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mRNA显示蛋白的筛选与扩增实验

实验方法原理 实验材料 纯化的 mRNA 显示蛋白试剂、试剂盒 NaOHHClNaClMgCl2 乙醇1-丁醇苯酚 氯仿 异戊醇EDTAPCR 缓冲液ATP 琼脂糖ATP-适配体筛选结合缓冲液ATP-适配体筛选洗脱缓冲液鲑精 DNABSA3'引物5'引物Taq DNA 聚合酶仪器、耗材 凝胶过滤柱实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 用 1 ml 去离子水洗涤 10 mg ATP-琼脂糖三次，然后用 1 ml ATP-适配体筛选结合缓冲液洗涤两次。2. 取 1 ml 所得的纯化的 mRNA 显示蛋白与洗过的 ATP-琼脂糖于 4°C 下 旋转混合孵育 1 h。然后滴干，准备过柱。3. 于 4°C 用 1000 ml ATP-适配体筛选结合缓冲液洗涤 6 次，每次洗涤 10 min。4. 用 250 ul ATP-适配体筛选洗脱液于 4°C 下洗脱 6 次，每次洗脱 10 min。5. ......阅读全文