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植物石蜡切片之溶液配制、实验用品和操作步骤

说到便于观察和保存的组织切片方法,我们的脑海里很容易就闪出四个字来:石蜡切片,不过,你掌握了吗?还是……听说过而已?本文主要对石蜡切片法的主要实验用品、实验步骤、溶液配制这几方面对这一实验方法作介绍。 一、实验目的 1.熟练掌握石蜡切片的方法。 2.掌握永久制片的制作过程,为研究植物 的内部结构奠定基础。 3.学会植物 内部结构的比较研究方法。 二、实验器具与试剂 1.器具 石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。 2.试剂 10%番红水溶液、0.5%固绿(用95%的酒精配制)、酒精(100%、95%、80%、70%、50%)、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。 三、实验材料 幼嫩植物 各部分,根据季节选择材料。 四、实验内容与方法 石蜡切片法是显微技术上最重要、最常用的一种方法。它是把材料......阅读全文

光镜与电镜技术--我的一点实验心得

  一般生物体是不透明的,不能直接在显微镜下观察其内部结构        经过特殊的手段,减少体积和厚度,使光线能透过。        基本原则:保持其原有的组织结构和相互关系。   

石蜡切片制作基本技术

石蜡切片  石蜡切片(paraffin section) 组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡

显微标本制作技术

一、实验原理 显微标本的制作技术是组织学,胚胎学,生理学及细胞学等学科研究观察细胞、组织的生理、病理形态变化的一种主要方法。大多数的生物材料,在自然状态下是不适合显微观察的,也无法看到其内部结构。因为材料较厚,光线不易透过,以致不易看清其结构,另外细胞内的各个结构,由于其折射率相差很小,即

显微标本制作技术

一、实验原理 显微标本的制作技术是组织学,胚胎学,生理学及细胞学等学科研究观察细胞、组织的生理、病理形态变化的一种主要方法。大多数的生物材料,在自然状态下是不适合显微观察的,也无法看到其内部结构。因为材料较厚,光线不易透过,以致不易看清其结构,另外细胞内的各个结构,由于其折射率相差很小,即

植物组织和细胞的显微化学染色实验

实验方法原理 植物体内含有许多种化学物质。在得到植物组织切片之后,可以通过组织化学(显微化学)染色的方法使不同类型的化学成分在显微镜下得以显示,从而了解这些物质在植物的组织细胞内的空间分布用于组织化学研究的切片,根据研究对象和所要检测的化学物质的不同,可采用石蜡切片,有时要求新鲜材料采用徒

植物组织和细胞显微化学染色_显示细胞壁化学组成方法

实验方法原理植物体内含有许多种化学物质。在得到植物组织切片之后,可以通过组织化学(显微化学)染色的方法使不同类型的化学成分在显微镜下得以显示,从而了解这些物质在植物的组织细胞内的空间分布用于组织化学研究的切片,根据研究对象和所要检测的化学物质的不同,可采用石蜡切片,有时要求新鲜材料采用徒手切片或冰冻

组织石蜡包埋和切片技术

包埋剂embedding agent   在制作切片或超薄切片时,由于组织是柔软的,或局部的软硬不均,这样制作厚薄均匀的切片是困难的。所以有必要用一定物质浸透组织内部,整个组织一样硬化,以利于切成薄片,这种物质叫做包埋剂。一股用光学显微镜观察的切片,用石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等作

植物制片的一般原理与方法

第一章 植物制片的方法及准备植物制片技术是植物显微技术课的一个重要组成部分,在有关植物形态建成、植物杂交育种、作物病虫害防治、药用植物的培育和鉴别以及林木材性鉴定等多方面的研究和教学工作中,都需要应用显微制片技术,由于各种作物器官的性质差异以及研究目的的不同,就需要不同的制片方法,但因限于学时及篇幅

石蜡制片法(用于免疫组织化学,HE染色)

 石蜡制片法是将材料经固定、脱水、透明、浸蜡后包埋在石蜡里面进行切片的方法。此法适用范围,制片手段完备,能将材料切成极薄的片子(可切至2-8微米左右),并能制成连续的片子,这是其它制片法难以达到的,因此在光学显微镜的制片技术上它是最常用的一种方法。除了一些经不住石蜡切片法中所应用的各种药剂

透射电镜样品制备要求有哪些

  透射电镜样品制备步骤:  一,取材:组织块小于1立方毫米  二,固定:  2.5%戊二醛,徳酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。  用0.1M磷酸漂洗液漂洗15分三次1%饿酸固定液固定2-3小时  用0.1M磷酸漂洗液漂洗15分三次  三,脱水:  50%乙醇15-20分  70%乙醇15-20分

植物组织石蜡切片的制作

一、实验目的 1.熟练掌握石蜡切片的方法。 2.掌握永久制片的制作过程,为研究植物的内部结构奠定基础。 3.学会植物内部结构的比较研究方法。 二、实验器具与 试剂1.器具 石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻

植物组织化学显微镜标本片制作方法_石蜡切片法

实验方法原理石蜡切片技术是显微技术上最重要最常用的一种方法。其优点在于①应用范围广,几乎适用于所有的植物材料;②能将材料切成厚薄均一的切片,较清楚地显现细胞、组织的细微结构;③能切成连续蜡带,可观察细胞和组织的动态发生及层次变化过程;④切片可以长期保存,便于以后观察比较。缺点是:操作程序比较复杂,需

OsAGAP mRNA原位杂交

实验概要本实验以OsAGAP mRNA为试材介绍了原位杂交技术,包括:原位杂交正义、反义探针制备,原位杂交探针半定量,植物材料的固定与石蜡包埋,切片与粘片,杂交和显色等过程。实验步骤1. OsAGAP原位杂交正义、反义探针制备对OsAGAP cDNA全长在GenBank中做BLAST分析,选取特

植物细胞的有丝分裂

植物细胞在进行生长发育过程中,不断地进行细胞分裂,增加细胞的数目。植物细胞分裂的方式,最普遍、最常见的是有丝分裂。植物的根尖、茎尖分生组织和形成层,主要以有丝分裂方式进行分裂。 要做好这次实验必须考虑到两个问题:第一要掌握好细胞进行有丝分裂的时间,否则很难观察到有丝分裂的全过程,有时甚至看不

细胞凋亡的分子生物学检测方法(1)

[实验原理]细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程,染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ²+和Mg²+依赖的核酸内切酶作用下,在核小体单位之间被随机切断,形成180~200bp核小体DNA多聚体。DNA

细胞凋亡的分子生物学检测方法

细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程,染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ²+和Mg²+依赖的核酸内切酶作用下,在核小体单位之间被随机切断,形成180~200bp核小体DNA多聚体。DNA双链断裂或

TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法

       细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程,染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ² 和Mg² 依赖的核酸内切酶作用下,在

石蜡切片和半薄切片的制作

实验概要本方法介绍了石蜡切片和半薄切片的制作流程。主要试剂4%戊二醛固定液(pH7.0磷酸缓冲液),乙醇,二甲苯,纯石蜡,蜂蜡,树脂胶主要设备真空泵,AO手摇式切片机,Olypmus BH-2型显微镜,LKB超薄切片机实验步骤1. 石蜡切片的制作   1) 取材固定新鲜配置4%戊

临时装片的制作

一 目的: 1.学习并掌握临时装片的制作方法。2.完成基本实验要求的基础上,依自己的兴趣,制作更多的临时装片二 背景知识1. 玻片标本类型:按照制作标本可保存的时间长短,可分为两类。(1)临时玻片标本:是实验中观察标本常采用的方法,保存时间不长久是本法的缺点。如:草履虫形态及应激性、口腔上

临时装片的制作

一 目的:  1.学习并掌握临时装片的制作方法。2.完成基本实验要求的基础上,依自己的兴趣,制作更多的临时装片二 背景知识1. 玻片标本类型:按照制作标本可保存的时间长短,可分为两类。(1)临时玻片标本:是实验中观察标本常采用的方法,保存时间不长久是本法的缺点。如:草履虫形态及应激性、口

临时装片的制作

一 目的:  1.学习并掌握临时装片的制作方法。2.完成基本实验要求的基础上,依自己的兴趣,制作更多的临时装片二 背景知识1. 玻片标本类型:按照制作标本可保存的时间长短,可分为两类。(1)临时玻片标本:是实验中观察标本常采用的方法,保存时间不长久是本法的缺点。如:草履虫形态及应激性、口

免疫酶细胞化学实验技术

免疫酶细胞化学免疫酶细胞化学是免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗体特异反应存在的前提条件下,借助于酶细胞化学的手段,检测某种物质(抗原/抗体)在组织细胞内存在部位的一门新技术:即预先将抗体与酶连结,再使其与组织内特异抗原反应,经细胞化学染色

原位杂交组织化学实验技术4

 二、生物素标记cRNA探针在原位杂交组织化学中的应用  (一)光敏生物素标记cRNA探针的应用  以线性质粒DNA为模板合成未加标记物的cRNA探针,使其最终浓度为0.5~1.0μg/μl(500~1000ng/μl),再与等体积的光敏生物素(1μg/μl)混合。在150瓦卤素灯下,距离光源20c

免疫资料——免疫学常用简称介绍

  1:抗体查询常用名词   Reactivity (物种与抗体反应):Species with which the antibody reacts   Host Species (宿主):Host in which the antibody was generated   Applicati

免疫资料——免疫学常用简称介绍

1:抗体查询常用名词Reactivity (物种与抗体反应):Species with which the antibody reactsHost Species (宿主):Host in which

载玻片的使用方法

 1、涂片法是将材料均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。   涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织、精巢、花药等。   涂片时应注意:(1)载玻片必须清洁。(2)载玻片要持平。(3)涂层须均匀。涂抹液滴在载玻片中间偏右,用解剖刀刃或牙签等涂匀。(4)涂层要薄。用另一载玻

载玻片装片法制作

  载玻片上的一种制片方法,涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织、精巢、花药等。  涂片时应注意:(1)载玻片必须清洁。(2)载玻片要持平。(3)涂层须均匀。涂抹液滴在载玻片中间偏右,用解剖刀刃或牙签等涂匀。(4)涂层要薄。用另一载玻片作推片,沿滴有涂抹液的载

过氧化物酶标记测定细胞凋亡

本实验用过氧化物酶标记测定了细胞凋亡。本方法可以用于福尔马林固定的石蜡包埋的组织切片、冰冻切片和培养的或从组织中分离的细胞凋亡测定。实验原理脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP形成异多

过氧化物酶标记测定细胞凋亡

实验概要本实验用过氧化物酶标记测定了细胞凋亡。本方法可以用于福尔马林固定的石蜡包埋的组织切片、冰冻切片和培养的或从组织中分离的细胞凋亡测定。实验原理脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP

过氧化物酶标记测定法检测细胞凋亡

原理:脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP形成异多聚体,并可与连接了报告酶(过氧化物酶或碱性磷酸酶)的抗地高辛抗体结合。在适合底物存在下,过氧化物酶可产生很强的颜色反应,特异准确的定位