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绿色荧光蛋白融合技术在激素类兴奋剂检测中的应用

实验方法原理重组人生长激素(rhGH)与胰岛素生长因子-1(ICF-Ⅰ)是目前运动员滥用严而又难以检测的内源性激素类兴奋剂。以IGF-Ⅰ作为目标分析物,利用分子生物学方法构建绿色荧光蛋白(GFP)与IGF-Ⅰ的融合蛋白GFP-IGF。GFP是目前应用广泛的一种生物报告分子,具有稳定、无毒害、无需底物和辅助因子即可自发荧光等特性,是一种极具潜力的标记物。实验材料蛋白质试剂、试剂盒绿色荧光蛋白融合蛋白仪器、耗材PCR仪电泳槽荧光显微镜实验步骤1. 通过基因重组,构建表达融合蛋白GFP-IGF的大肠杆菌重组菌。2. 纯化融合蛋白,经SDS-PAGE分析为单一条带,分子量36KD。3. Western印迹与ELISA,验证融合蛋白能特异性地与IGF-1抗体反应,具有IGF-1的抗原性。4. 表面等离子体共振(SPR)分析,得到GFP-IGF与IGF-1单抗的KD=2.6X10-8M,符合免疫的要求。5. CD光谱、荧光光谱、荧光寿命分析......阅读全文

绿色荧光蛋白融合技术在激素类兴奋剂检测中的应用

实验方法原理 重组人生长激素(rhGH)与胰岛素生长因子-1(ICF-Ⅰ)是目前运动员滥用严而又难以检测的内源性激素类兴奋剂。以IGF-Ⅰ作为目标分析物,利用分子生物学方法构建绿色荧光蛋白(GFP)与IGF-Ⅰ的融合蛋白GFP-IGF。GFP是目前应用广泛的一种生物报告分子,具有稳定、无毒

绿色荧光蛋白融合技术在激素类兴奋剂检测中的应用

重组人生长激素与胰岛素样生长因子-1是目前运动员滥用严重而又难以检测的内源性激素类兴奋剂。 人生长激素是由垂体前叶分泌、含有191个氨基酸的肽类激素,具有广泛的生理作用,是强有力的合成代谢促进剂。IGF-I主要由肝脏合成且高度依赖hGH,介导hGH的多数生长和代谢功能。rhGH与IGF-I的促进

绿色荧光蛋白在信号转导中的应用

  新近研究发现,某些突变的 GFP 能够发生荧光共振能量转移 (fluorescence resonance energy transfer,FRET)。FRET 是一种从荧光分子的激发状态到临近基态接受分子之间量子力学能量转移的现象。FRET 发生的前提条件是,荧光接受分子必须在荧光提供分子释

绿色荧光蛋白融合抗体研究

  融合抗体  近二十年来,抗体生成技术有了飞速发展,已经从细胞工程抗体(杂交瘤技术一单克隆抗体)发展到了第三代抗体:基因工程抗体,尤其是噬菌体抗体库技术的出现,解决了人源抗体的研制问题,促进了各种性能优良抗体以及具有多种功能的抗体融合蛋白的开发。单链抗体(Single-chain variable

LSCM绿色荧光融合蛋白表达载体的构建

绿色荧光融合蛋白表达载体的构建 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP) 及其突变体能在各种不同的生物系统中表达,这对细胞生物学的研究具有重要意义。而荧光蛋白的折叠能力及其同细胞内蛋白的融合能力,使研究 者能直接在细胞体内观察到蛋白质的特性。研究者不需要把蛋白质经过

详述分子印记技术在荧光检测中的应用

  分子印记技术(Molecularly Imprinted Technology)指的是将待测物(模板分子)、功能单体、交联剂混合,一定条件下反应形成分子印记聚合物(Molecularly Imprinted Polymer,MIP)。而后通过特殊的方式将模板分子洗脱下来,得到的孔道能够特异性识别

绿色荧光蛋白在自然生活中起到的作用

  绿色荧光蛋的发光机理比荧光素/荧光素酶要简单得多。一种荧光素酶只能与相对应的一种荧光素合作来发光,而绿色荧光蛋白并不需要与其他物质合作,只需要用蓝光照射,就能自己发光。  在生物学研究中,科学家们常常利用这种能自己发光的荧光分子来作为生物体的标记。将这种荧光分子通过化学方法挂在其他不可见的分子上

绿色荧光蛋白(GFP)的应用

  骨架和细胞分裂  Kevin Sullivan's 实验室  酵母菌内SPB 和微管动力学  酵母菌中肌动蛋白的动力  果蝇中MEI-S332蛋白  果蝇有丝分裂和mRNA运输  网丙菌属细胞骨架  RNA剪切因子的核内运输  网丙菌属的趋化作用  网丙菌属中细胞骨架动力和细胞运动  核

浅析流式荧光技术在白血病融合基因检测方面的应用

白血病是严重威胁人类健康的恶性疾病,既往的细胞形态学分型诊断符合率及正确率受检测者主观成分影响较大,近两年白血病分子特征的研究取得了明显进展,尤其是对染色体易位形成的融合基因,有一些已作为诊断不同类型白血病的分子生物学特异性标志和确定诊断的唯一依据。 基于此,在流式荧光技术基础上推出的白血病融合

绿色荧光蛋白(GFP)在科学研究上的应用

绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,简称GFP)bs-2194P是一种能在蓝色波长光线激发下发出荧光的特殊蛋白质,正是这种神奇的性质,让它成为当今生物化学领域最有力的工具之一,被称为“生物北斗”。GFP在科学研究上有着惊人的用途,因为它能够使我们直接看到细胞内部的运动、分布