几种常用的微生物染色方法汇总!

一、简单染色 不同的细菌,或者由于观察者所侧重观察的内容不同一,所以所使用的染料也有差异,但是简单染色的方法是一样的。先按照上述的制片方法制片,制成需要观察的玻片后,使用相对应的染料滴加到玻片上菌膜区域,以覆盖菌膜为准。按照不同染料的要求,结合所观察的内容确定染色时间,染色时间到达时,进行水洗,干燥等步骤(见图5-2)。最后得到的玻片加盖盖玻片即可进行镜检。如有需要可以后续再进行油封、蜡封等封片过程。 二、芽孢染色法芽孢杆菌属和梭状芽孢杆菌属的细菌能产生内孢子,这些孢子耐高温、干旱及有毒化学试剂。内孢子还能抵制细菌染色液的进入,在革兰氏染色法涂片染色时,革兰氏阳性菌的芽孢呈现无色。然而,芽孢一旦着色后就很难脱色。 虽然芽孢通常可在革兰氏染色片中看到(芽孢由于不易让染料进入多呈现无色),但在不易清晰观察时,可用特殊的芽孢染色法,使芽孢与菌体呈现不同颜色,更便于观察。其实验的操作方法与革兰氏染色类似。主......阅读全文

微生物检验染色技术

 由于微生物细胞含有大量水分(一般在80-90%以上),对光线的吸收和反射与水溶液的差别不大,与周围背景没有明显的明暗差。所以,除了观察活体微生物细胞的运动性和直接计算菌数外,绝大多数情况下都必须经过染色后,才能在显微镜下进行观察。但是,任何一项技术都不是完美无缺的。染色后的微生物标本是死的,在染色

微生物染色液配制及染色法

1、美蓝染色法1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g 95%乙醇 30mL 0.01%氢氧化钾溶液100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合.1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷.滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检.1.3 结果菌体呈蓝色. 2、革兰氏染色法2.1 结晶紫染色液

微生物染色液配制及染色法

 1、美蓝染色法1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g 95%乙醇 30mL 0.01%氢氧化钾溶液100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合.1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷.滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检.1.3 结果菌体呈蓝色. 2、革兰氏染色法2.1 结晶紫染色

微生物染色液配制及染色法

2.1 美蓝染色法2.1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝           0.3g95%乙醇          30mL0.01%氢氧化钾溶液    100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。2.1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷。滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检。2.1.

微生物常用染色法及染色程序

微生物染色的基本原理,是借助物理因素和化学因素的作用而进行的。物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生地各种化学反应。酸性物质对于碱性染料较易吸附,且吸附作用稳固;同样,碱性物质对酸性染料较易于吸附。如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化

微生物检验染色液的配制及染色方法

1 美蓝染色法1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g95%乙醇 30mL0.01%氢氧化钾溶液 100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷。滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检。2.1.3 结果菌体呈蓝色。 检验地带网2 革兰氏染色法2.1

病原微生物染色实验

实验方法原理 真菌是常见的致病菌,其成分含有较多的黏多糖和蛋白质,通过氧化剂,能够促使菌壁的多糖暴露出醛基,然后再与 Schiff 试剂进行结合,生成新的复红复合物而显示真菌的存在,常用高碘酸-复红染色法。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水高碘酸Schiff 试剂仪器、

微生物的染色技术(实验)

一、细菌的简单染色法1 目的1.1 学习微生物涂片、染色的基本技术。1.2 掌握细菌的简单染色法。1.3 初步认识细菌的形态特征,巩固学习油镜的使用方法和无菌操作技术。2 原理细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。细菌的细胞小而透明,在普通的光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色。利用单

病原微生物染色实验_真菌

病原微生物的种类繁多,包括属于真核微生物的真菌、厉于原核微生物的细菌(抗酸杆菌)、来自病毒的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)等。这些物质的化学成分中,含有不同的黏多糖、酸性蛋白和脂蛋白成分。染色后,通过氧化剂或直接加热条件下,可使染色剂与物质结合而形成牢固的复合物。实验方法原理真菌是常见的致病菌,其成

病原微生物染色实验——细菌

实验方法原理细菌体积较小,可在显微镜油镜下进行观察。细菌中的酸性蛋白质,通过革兰(Gram)碱性染料进行结合,遇革兰碘以后形成复合物,再经过分化剂,则显示革兰阳性菌(+)和革兰阴性菌(-)。常用 Gram 碱性复红-结晶紫革兰法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水碱性复红石

微生物检测常见细菌染色方法

细菌涂片及细菌染色是微生物学的基本技术,也是观察细菌最简单且行之有效的方法,是微生物检测人员常用技能之一。通常情况下,由于细菌个体较小,较透明或半透明,如未经染色往往不以观察识别。因此借助于染色法可以使细菌着色,与视野背景形成鲜明对比,从而易于在显微镜下进行观察。微生物检测常见的细菌染色方法包括简单

微生物的染色与形态结构观察实验——革兰氏染色法

实验方法原理革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰氏染色法(Gramstain)不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表示;染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌,用G-表示。细菌对于

微生物的染色与形态结构观察实验——荚膜染色法

实验方法原理荚膜是包围在细菌细胞外面的一层粘液性物质,其主要成分是多糖类,不易被染色,故常用衬托染色法,即将菌体和背景着色,而把不着色且透明的荚膜衬托出来。荚膜很薄,易变形,因此,制片时一般不用热固定。实验材料圆褐固氮菌试剂、试剂盒荚膜染色液纯甲实验步骤1.  在载玻片一端滴一滴无菌水,取少许培养了

微生物的染色与形态结构观察实验——鞭毛染色法

实验方法原理鞭毛是细菌的运动“器官”,一般细菌的鞭毛都非常纤细,其直径为0.01~0.02 μm,在普通光学显微镜的分辨力限度以外,故需要用特殊的鞭毛染色法,才能看到。鞭毛染色是借媒染剂和染色剂的沉淀作用,使染料堆积在鞭毛上,以加粗鞭毛的直径,同时使鞭毛着色,在普通光学显微镜下能够看到。实验材料苏云

病原微生物染色实验——抗酸杆菌

实验方法原理结核杆菌和麻风杆菌通常称为抗酸杆菌,由于菌体内含有脂质蛋白质和多糖类物质,并由糖脂形成一个蜡质的外壳,当染色剂结合形成复合物后,用含酸分化剂处理也不易脱色,具有抵抗酸的作用,所以被称为抗酸杆菌。常用 Ziehl-Neelsen 抗酸杆菌染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙

几种常用的微生物染色方法汇总!

一、简单染色 不同的细菌,或者由于观察者所侧重观察的内容不同一,所以所使用的染料也有差异,但是简单染色的方法是一样的。先按照上述的制片方法制片,制成需要观察的玻片后,使用相对应的染料滴加到玻片上菌膜区域,以覆盖菌膜为准。按照不同染料的要求,结合所观察的内容确定染色时间,染色时间到达时,进行水洗,干燥

微生物拟核体内体外染色观察实验_溴化乙锭染色法

实验方法原理如果将微生物细胞裂解,使其拟核(即染色体 DNA)被抽提出来,通过溴化乙淀(ethidium bromide,简称 EB)染色并进行琼脂糖凝胶电泳,便可观察到释放到细胞外的染色体 DNA。EB 是一种扁平分子染料。可特异性插入 DNA 碱基对之间,在紫外线照射下,使 DNA 呈现荧光,因

微生物的染色与形态结构观察实验——细菌芽孢染色法

实验方法原理芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲合力不同的原理,用不同染料进行着色,使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。芽孢壁厚、透性低,着色、脱色均较困难,因此,当先用一弱碱性染料,如孔雀绿(malachitegreen)或碱性品红(basicfuchsin)在加热条件下进行染色时,此染料不

微生物的染色与形态结构观察实验

实验方法原理 在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,所以常用碱性染料进行染色。碱性染料并不是碱,和其他染料一样是一种盐,电离时染料离子带正电,易与带负电荷的细菌结合而使细菌着色。实验材料 金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒 生理盐水吕氏碱性美蓝染色液石炭酸复红染色液仪器、耗材 显微镜载玻片接种环

微生物学检验染色标本检查

细菌标本经染色后,由于细菌与周围环境间在颜色上形成鲜明对比,故在普通光学显微镜下可清楚地观察到细菌的形态特征(如细菌的大小、形状、排列等)和某些特殊结构(如荚膜、鞭毛、芽孢等),并可根据染色反应性对细菌加以分类鉴定。(一)细菌染色的一般程序  细菌染色的一般程序是:涂片(干燥)—固定—染色(媒染)—

微生物学检验染色标本检查

细菌标本经染色后,由于细菌与周围环境间在颜色上形成鲜明对比,故在普通光学显微镜下可清楚地观察到细菌的形态特征(如细菌的大小、形状、排列等)和某些特殊结构(如荚膜、鞭毛、芽孢等),并可根据染色反应性对细菌加以分类鉴定。    (一)细菌染色的一般程序  细菌染色的一般程序是:涂片(干燥)—固定—染色(

微生物的染色与形态结构观察实验——细菌的单染色法

实验方法原理在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,所以常用碱性染料进行染色。碱性染料并不是碱,和其他染料一样是一种盐,电离时染料离子带正电,易与带负电荷的细菌结合而使细菌着色。实验材料金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒生理盐水吕氏碱性美蓝染色液石炭酸复红染色液仪器、耗材显微镜载玻片接种环双层瓶擦

微生物拟核体内体外染色观察实验

实验方法原理 富尔根氏(Feulgen)染色法是根据席夫氏(Schiff)试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸,碱性复红与亚硫酸结合后,失去醌式结构而变为无色。当 DNA 经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后,使醌式结构恢复,合成一种带紫红色的碱性复红衍生

微生物的染色技术及显微镜观察

一、细菌  的简单染色法 1 目的 1.1 学习微生物涂片、染色的基本技术。 1.2 掌握细菌的简单染色法。 1.3 初步认识细菌的形态特征,巩固学习油镜的使用方法和无菌操作技术。 2 原理 细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。细菌的细胞小而透明,在普通的光学显微镜下不易识别,必须对它们

微生物拟核体内体外染色观察实验_富尔根氏染色法

实验方法原理富尔根氏(Feulgen)染色法是根据席夫氏(Schiff)试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸,碱性复红与亚硫酸结合后,失去醌式结构而变为无色。当 DNA 经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后,使醌式结构恢复,合成一种带紫红色的碱性复红衍生物。此

微生物学技术:细菌抗酸染色法

1、原理与应用结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。2、材料(1)结核病人痰(2)抗酸染色液(3)玻片、片夹、滤纸片、竹签、空平皿、污物盆。3、方法(1)取洁净的

微生物的染色技术及显微镜观察(一)

一、细菌的简单染色法   1 目的   1.1 学习微生物涂片、染色的基本技术。   1.2 掌握细菌的简单染色法。   1.3 初步认识细菌的形态特征,巩固学习油镜的使用方法和无菌操作技术。   2 原理   细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。细菌的细胞小而透明,在普通的光学

微生物检测中革兰氏染色相关知识点

革兰氏染色的原理细菌细胞通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而

微生物的染色技术及显微镜观察(二)

二、革兰氏染色法   1  目的   1.1 了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。  1.2 学习掌握革兰氏染色技术,巩固学习光学显微镜油镜的使用方法。2  原理   革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家Christain   Gram氏创立的,革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰

病原微生物染色实验——乙型肝炎表面抗原

实验方法原理乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是由多肽组成的脂蛋白,由于抗原内含有丰富的二硫键成分,经过氧化剂而转变为磺酸,然后再与染色液产生较强的亲和力进行着色。通过地衣红(Orcein)染色法,能够较好地显示乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水