一. 实验目的1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术,学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度,并能对实验结果进行分析。二. 实验原理1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA用作基因探针,同人体核DNA的酶切片段杂交,获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹,这种图纹极少有两个人完全相同,故称为"DNA指纹",意思是它同人的指纹一样是每个人所特有的。DNA指纹的图像在X光胶片中呈一系列条纹,很像商品上的条形码。DNA指纹图谱,开创了检测DNA多态性(生物的不同个体或不同种群在DNA结构上存在着差异)的多种多样的手段,如RFLP(限制性内切酶酶切片段长度多态性)分析、串联重复序列分析、RAPD(随机扩增多态性DNA)分析等等。各种分析方法均以DNA的多态性为......阅读全文
DNA Fingerprinting (David F. Betsch)the theory, procedures and applications · DNA
DNA fingerprinting of plants has become an invaluable tool in forensic, scientific, and industrial laboratories all over the world. PCR has become
在国家自然科学基金重大研究计划“大气细颗粒物的毒理与健康效应”(批准号:91543104,91743204,91843301)和国家杰出青年科学基金(批准号:21825403)等项目的资助下,中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室刘倩、江桂斌课题组在细颗粒物溯源方面取得重要
Randomly Amplified Polymorphic DNA (RAPD)Randomly Amplified Polymorphic DNA (RAPD) by (DNA KAFFE)RAPD analysis has been successfully u
Polyacrylamide gel electrophoresis is a widely used technique to separate proteins from biological samples. Moreover, the development of two-dimension
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I. EQUIPMENT:DNA sequencing unit (35 x 45 cm) & 2000V power supplyClampsLg. plastic trays (4), about 43 x 50 x 8 cm, and one lidTwo rocking p
Genetic Analyzer Instruments, Accessories & Associated ReagentsNo One Else Offers the Full SequenceApplied Biosystems equips all of its genetic an
一、 前言[1,2] 基因工程已令人难以置信的扩展了我们关于有机体DNA序列的认识。但是仍有许多新识别的基因的功能还不知道,也不知道基因产物是如何相互作用从而产生活的有机体的。功能基因组试图通过大规模实验方法来回答这些问题。但由于仅从DNA序列尚不能回答某基因的表达时间、表达量
在前面的文章(Soil molecular biology),围绕提取土壤样品DNA、RNA相关问题做了简单的引导介绍,比如PCR抑制因子、裂解注意事项等。今天将详细介绍土壤微生物DNA提取的细节,以及如何使用MO BIO PowerSoil® DNA Isolation Kit获得更好的提取效果。
· Histological techniques (William H. Heidcamp)Very detailed guide to histological technique
21世纪的最前沿科学之一,随着人类第一张基因序列草图的完成和发展,生命科学的研究也将进入一个崭新的后基因组学,即蛋白质组学时代。正如基因草图的提前绘制得益于大规模全自动毛细管测序技术一样,后基因组研究也将会借助于现代生物质谱技术等得到迅猛发展。本文拟简述生物质谱技术及其在生命科学领域研究中的应用。1
Laser Capture Microdissection (LCM)Introduction to LCM (BJMU) Preparation, LCM and RNA/DNA extraction of Frozen Tissue Sections&
案例1国际著名医学杂志《柳叶刀》:蛋白指纹图谱(SELDI)以前所未有的精确度来诊断卵巢癌从手指取少量血液,应用目前全球最先进的蛋白指纹图谱SELDI蛋白质芯片,在30分钟之内就可以知道是否患有卵巢癌。国际著名医学杂志《柳叶刀》发表了美国FDA和国立癌症研究所(NCI)的这一研究结果。专家指出,通过
摘要: The cultivated tomato, Lycopersicon esculentum, is the second most consumed vegetable worldwide and a well-studied crop
来自凯斯西储大学和凯斯西储大学医院医学中心的研究人员在《自然》(Nature)杂志上报告称,他们开发了一种磁共振成像(MRI)新方法,可以早期常规筛查某些特异的癌症、多发性硬化症、心脏病及其他疾病。 科学家们说,每个身体组织和疾病都具有一种独特的指纹,可用于快速诊断问题。利用新的MRI技术
试剂、试剂盒尿素去污剂还原剂载体两性电解质仪器、耗材IPG 凝胶实验步骤一、第一向1. 固相 pH 梯度凝胶或凝胶条的准备固相 pH 梯度凝胶的灌注及聚合方法请参阅 固相 pH 梯度等电聚焦 有关章节,如需要可切成 3~5 mm 宽的胶条在 -20℃ 保存一年。为避免繁琐和复杂的灌胶和切胶条程序和保
代谢组学 (metabolomics)的出现是生命科学研究的必然。在20世纪90年代中期发展起来的代谢组学,是对某一生物或细胞中相对分子量小于1,000的小分子代谢产物进行定性和定量分析的一门新学科。代谢组作为系统生物学的重要组成部分,在临床医学领域具有广泛的应用前景。 代谢产物是基因
内容:一、遗传标记 二、DNA分子标记 三、染色体原位杂交 四、DNA分子标记的应用 长期以来,植物育种中选择都是基于植株的表型性状进行的,当性状的遗传基础较为简单或即使较为复杂但表现加性基因遗传效应时,表型选择是有效的。但水稻的许多重要农艺性状为数量性状,如
面对全部有毒液(venom)物种,人们因为对蜘蛛过分恐惧而对其额外心存介蒂。实际上虽然所有的4万多种蜘蛛都有毒腺,但只有少数几种对人体有害,而且从统计学上看,蜘蛛咬人事件极少发生。 毒液本身是由质量不同的分子组成的混合物,毒素(toxin)只是其中一小部分。依据毒素作用方式可将其分为neuroto
Protocols for LCM preparation and analysis I. Preparation, LCM and RNA/DNA extraction of Frozen Tissue SectionsA. EmbeddingB. CuttingC.
(二)PCR/SSO技术 此法乃用人工合成的HLA型别特异的寡核苷酸序列作为探针,与待检细胞经PCR扩增的HLA基因片段杂交,从而确定HLA型别,PCR技术可将HLA复合体上指定基因片段特异性地扩增5~6个数量级;而专门设计的SSO(序列特异的寡核苷酸sequencedpecific
实验步骤1. 蛋白质双向电泳1) 第一向固相pH梯度等电聚焦电泳a. 上样:第一向等电聚焦采用胶内加样的方法进行。精确吸取一定量的蛋白样品(银染样品的蛋白上样量为140 ug计,考染样品为1.3 mg)加入重泡涨液(8 mol/L尿素,2%CHAPS,痕量滨酚蓝,20 mmol/L DTT,0.
2.第二代分子标记2.1 SSR标记技术 在真核生物基因组中存在许多非编码的重复序列,如重复单位长度在15~65个核苷酸的小卫星DNA(Minisatellite DNA),重复单位长度在2~6个核苷酸的微卫星DNA(Microsatellite DN
艾斯米尔岛巨型骆驼的生活复原图 北极并非生命的荒漠,加拿大的研究者最近就在北极发现了已灭绝的巨型骆驼的化石证据。他们利用在艾斯米尔岛上发现的骨骼碎片中的胶原蛋白遗存鉴别出了350万年前的骆驼化石,这是迄今为止发现的最北的骆驼。来自加拿大自然博物馆的古脊椎动物学家Natalia Rybc
Promega利用ProteaseMAX表面活性剂推出了一项创新简化的胶内酶切技术。该项技术给分析人员提供了以下几点好处: 节省时间:整个胶内酶切过程只需一个小时的时间 省去了萃取步骤:蛋白质分解和肽段回收一步完成。 更多的数据:该分解技术保持了原有肽段的信息。
DNA抽提(主要内容如下)· Working with DNA· DNA Extraction from Bacteria and Other Organisms· DNA Extraction f
微阵列技术在单个实验中能同时分析数千个参数。捕获分子微点在固体支持物上固定成行列并暴露在含相应结合分子的样品中。基于荧光、化学发光、质谱、放射性或电化学的读出系统能检测每个微点形成的复合物。这些微小化和平行的结合分析高度灵敏,方法的分析能力又能被微阵列基因表达分析所放大。在这些系统中,检测固定的DN
基质辅助激光解吸电离(也就是通常所说的MALDI)于1987年首次由Hillenkamp 及Karas提出,如今已经30年。从那时起,通过应用这一“软电离”技术与飞行时间质谱(MALDI -TOF MS)的结合,成功地实现了为生物大分子提供快速和高度可靠检测手段的目的,同时也为生命科学领域提供了
高效液相色谱仪(HPLC)是一种以液相为流动相,通过高压输液泵获得较高的流速以提高分离速度的色谱方法,它采用的是一种由非常细颗粒的高效固定相组成的色谱柱进行分离和分析。在高效液相色谱仪中,如果采用十八烷基键合相和极性流动相等非极性固定相,将形成反相色谱分离系统。另一方面,它被称为正相色谱分离系统。用