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自学动手共聚焦显微镜荧光样品的制备全过程

一、样品的预处理 样品的预处理包括给药、切片或细胞标本的制备。其中给药过程要根据实验目的来进行,在这里主要介绍切片和细胞标本的制备。 1、组织切片样品的处理 其制作过程主要包括组织样品固定、切片制作。组织切片的优点是能够完好地保存细胞间的相互关系和结构,因此是生物医学实验中应用广泛的样品形式。用于共聚焦显微镜测定的切片形式有:活的组织切片、冰冻切片及固定切片。活的组织切片无需固定,活体直接切片后用于观察或测定组织具有活性状态下的一些生理指标。该类切片的缺点是保存条件要求高、时间短,切片比较厚,深层不容易染色。冰冻切片的优点是荧光背景低,引入杂质干扰少,常用于免疫荧光的标记和检测。 2、细胞标本的制备 荧光标记前细胞标本的制备过程包括细胞的培养和细胞的预处理等步骤,细胞的培养和预处理要注意细胞种类和纯度、密度、细胞形态等应符合实验目的。 ①细胞种类和纯度实验所选用细胞的种类一般是由实验目或测......阅读全文

自学动手共聚焦显微镜荧光样品的制备全过程

  一、样品的预处理   样品的预处理包括给药、切片或细胞标本的制备。其中给药过程要根据实验目的来进行,在这里主要介绍切片和细胞标本的制备。   1、组织切片样品的处理   其制作过程主要包括组织样品固定、切片制作。组织切片的优点是能够完好地保存细胞间的相互关系和结构,因此是生物医学实验中应用

共聚焦显微镜中荧光团的共定位

在多标荧光样品图像中,因两个或多个荧光团在显微结构中距离很近,经常会有发射信号叠加,这种效应就称为共定位。目前,高特异性合成荧光团和经典免疫荧光技术的应用、精密光切技术的应用、共聚焦和多光子显微镜提供的数字图像处理技术等大大提高了生物样品中共定位检测的能力。

激光共聚焦显微镜样品制备方法

激光共聚焦显微镜样品制备方法 随着生物学研究的不断深入,越来越多的研究要求在细胞体内(in vivo),甚至是动物体水平上研究蛋白质功能或动态变化。而随着检测设备的提升、各种显微技术的发展和标记手段的提高,如激光共聚焦显微镜在生物学研究中的广泛应用,使得研究者能够迅速、准确地观察到蛋白质在细胞内的表

激光共聚焦显微镜样品制备方法

组织的采集、固定和保存 不同来源的组织可依据实验条件和实验目的而采用不同的固定和保存方法。实验室通常采用液氮冷冻法和多聚甲醛( PFA) 固定法。 液氮冷冻法:采取新鲜组织后,即可放入液氮中保存。 多聚甲醛固定法:小鼠、大鼠等实验动物经生理盐水和 4% PFA 灌流,采取组织,组织块尽量小于1cm 

共聚焦显微镜常规样品的制备要求

  共聚焦显微镜是20世纪80年代发展起来的一项具有划时代意义的高科技新产品,是当今分子生物学和生命科学重要的分析仪器之一。共聚焦显微镜是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察诸多生理信号机细胞形态的变化,成为形

常规共聚焦显微镜的样品制备有哪些要求?

   共聚焦显微镜样品制备是检测前的关键步骤。样品需经荧光探剂标记(单标、双标、三标)。  标本可以是固定的或活的组织,也可以是固定的或活的贴壁培养,细胞应培养在Confocal专用小培养皿或盖玻片上,悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封片。样品的Zda厚度约1~2mm,使用的盖玻片厚度应小于0.17

常规共聚焦显微镜的样品制备有哪些要求

   共聚焦显微镜样品制备是检测前的关键步骤。样品需经荧光探剂标记(单标、双标、三标)。  标本可以是固定的或活的组织,也可以是固定的或活的贴壁培养,细胞应培养在Confocal专用小培养皿或盖玻片上,悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封片。样品的Zda厚度约1~2mm,使用的盖玻片厚度应小于0.17

激光扫描共聚焦荧光显微镜的样品要求

  1,样品经荧光探针标记;  2,固定的或活的组织;  3,固定的或活的贴壁培养细胞应培养在Confocal专用小培养皿或盖玻片上;  4,悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封片;  5,载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,盖玻片应光洁,厚度在0.17mm左右  6,标本不能太厚,如太厚激发光大部

共激光扫描共聚焦显微镜

共激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscope,LSCM)是一种先进的分子生物学和细胞生物学研究仪器。它在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,结合数据化图像处理技术,采集组织和细胞内荧光标记图像,在亚细胞水平观察钙等离子水平的变化,并结合电生理等技术

共聚焦图中对荧光团共定位

正如上面所讨论的,在共聚焦图中对荧光团共定位的定量测定,可通过散点图和感兴趣区域的信息获得。从整个散点图的信息,可获得很多变量值。Pearson′s 系数就是用于分析整个散点图的诸多变量中的一个,为描述两幅图之间重叠程度,在识别一幅图像和另一幅图像的匹配程度上, Pearson′s, R(r)系数是