学领域的研究一个热点之一是细胞凋亡。开展对细胞凋亡的研究，首先要解决是方法学问题。作者从凋亡细胞的特征性核DNA片段检测着手，阐述了多种凋亡细胞核DNA片段检测方法以及近年来的一些新进展。细胞凋亡（apoptosis）又称细胞凋谢或称程序性细胞死亡（Programmed
收集细胞，用 D-PBSA 洗涤，重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液，制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置，取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体，将琼脂糖凝胶置于其中，电泳 25 min，加入酶反应试剂，孵育 5~20 min 后，冲洗凝胶，
蛋白纯化经验指南生物谷整理 http://www.bioon.com 原创：Chromatography weixingui@263.net， 推荐书籍：《蛋白纯化与实验鉴定指南》、《生物工程下游技术》、《酶工程》、《酶制剂工业》 1) 我现在手头
实验原理琼脂糖凝胶电泳常用于分离、鉴定 DNA、RNA 分子混合物，以琼脂凝胶作为支持物，利用 DNA 分子在电场中时的电荷效应和分子筛效应，达到分离混合物的目的。DNA 分子在高于其等电点的溶液中带负电，在电场中由阴极向阳极运动。在一定的电场强度下，忽略DNA分子携带的电荷，DNA 分
实验方法原理收集细胞，用 D-PBSA 洗涤，重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液，制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置，取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体，将琼脂糖凝胶置于其中，电泳 25 min，加入酶反应试剂，孵育 5~20 m
实验方法原理 收集细胞，用 D-PBSA 洗涤，重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液，制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置，取 1~2 μl的细胞抽提物、标准
摘要 以有机玻璃板等材料，制作出成奉低廉的微型琼脂糖凝胶电泳槽。经试用，具有操作简便、使用安全、节省试剂等优点，能满足教学与科研的需要。 琼脂糖凝胶电泳是核酸研究工作中必不可少的工具，在生物化学和分子生物学教学和科研中具有重要作用。琼脂糖凝胶电泳槽的制作原理虽简单，但由于琼脂糖凝
一. 实验目的1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术，学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度，并能对实验结果进行分析。二. 实验原理1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的
电泳技术是一门古老而又年轻的技术。早在1809年俄国物理学家Reuss就进行了世界上第一次电泳实验，此后各种电泳技术及仪器相继问世，广泛应用于蛋白质、氨基酸、核酸、其他有机化合物甚至无机离子等领域的分离和／或鉴定。近年来，先进的电泳技术和各种自动电泳分析系统被越来越多的临床实验室所采用检验|地带网搜
实验方法原理 在 λ 噬菌体中构建基因组 DNA 文库的步骤与在黏粒载体中的步骤基本一致。在这两种系统中，真核 DNA 在体外与载体 DNA 连接，形成能包装到 λ 噬菌体颗粒中
摘要以有机玻璃板等材料，制作出成奉低廉的微型琼脂糖凝胶电泳槽。经试用，具有操作简便、使用安全、节省试剂等优点，能满足教学与科研的需要。 琼脂糖凝胶电泳是核酸研究工作中必不可少的工具，在生物化学和分子生物学教学和科研中具有重要作用。琼脂糖凝胶电泳槽的制作原理虽简单，但由于琼脂糖凝胶电泳槽梳子
实验方法原理 收集细胞，用 D-PBSA 洗涤，重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液，制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置，取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体，将琼脂糖凝胶置于其中，电泳 25 min，加入酶反应试剂，孵育 5~20
实验方法原理 在 λ 噬菌体中构建基因组 DNA 文库的步骤与在黏粒载体中的步骤基本一致。在这两种系统中，真核 DNA 在体外与载体 DNA 连接，形成能包装到 λ 噬菌体颗粒中的多联体。构建在 λ 噬菌体中的文库以具有感染性的重组噬菌体形式贮存和增殖。实验材料 T4 噬菌体 DNA 连接酶牛小肠碱
来自宾夕法尼亚州费城杰佛逊医学院(Jefferson Medical College）外科系，以及Kimmel肿瘤中心（Kimmel Cancer Center）的研究人员申请到了一项新专利，这项专利也许未来某天会成为DNA分析过程中的关键技术，而且这一发现也可以应用于多个领域，比如法医鉴定，克隆或
电泳仪的这些常识你知道吗？*节 电泳原理第二节 常用电泳方法第三节 常用电泳仪的基本结构及技术指标 第四节 常用电泳仪简介第五节 毛细管电泳第六节 电泳仪的
分子杂交技术 互补的核苷酸序列通过Walson-Crick 碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA 分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DN
蛋白质纯化过程中常遇见一些问题，这里整理了以下几个蛋白质纯化实验中遇见的问题及其解决方案。1)我现在手头有个融合蛋白，纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析，之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列，没有问题。细胞破碎后，融合蛋白在沉淀里，我
蛋白纯化过程中常遇见一些问题，这里整理了以下几个蛋白纯化实验中遇见的问题及其解决方案。1)我现在手头有个融合蛋白，纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析，之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列，没有问题。细胞破碎后，融合蛋白在沉淀里，我用助
蛋白纯化过程中常遇见一些问题，这里整理了下几个蛋白纯化实验中的遇见的问题及其解决方式。1)我现在手头有个融合蛋白，纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析，之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列，没有问题。细胞破碎后，融合蛋白在沉淀里，我用助
蛋白纯化过程中常遇见一些问题，这里整理了下几个蛋白纯化实验中的遇见的问题及其解决方式。1)我现在手头有个融合蛋白，纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析，之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列，没有问题。细胞破碎后，融合蛋白在沉淀里，我用助
在 λ 噬菌体中构建基因组 DNA 文库的步骤与在黏粒载体中的步骤基本一致。在这两种系统中，真核 DNA 在体外与载体 DNA 连接，形成能包装到 λ 噬菌体颗粒中的多联体。构建在 λ 噬菌体中的文库以具有感染性的重组噬菌体形式贮存和增殖。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理
说到Western Blotting，估计所有技术员都会联想到蓝底上的黑色条带，或者是仪器扫描的白底黑条图片。经过了漫长的实验流程，得到的会是清晰的、符合实验理论的完美结果，或者更多的是其他让自己略感失望的结局。比起其他分子生物学实验，Western Blotting实验似乎更加冗长、更加考验技术，