Antpedia LOGO WIKI资讯

RealtimePCR实验注意事项

实验中的一些好习惯加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均移液枪用完之后要归到最大计量的位置,防止久而久之弹簧失去弹性一定要记着关水浴箱,切记切记多和大家讨论,同时多关注别人讨论的经验,这几乎是最快提高的捷径了所有的试剂都自己配,出了问题才好找原因防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr或更长时间。2. 塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用氯仿冲洗(注意:有机玻璃器具因可被氯仿腐蚀,故不能使用)。3. 有机玻璃的电泳槽等,可先用去污剂洗涤,双蒸水冲洗,乙醇干燥,再浸泡在3% H2O2 室温10min,然后用0.1% DEPC水冲洗,晾干。4. 配制的溶液应尽可能的用0.1% DEPC,在37℃处理12hr以上。然后用高压灭菌除去残留的DEPC。不能高压灭菌的试剂,应当用DEPC处理过的无菌双蒸水配制,然后经0.22μm滤膜过滤除菌。5. 操作人员戴一次性口罩、帽子、手套,......阅读全文

RealTime ready自由定制您的qPCR 检测方法

RealTime ready qPCR 分析方法是罗氏诊断公司应用科学部于2010年最新推出的即用型qPCR定制检测方法,可快速灵敏地一次性定量6-384个基因的表达情况。您可于免费的RealTime ready 在线配置工具上,自由选择人类相关靶基因并进行定制型多孔检测板的配置。除了通

生物标志物研究与早期药物研发基因表达分析功...(一)

生物标志物研究与早期药物研发基因表达分析功能学检测RealTime ready 应用生物标志物研究与早期药物研发基因表达分析功能学检测RealTime ready应用 Sabine Lohmann*, Andrea Herold*, Tobias Bergauer#, Anton Be

生物标志物研究与早期药物研发基因表达分析功...(四)

FFPET 样本特异性RealTime ready qPCR检测潜在生物标志物假设检验我们使用的第一套临床样本来自于各种用于人类研究的福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)组织。肿瘤来源的 FFPE  组织是临床试验或生物标志物研究中,治疗复合物研发最具有相关性的样本材料。使用 High

罗氏为FFPE样品推出两款新工具

  罗氏诊断应用科学部近日宣布推出两款新产品:High Pure FFPET RNA Isolation Kit和RealTime ready cDNA Pre-Amp Master & Primer Pools,适用于福尔马林固定和石蜡包埋的组织(FFPET)。   据估计,现有超过

如何做实时荧光定量 PCR (realtime PCR)

  标签: 实时 荧光定量 PCR realtime PCR 本生生物   所谓实时荧光定量 PCR 技术,是指在 PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。   原理及材料:   实验材料:细胞样品   试剂、

生物标志物研究与早期药物研发基因表达分析功...(二)

材料与方法 细胞培养于标准条件下进行肿瘤细胞系(ACHN、Caki、SJSA、PANC-1、MDA-MB231、AsPC-1、SK-MES、NCI-H322M、22RV1)培养。使用TWEAK或 Anti-TWEAK(RO5458640)分别对细胞进行处理。于不同时间点收集肿瘤细胞系(

实时荧光定量PCR(realtime PCR)

            实验方法原理 实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

生物标志物研究与早期药物研发基因表达分析功...(三)

靶基因表达标准化参考基因选择对于相关定量分析来说,通过参考基因表达进行靶基因表达标准化。理想情况下,标准化处理应该能够补偿 RNA/cDNA起始量变异情况,以及cDNA合成或 PCR 扩增中潜在抑制剂的作用。参考基因作为内源性样本材料对照,工作流中,与靶基因一同被处理。为获取可靠结果,标准化

实时荧光定量PCR(realtime PCR)

实验材料 细胞样品试剂、试剂盒 RNA提取试剂盒荧光定量PCR MixTRIZOLdNTP氯仿逆转录酶MMLV异丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2琼脂糖溴化乙锭MOPS甲醛乙酸钠EDTAEB溴酚兰仪器、耗材 离心管离心机风光光度计电泳槽凝胶板Realtime PCR仪实验步骤 一、 样品

荧光定量PCR具体使用操作步骤简介

操作步骤荧光定量PCR 实验步骤:折叠样品RNA的抽提①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层

罗氏、雅培、丹纳赫、西门子新冠检测产品趋势分析大盘点!

  在全球经济受到新冠疫情影响的时候,检测试剂在全球范围需求量庞大,引发IVD企业积极研发相应产品并申报,攫取利润。  但在不同企业战略眼光、研发效率及申报、生产能力的差异下,各项进度落后于人的企业则要面对新冠检测试剂产品竞争加剧,带量采购造成价格大幅下降等情况,企业间获利也出现显著分化。  我们总

实时荧光定量PCR(realtime PCR)

实验步骤一、 样品RNA的抽提 1.  取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。2.  两相分离 每1 ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2 ml的氯仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12 000 rpm离心15分

登革热基孔肯雅热三合一核酸检测试剂盒英文使用说明

Lot-No.Ref. FR342 Expiry time: 1 year100 Tests (Ready to use PCR kit)   -Only for in vitro use--Only for research use – To be used by a

One Step RT- PCR PreMix(染料法)使用说明

One Step RT- PCR PreMix(染料法) 使 用 说 明 书 【前言】 本产品提供了一个灵敏、高效、快速地扩增并检测 RNA 的完整系统。One Step RT- PCR preMix 包含所有 RT-PCR 所需的、并经优化的 Reaction Buffer、RT 酶混合物等,使用

实时荧光定量PCR具体实验步骤(二)

5 制备用于绘制梯度稀释标准曲线的DNA模板①针对每一需要测量的基因,选择一确定表达该基因的cDNA模板进行PCR反应。反应体系:序号  反应物  剂量1  10× PCR缓冲液  2.5 ul2  MgCl2 溶液  1.5 ul3&nb

生化分析仪50问,从此不求人

( 1 )问题:工作结束之后不能再次开始工作或正常关机。原因:最常见的原因是打印机处于实时打印状态( Data Log List 或 Realtime Report 状态),打印机可能缺纸、卡纸、被误操作为暂停或关机等。解决方法:排除打印机故障,点击 < 仪器状态 >< ( 6 )

治疗特定白血病 首款IDH1抑制剂Tibsovo获FDA批准

  近日,癌症生物制药公司Agios Pharmaceuticals宣布,其抗癌药物TIBSOVO(ivosidenib)获得美国FDA的批准,用于经一款检测方法(雅培RealTime IDH1伴随诊断试剂盒)证实存在易感异柠檬酸脱氢酶-1(IDH1)突变的复发性或难治性急性髓系白血病(R/R AM

shRNA干扰载体构建

产品技术背景pRI系列载体是基于III类RNA聚合酶启动子:人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止信号,H1启动子转录产物精确生成人工设计的shRNA,shRNA经过RISC剪切后形

定量PCR仪的应用

实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction简称Real Time PCR)是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied biosystems公司推出,在PCR反应体

PCR技术盘点

  PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:模板DNA的变性,模板DNA与引物的退火(复性),引物的延伸。重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟, 2~3小

miRNA引物设计流程介绍

MiRNA的命名原则可以大致归纳如下:一个系统命名包含三部分内容,即物种,microRNA类别,序号。三者间用短线连接。物种一般用三个小写字母表示,如hsa,mmu和rno分别代表人,小鼠和大鼠。MicroRNA类别是指所命名的microRNA是pre-miRNA还是mature miRNA。pre

定量PCR仪的应用

定量PCR仪的应用实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction简称Real Time PCR)是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied biosystems公司推

总统推荐、FDA特批的ID NOW 5分钟检测新冠病毒是啥原理?

根据雅培所说,其ID NOW COVID-19检测仪非常轻巧,只有6.6磅重,相当于一台面包机大小。无需将其送到中心实验室进行分析,而是直接在急救室或紧急护理诊所进行,这能减少部分患者所面临的长达数天的检测结果等待时间。医生将采集到病人鼻咽拭子的棉签直接插入机器,测试新冠病毒阳性反应只需要5分钟时间

MDS新药!首创IDH1抑制剂Tibsovo获突破性药物资格

  Agios是美国知名的癌症生物制药公司,是研究细胞代谢治疗癌症和罕见遗传病领域的领导者。近日,该公司宣布,美国食品和药物管理局(FDA)已授予靶向抗癌药Tibsovo(ivosidenib)突破性药物资格(BTD),用于治疗经FDA批准的一款检测方法证实携带一种易感IDH1突变的复发或难治性骨髓

RNA干扰载体的构建的实验流程

RNA干扰载体主要用来研究基因表达调控,RNA干扰技术已已被广泛用于基因结构功能研究和传染性疾病及基因治疗领域,进行RNA干扰实验首先是构建RNA干扰载体,本文以pRI系列载体为例论述了干扰载体的构建的实验流程。产品技术背景pRI系列载体是基于III类rna聚合酶启动子:人类H1启动子的专用于哺乳动

真假鱼翅分析—RephiLe

2013年1月8日,CCTV央视新闻播出了记者卧底暗访假鱼翅真相的报道,其中曝光了不少饭店所售鱼翅实为明胶制作的“赝品”,这些所谓的鱼翅不过是用“鱼翅精”调制而成的。 鱼翅作为中国传统的名贵食材之一,广泛为东亚各国所接收。鱼翅以鲨鱼的鳍制成,有机成分主要有多种蛋白如软骨粘蛋白、胶原和软骨硬蛋白等。鱼

免疫组化实验过程中的注意事项

如何随心所欲的做好免疫组化?免疫组化(Immunohistochemistry) 至今也有八十余年的历史了,从 1930 年免疫组化的理论被提出讨论,一直到 1941 年以带有荧光色素的抗体,成功地观察到组织中肺炎双球菌抗原的存在,至此之后不断对于方法改良创新,也就形成了我们实验中才使用的免

原来分子信标引物设计可以这样

分子信标的设计分子信标(Tyagi and Kramer 1996) 是另一种特异的荧光实时 PCR 探针(图 1), 这种分子信标可以在体内和体外动态地、实时地检测核酸 杂交事件(Tyagi and Kramer 1996; Kostrikis et al. 1998; Tyagietal. 19

病毒核酸检测试剂盒英文使用说明

Lot-No.Ref. FR340 Expiry time: 1 year100 Tests (Ready to use PCR kit)  Zika Virus    (Real time) DOUBLE CHECK    &n

自动电化学发光免疫分析仪仪器标准操作规程

(一) ROCHE Modular Analytics E170 型自动电化学发光分析仪  开/关机程序1  开机前准备1.1 确保软区内没有软盘。1.2 仪器开启前开启供水装置,然后依次开启打印机、显示屏、和计算机。1.3 倒空废液桶。2  开机2.1 手工启动2.1