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电镜专用戊二醛固定液(2.5%)使用说明书

戊二醛固定液(2.5%,电镜专用) 【产品组成】Component SBJ-0639S SBJ-0639M Store at戊二醛固定液(2.5%,电镜专用) 100ml 500ml 4℃,避光【保存条件】4℃,避光【产品概述】固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。固定剂对细胞核细胞外成分发生物理改变。固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。戊二醛固定液会引起蛋白质α-螺旋结构变形,不利于过氧化物酶染色。戊二醛固定液固定速度快,渗透力差。戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)由戊二醛、磷酸盐、去离子水等组成,pH7.2~7.4......阅读全文

透射电镜超薄切片和染色实验

实验方法原理 实验步骤 1. 取材 对一般的动物组织取材的要求如下:(1) 标本材料要新鲜,取材速度要快:由于生物组织离体后,细胞将会立即释放出各种水解酶而引起细胞自溶,使其微细结构发生改变而产生假象,故要尽量保持材料的新鲜,经解剖、手术或活检取材后迅速投入固定液内,以尽量保持细

免疫细胞化学常用试剂介绍

一、固定剂  大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽

免疫细胞化学常用试剂介绍

一、固定剂  大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽

透射电镜超薄切片和染色实验

实验步骤1. 取材 对一般的动物组织取材的要求如下:(1) 标本材料要新鲜,取材速度要快:由于生物组织离体后,细胞将会立即释放出各种水解酶而引起细胞自溶,使其微细结构发生改变而产生假象,故要尽量保持材料的新鲜,经解剖、手术或活检取材后迅速投入固定液内,以尽量保持细胞在活体状态的结构。(2) 取材小,

免疫细胞化学常用试剂

一、固定剂大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽类)

透射电镜超薄切片和染色实验

实验步骤1. 取材 对一般的动物组织取材的要求如下:(1) 标本材料要新鲜,取材速度要快:由于生物组织离体后,细胞将会立即释放出各种水解酶而引起细胞自溶,使其微细结构发生改变而产生假象,故要尽量保持材料的新鲜,经解剖、手术或活检取材后迅速投入固定液内,以尽量保持细胞在活体状态的结构。(2) 取材小,

免疫电镜标本固定实验

实验方法原理 实验步骤 1. 血管灌注固定固定效果最好,能使超微结构得到很好的保存。灌注装置由加压气球、压力表、三通接头和连接管道组成。不同的组织器官必须选择合适的灌注压力,详见有关书籍。灌注固定一般维持 10~15 min。然后用相同的固定液继续浸泡固定 2~4 h。2. 浸泡固定组织块切小后立即

免疫电镜标本固定实验

实验步骤1. 血管灌注固定固定效果最好,能使超微结构得到很好的保存。灌注装置由加压气球、压力表、三通接头和连接管道组成。不同的组织器官必须选择合适的灌注压力,详见有关书籍。灌注固定一般维持 10~15 min。然后用相同的固定液继续浸泡固定 2~4 h。2. 浸泡固定组织块切小后立即投入到固定液中,

免疫电镜技术关键的几个问题

  免疫电镜技术关键的几个问题   免疫电镜集电子显微技术与免疫细胞化学技术于一体,能显示抗原或抗体在细胞超微结构水平的位置,已成为当今生物医学领域的一项重要研究手段。由于免疫电镜制作过程长,操作程序烦锁,因此,要得到满意的免疫金染色切片,必须在关键环节上给予注意,以下我们就免疫电镜染色技术中的几

电镜用戊二醛固定液配制使用

电镜用 戊二醛固定液(2.5%, 电镜专用)戊二醛固定液(2.5%, 电镜专用)别名:Glutaric dialdehyde solution;Pentane-1,5-dial分子式:C5H8O2分子量:100.12CAS#:111-30-8外观:几乎无色液体特性:类型:Grade IIR:22-2

透射电镜的基本结构和原理

电子显微镜(electron microscopy,EM) 简称电镜,经过五十多年的发展已成为生物学、医学、化学、农林和材料科学等领域进行科学研究的重要工具,是人类认识自然,特别是研究机体微细结构的重要手段,电镜技术已成为上述各领域研究工作者应掌握的一项基本技能。电镜的创制者鲁斯卡(E.Ruska)

电镜与样品制备技术

电镜样品取材方法 1 动物及人体组织的取材 动物组织的取材,应在麻醉(1%戊巴比妥钠按5ml/kg体重腹腔注射)或断头急性处死,解剖出所需器官,用解剖剪刀剪取一小块组织,放在干净的纸板上,滴一滴冷却的固定液,用新的、无油污锋利的(双面)刀片将材料切成大约1㎜宽,2~3㎜长的小块,从中挑选损伤小的小条

免疫电镜技术关键的几个问题

免疫电镜技术关键的几个问题免疫电镜集电子显微技术与免疫细胞化学技术于一体,能显示抗原或抗体在细胞超微结构水平的位置,已成为当今生物医学领域的一项重要研究手段。由于免疫电镜制作过程长,操作程序烦锁,因此,要得到满意的免疫金染色切片,必须在关键环节上给予注意,以下我们就免疫电镜染色技术中的几个问题进行探

超薄切片技术简介

由于电镜产生的电子束穿透能力很弱,必须把标本切成厚度小于0.1um以下的薄片才适用,这种薄片称为超薄切片。常用的超薄切片厚度是50-70nm。在透射电镜的样品制备方法中,超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术。超薄切片的制作过程基本上和石蜡切片相似,需要经过取材、固定、脱水、浸透、包埋聚合、切片及染

扫描电镜和透射电镜之间的对比

  电子显微镜  电子显微镜是根据电子光学原理,用电子束和电子透镜代替光束和光学透镜,使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像的仪器。  电子显微镜的分辨能力以它所能分辨的相邻两点的最小间距来表示。20世纪70年代,透射式电子显微镜的分辨率约为0.3纳米(人眼的分辨本领约为0.1毫米)。现在电子显微

酶免疫电镜技术原理、材料和操作方法

(一)原理酶免疫电镜技术是利用酶的高效率的催化作用对其底物的反应形成不同的电子密度,借助于电子显微镜观察,证明酶的存在,从而对抗原进行定位。(二)材料与试剂1.PBS液取NaCl 8.5g,Na2HPO40.85g,KH2PO40.54g,加水至1 000ml即可。2.DAB溶液取5mgDAB(3、

电镜组织样品固定液的选择及其配制

  自1931世界上第一台电子显微镜诞生以来,微观世界的大门开放的更加广阔。目前电镜被广泛运用于各器官系统疾病的病理诊断中,除了运用在肿瘤的诊断与鉴别诊断中,用得最多的是肾脏活检和某些皮肤疾病的诊断,其中透射电子显微镜是最早,最广泛应用于医学领域的一种电镜。随着电镜在医学上的应用,人类通过观察细胞膜

酶免疫电镜技术

(一)  原理 酶免疫电镜技术是利用酶的高效率的催化作用对其底物的反应形成不同的电子密度,借助于电子显微镜观察,证明酶的存在,从而对抗原进行定位。(二)材料与试剂1.PBS液  取NaCl 8.5g,Na2HPO40.85g,KH2PO40.54g,加水至1

一文了解电镜固定液选择及配制

  自1931世界上第一台电子显微镜诞生以来,微观世界的大门开放的更加广阔。目前电镜被广泛运用于各器官系统疾病的病理诊断中,除了运用在肿瘤的诊断与鉴别诊断中,用得最多的是肾脏活检和某些皮肤疾病的诊断,其中透射电子显微镜是最早,最广泛应用于医学领域的一种电镜。随着电镜在医学上的应用,人类通过观察细胞膜

电子显微镜免疫细胞化学技术-1

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗体

电子显微镜免疫细胞化学技术-1

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗体

电子显微镜免疫细胞化学技术概述

第七章 电子显微镜免疫细胞化学技术第一节 电子显微镜免疫细胞化学技术概述免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细

非标记抗体免疫电镜实验——经典法

不标记抗体法通过系统的非标记抗体的免疫学反应,对组织中的抗原进行定位检测。分为用标记物显示和不同标记物显示两种方法。用于(1)抗体观察(2)免疫学研究。实验方法原理标记抗体法虽然具有许多优点,但也存在一些难以克服的问题,如标记抗体的分子增大,对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有

电镜固定(电镜,戊二醛,灌流,多聚甲醛)

问:做电镜灌流,用2%多聚甲醛+2%戊二醛灌流固定,结果配成1%多聚甲醛+1%戊二醛了,这两个浓度对电镜的固定有影响吗?我怕固定得不好,修完组织块儿后放在2.5%的戊二醛里固定5小时,这样可以吗?答:没问题的,我们不灌流,取完了放2.5%的戊二醛也没问题。这个要看你做那部分组织,如果是脑组织,那么灌

免疫细胞电镜技术

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原 抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发

透射电镜小鼠气管和眼睛的取材和包埋

实验概要本实验要看小鼠气管内的cilia和眼睛中的primary cilia的”9 2”结构,故做透射电镜。主要试剂glutaraldehyde(EMS进口,电镜专用)PFAPBS or PB buffer1-4% osmium tetroxide in buffer0.5% uranyl acet

透射电镜小鼠气管和眼睛的取材和包埋

实验概要本实验要看小鼠气管内的cilia和眼睛中的primary cilia的”9 2”结构,故做透射电镜。  主要试剂  glutaraldehyde(EMS进口,电镜专用) PFA PBS or PB buffer 1-4% osmium tetroxide in buffe

免疫酶细胞化学实验技术

免疫酶细胞化学免疫酶细胞化学是免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗体特异反应存在的前提条件下,借助于酶细胞化学的手段,检测某种物质(抗原/抗体)在组织细胞内存在部位的一门新技术:即预先将抗体与酶连结,再使其与组织内特异抗原反应,经细胞化学染色

透射电镜样品制备要求有哪些

  透射电镜样品制备步骤:  一,取材:组织块小于1立方毫米  二,固定:  2.5%戊二醛,徳酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。  用0.1M磷酸漂洗液漂洗15分三次1%饿酸固定液固定2-3小时  用0.1M磷酸漂洗液漂洗15分三次  三,脱水:  50%乙醇15-20分  70%乙醇15-20分

植物组织化学显微镜标本片制作方法_超薄切片技术

实验材料植物组织试剂、试剂盒包埋剂仪器、耗材切片机实验步骤1 取材:用于固定的材料要求切割成 1mm3而大小的小块。太大固定液不易透入,造成材料内外固定不均;太小则材料受损伤的比率增高。取材时应注意:由于取材时要求切的组织块很小,组织受损伤的比例相当大,这无疑会引起细胞代谢的巨大变化,因此,切取后的