Antpedia LOGO WIKI资讯

血清灭活的正确方式

血清热灭活非必要 血清热灭活的步骤在1970年代就已建立,至今成为很多实验室的常规血清前处理步骤;但许多先前认为必须热灭活的原因,却早已经不再成立:去除支原体污染? 早期血清加工使用的450nm滤膜,早已被100nm滤膜取代;且随着加工技术的创新及严格的监控,血清产品早已没有支原体污染的疑虑。 去除补体等对热敏感的物质? 胎牛血清中含有的补体仅为成年牛血清5-50%,而C3 (补体中引起免疫反应的主成分)在胎牛血清中则几乎不能检出,直接使用血清对大多数的细胞株没有负面影响。血清热灭活 对细胞生长无明显帮助细胞生物学家比较了正常热灭活胎牛血清对各种细胞株的生长能力影响,发现11株细胞中,热灭活对6 株细胞有负面影响(红)、3株无影响(绿)、2株有微弱正面改善(黄)(下图1)。▲图1:使用未灭活或灭活血清的细胞生长状况。所以,在正常操作下,热灭活通常对“细胞生长”没有明显的促进作用,反而会破坏血清内......阅读全文

血清灭活问题

1、问:加到培养基中的血清必须灭活吗? 答:不是必须的,看做什么实验了,我在使用Gibco南美血清10270106的时候,都不灭活。 2、问:Gibco胎牛血清新西兰(Gibco新西兰血清10091148)灭活是56℃ 30分钟吗? 答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,例如经常

细胞培养大攻略

一、细胞培养基础和步骤细胞培养基大全细胞原代培养步骤细胞传代培养步骤二、细胞培养常见问答1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?答:不是必须的,看做什么实验了。2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子

细胞培养常见问答

细胞培养常见问答 1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?   答:不是必须的,看做什么实验了。   2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?   答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子 。但是如果用于培养一些表面具

血清热灭活的问题

血清的热灭活是很多培养者感兴趣的话题,价格不菲的血清中含有诸如生长因子,维生素,氨基酸等珍贵物质,而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟是完全没有必要的。尽管如此,在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行,多数实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子,氨基酸等成分带来的负面影响,在我们的技

病原菌的分离鉴定及其疫苗的制备(3)

(二)疫苗制备1 .病原菌的扩大培养与分离液体培养:按配方配制 2216E 液体培养基,将培养基用 三角烧瓶分装并盖上棉塞后置 于高压蒸汽锅内, 121 ℃ 灭菌 15 ~ 30min ,冷却后于超净工作台内加入 1ml 左右预先制备的病原菌菌液,盖上棉塞,用摇床于 28~ 30 ℃ 下震荡(约

Gibco牛血清灭活时温度问题

1、问:因为实验室水浴锅失控,血清灭活时,温度到了61.7℃,这血清还能用吗? 答:多长时间啊?短时间应该可以吧,我有一次加热了一个多小时,还照样用。 2、问:我灭活Gibco胎牛血清时,用的电磁炉,定在了70℃,本来说调温度到56℃再放血清的,后来忘了,就把血清放进去了,所以灭活的温度肯定超过56

你还在为血清需不需要灭活的问题而疑惑吗?

  在技术的热线中*常被提到的一个问题就是“需不需要对血清进行热灭活”的问题。人们通常通过在56°C加热30分钟的办法,来灭活血清中的补体,以及其中可能的微生物(比如支原体)的污染。加热灭活带来的问题是,血清中的氨基酸、维生素和生长因子等也会不同程度的被破坏。  Triglia and L

天然细胞培养基(血清和水解乳蛋白)-2

我国在对牛血清的质量2000年版《中国生物制品主要原辅料质控标准》中提出比较严格的标准要求。包括蛋白质含量,细菌、真菌、支原体、牛病毒、大肠杆菌噬菌体、细菌内毒素,支持细胞增殖检查。 血清质量的鉴定一般包括以下几个方面: ●理化性质:如渗透压、pH值、蛋白电泳图谱、蛋白含量、激素水平、内毒素

FBS基础问答

血清是一种纯天然培养基,含有细胞生长繁殖所需的多种营养成分,如蛋白质、多肽等,多用于细胞培养、生物制品及诊断试剂的生产。血清的主要成分是蛋白质,如:白蛋白,球蛋白,纤维粘连素(促进细胞附着)、α2巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用),激素,胰岛素(可促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,促细胞分裂),类胰岛素生长因

如何避免Gibco胎牛血清沉淀物的产生?

我们建议您在使用Gibco牛血清,例如Gibco南美胎牛血清的时候,注意下列的操作 : (1)解冻Gibco胎牛血清南美时,请按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。 (2)解冻Gibco胎牛血清时,请随时将之摇晃

细胞培养技术-2

◇湿热消毒的注意事项①不可用安全阀摘子排气。②消毒的过程中若出现漏气现象,可调节消毒器盖内的胶垫的位置。③灭菌完毕,不要急于取出消毒品,可利用消毒器的余热去除物品部分湿气,待半小时左右再移入干燥箱烘干。2.干热消毒  这种消毒方法主要用于玻璃器皿消毒,一般温度在160℃维持90—120分钟就可以杀死

细胞培养基的几个问题

L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗?它在溶液中不稳定吗?L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解,但是确切的降解率一直没有最终定论。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成,而氨对于一些细胞具有毒性。&

特殊加工工艺血清的种类与使用注意事项

正因为血清来源于动物,含有细胞培养中所需的各种营养(血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等),所以奠定了血清是细胞培养实验中最普遍试剂的基础。血清通常用作细胞生长的添加物,拥有多种功能和用途,如:富含大分子蛋白,低分子量的营养素,作为氨基酸、碳水化合物、维生素的额外来源;提高介质

掌握了这些细节,师姐再也不用担心我养不好细胞啦~

很多小伙伴在养细胞的时候,总是会出现这样或那样的问题,很多时候,那是因为你没有注意以下的细节问题,现在我们一起来看看:细胞培养前的准备在您带上手套开始细胞培养之前, 先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足, 以免在开始实验后再次出入操作台,这样可以降低细胞污染的风险。细胞培养基也应先预热, 选择只预热

细胞培养试剂、冷冻和复苏(一)

细胞培养基市场上可提供干粉培养基和液体培养基:       干粉培养基需使用者自己配制并灭菌,其优点是价格便宜。缺点是配制过程繁琐,质量不易控制;       液体培养基是由专业厂

血清[serum]质量决定因素和使用建议

一、关于血清使用的几点建议: 1、血清必须贮存-20℃,如存放于4℃,请勿超过两周,对于某些单位一次无法用完一瓶,可在无菌条件下将其40-45ml分装于无菌50ml离心管中(或血清瓶中),由于血清解冻时体积会增加10%,必须预留此膨胀体积的空间,否则易发生污染或容器冻裂的情形。 2、一

防止大牛血清沉积物的好办法

  大牛血清血清质量凹凸取决于两方面因素:一是选材目标,二是选材过程。用于选材的动物应健康无病而且在指定的出世天数之内,选材过程应严厉依照操作规程履行,制备出的血清要通过严厉的质量鉴定。   大牛血清使用中的注意事项:   1、血清冻结zui好采用逐渐冻结法(-20℃→2—8℃→

常用细胞凋亡检测方法(图)-3

过氧化物酶标记测定法原理:脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP形成异多聚体,并可与连接了报告酶(过氧化物酶或碱性磷酸酶)的抗地高辛抗体结合。在适合底物存在下,过氧化物酶可产生很强的颜色

大牛血清使用中的五项注意事项

大牛血清血清质量凹凸取决于两方面因素:一是选材目标,二是选材过程。用于选材的动物应健康无病而且在指定的出世天数之内,选材过程应严厉依照操作规程履行,制备出的血清要通过严厉的质量鉴定。 大牛血清使用中的注意事项: 1、血清冻结zui好采用逐渐冻结法(-20℃→2—8℃→25℃或37

Moregate Biotech胎牛血清及牛血清白蛋白

  Moregate Biotech   品牌价值   Moregate Biotech成立于1975年,是世界上最主要的澳大利亚和新西兰动物血清和蛋白的供应商之一。   在世界范围内,已经为大量制药企业与研究机构提供产品与原料。几十年来,由于其优质的产品和服务,Moregate 赢得了良好的

Moregate Biotech胎牛血清及牛血清白蛋白

  品牌价值   Moregate Biotech成立于1975年,是世界上最主要的澳大利亚和新西兰动物血清和蛋白的供应商之一。   在世界范围内,已经为大量制药企业与研究机构提供产品与原料。几十年来,由于其优质的产品和服务,Moregate 赢得了良好的声誉和客户满意度。   产地限定  

血清使用常见问题

血清使用常见问题1、血清保存的最好方法?建议血清最好保存在-15℃以下。若一次使用不完一瓶,建议无菌分装于适当的灭菌容器内冷冻备用。2、如何解冻血清,才能保证其质量不会受损?我们建议将血清从冷冻箱取出后,置于2℃~8℃冰箱中解冻,然后在室温下全融,解冻过程中必须规则地摇晃均匀。3、为什么血清在解冻后

Moregate Biotech胎牛血清及牛血清白蛋白使用与解答

牛血清白蛋白牛血清白蛋白(Bovine Serum,BSA)有着极其广泛的工业和实验室应用,包括:Elisa、免疫印迹(ImmunoBlot)和免疫组化(immunohistochemistry)。在限制性内切酶消化反应中,BSA常常被用作一些酶的反应稳定剂,并且能防止蛋白酶沾附到管壁和枪头上。

流感病毒与流感疫苗

1. 流感病毒的形态及实验室分离纯化:l#61472;引起人类流感的病毒是冠状病毒。冠状病毒只感染脊椎动物。l#61472;感染流感病毒后会引起人与动物的呼吸道、消化道与神经系统病患。l#61472;流感病毒的代表型在上世纪 60年代被查明, 60年代后对各种流感病毒的完整形态已进行了深入研究。冠状

流感病毒与流感疫苗

1. 流感病毒的形态及实验室分离纯化: 引起人类流感的病毒是冠状病毒。冠状病毒只感染脊椎动物。 感染流感病毒后会引起人与动物的呼吸道、消化道与神经系统病患。 流感病毒的代表型在上世纪 60年代被查明, 60年代后对各种流感病毒的完整形态已进行了深入研究。冠状病毒的基因图谱序列(包括各种蛋白酶和病毒内

细胞培养攻略:细节决定成败

  培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。最好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。  那培养细胞都要注意哪些小细节呢?就让我们一起来看看吧!  1.细胞生长的

细胞培养大攻略7

62、贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基,在放置几天后颜色变紫? 这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时,碳酸氢纳导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口,在CO2培养箱孵育培养基10-15分钟,来校正溶液的pH值(确定松开瓶口以保证气体交换)。 63、 细胞培养基偶然被冻,可否继

流感疫苗表面抗原的高密度繁殖培养

流感疫苗的生产: I. 什么是流感疫苗:流感疫苗是无菌的灭活病毒悬液,由 A(甲)型或 B(乙)型流感病毒的一株或多株或二型混合液组成,病毒在鸡胚中分别单独培养。流感疫苗分为三种:用适当方法灭活的全病毒悬液;用物理化学方法部分或完全裂介处理病毒颗粒的无菌悬液(裂介疫苗)经处理后主要由血凝素和神经氨基

众多新冠疫苗在研 谁将是疫情解药?

  人类与病毒抗争已经有数千年的历史,早在古希腊的记载中,我们就可以看到疫情席卷一个又一个城市,然而当时的医生却束手无策。  疫苗的出现使人类第一次从预防的角度战胜了病毒。WHO宣布天花被消灭的那天,全人类都为这个消息感到兴奋。随着不断推出的疫苗产品,那些曾让人们闻风丧胆的传染病,最终停留在了历史书

动物细胞/组织培养常见的一些问题

由于影响因素过多,细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决,因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。 1.培养试剂的保存:血清:-5oC - -20oC 保存,避免反复冻融。培养基:  2oC – 8oC避光保存。