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实验材料载体试剂、试剂盒牛血清DMEM葡聚糖PBSDMSOEDTA仪器、耗材培养皿培养箱相差显微镜离心机实验步骤1. 将目的基因亚克隆至合适的载体中得到所需的重组DNA，用小量法（5 ml 培养物）或用CsCl/溴化乙锭离心法纯化重组DNA。2. 将在DMEM-10 CS中生长汇片的COS-7细胞（每100 mm 培养皿约细胞）在转染的前一天以1：5的比例分瓶，这样第二天细胞将长至约50%汇片的程度，让细胞在 CO2培养箱中于37℃生长过夜至约50%汇片。3. 使用前（相应于待转染的每一个100 mm 平皿的COS细胞）将55 ml 37℃的DMEM-10 NS 培养液与5~10 μg 重组DNA彻底混匀，再加入0.2 ml 葡聚糖/氯喹溶液，混匀。 4. 吸出COS细胞的培养液，向每一个100 mm 平血加入步骤3制备的DMEM-10 CS/DEAE......阅读全文
摘要: 蛋白质组研究目的在于从蛋白水平阐明基因的功能，这对于探索生命的奥秘具有重要的意义。蛋白质芯片是近年来兴起的一种强有力的高通量研究方法， 能够一次平行分析成千上万的蛋白样品， 具有很高的敏感度与准确性。它将成为蛋白质组学研究中的强有力的研究方法， 并最终架起基因组学与蛋白质组学的桥梁。1 研
蛋白表达是指用模式生物如细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术。蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系，通过这个体系可以实现外源基因在宿主中表达的目的。 1、宿主。表达蛋白的生物体。可以为细菌、酵母、植物细胞、动物细胞等。由于各种生物的特性
蛋白表达是指用模式生物如细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术。蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系，通过这个体系可以实现外源基因在宿主中表达的目的。1、宿主。表达蛋白的生物体。可以为细菌、酵母、植物细胞、动物细胞等。由于各种生物的特性不同，适合表
实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒，其基因组含有一段外源核酸序列，通常为编码目标蛋白质的dDNA，在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成
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试剂、试剂盒叶片悬浮缓冲液EDTA 水溶液硫脲缓冲液硫酸铵溶液SDS 溶液仪器、耗材细胞等电聚焦电泳仪等电聚焦托盘及盖实验步骤3.1 叶和根组织的收集和沉淀蛋白( 1 ) 从植物的中部切取绿色叶片，迅速放入塑料袋里冷却。如果没有冰箱，可先放到冰上，再放入 -20°C 保存。( 2 ) 对于根部组织，
近年来，随着生物药市场和基因工程技术的发展，重组治疗性抗体或者单抗的需求在生物药中的比例也逐年上升。重组mAbs被应用于包括癌症及免疫系统缺陷在内的许多疾病的治疗当中。 重组mAbs通过基因工程技术改造后可以在多种宿主细胞表达。重组mAbs在表达后进行翻译后修饰、蛋白质折叠、组装及适当的糖
近年来，随着生物药市场和基因工程技术的发展，重组治疗性抗体或者单抗的需求在生物药中的比例也逐年上升。重组mAbs被应用于包括癌症及免疫系统缺陷在内的许多疾病的治疗当中。重组mAbs通过基因工程技术改造后可以在多种宿主细胞表达。重组mAbs在表达后进行翻译后修饰、蛋白质折叠、组装及适当的糖基化才能具有
鲁汶大学VIB研究所的Bassem Hassan研究小组发现了从前未知的一种机制，这一机制在物种间高度保守，通过精确地时间控制对大脑发育至关重要的一个蛋白质家族：proneural蛋白的活性调控了神经发生。这一机制——一种简单的可逆的化学修饰对于生成充足数量的神经元、它们的分化及中枢神经系统的发
五、亲代杆状病毒基因组的改进就像转移质粒的改进，对亲代杆状病毒基因组的改进也是为了满足各种不同的需要。起初，最主要的目的是找到克服重组杆状病毒载体构建和分离低效率的方法，这也是最初的杆状病毒-昆虫细胞系统存在的主要问题。现在已经知道这个问题的根源在于, 在共转染的昆虫细胞系中，转移质粒和亲代杆状病毒
实验材料 宿主细胞质粒或λ噬菌体表达载体包装提取物电转化感受态大肠杆菌试剂、试剂盒 限制性内切核酸酶缓冲液限制性内切核酸酶通过 poly(A)+富集的 mRNAcDNA 文库含适当抗生素的 Terrific 球脂平板含适当抗生素的 Terrific 肉汤培养基仪器、耗材 cDNA 合成试剂盒实验步骤
本章描述了改进融合蛋白在 M13 噬菌体颗粒表面展示水平的一个方法。向 M13 衣壳锚定蛋白引入突变后，蛋白质展示水平约能增加两个数量级。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。实验材料羧苄青霉素氯霉素大肠杆菌 CJ236试剂、试剂盒生理磷酸缓冲液超纯甘油PBS-
类似方案 1、方案 2 描述了在真核表达载体上进行 cDNA 文库构建与筛选的方法, 流程分为以下两个阶段：1. 在真核表达载体上构建 cDNA 文库；2. 在真核表达载体上构建的 cDNA 文库的筛选。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）上册，作者：黄培堂。实验材料宿主细胞质粒或λ噬菌体表达载体
实验材料 过表达σ32 的大肠杆菌细胞株试剂、试剂盒 氯霉素氨苄青霉素异丙基硫代-β-D-半乳糖苷利福平LB 培养基SDS 样品缓冲液脱氧胆酸钠仪器、耗材 Oak Ridge 离心管带刻度的聚丙烯锥形离心管Tissue-TearorTM 匀浆器超声破碎器实验步骤 材料与设备过表达σ32 的大肠杆菌细
实验材料 宿主细胞 质粒或λ噬菌体表达载体 包装提取物 电转化感受态大肠杆菌
本文为大家带来再生医学领域的最新研究进展，帮助大家了解再生医学领域近期的重大研究成果，希望大家喜欢。 【1】PNAS：重大进展！发现胎盘干细胞能够再生心脏，有望开发出新型干细胞疗法来治疗心脏病 DOI：10.1073/pnas.1811827116. 在一项新的研究中，来自美国西奈山伊坎医
【1】PNAS：重大进展！发现胎盘干细胞能够再生心脏，有望开发出新型干细胞疗法来治疗心脏病 DOI：10.1073/pnas.1811827116. 在一项新的研究中，来自美国西奈山伊坎医学院的研究人员证实在动物模型中，来自胎盘的称为Cdx2细胞的干细胞能够在心脏病发作后再生健康的心脏细胞。
实验材料 过表达σ32 的大肠杆菌细胞株 试剂、试剂盒 氯霉素
高世勇*，吕凤，许东旭 （哈尔滨商业大学药物工程技术研究中心，黑龙江 哈尔滨 150076） * 通讯作者：高世勇，研究员 [摘要] 乳腺癌作为一种激素依赖性肿瘤，其发生、发展与雌激素受体的表达密切相关。雌激素可调节多种生理过程，例如细胞生长、增殖、发育和分化。而雌激素受体与雌激素结合可
一、原理 一个基因表达的最终产物是产生相应的蛋白，因此检测蛋白是测定基因表达的主要标志。 原理：Western Blotting 是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离；并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持
2020年3月20日，云序客户上海交通大学附属第一人民医院田聆教授课题组在高分期刊Moleular Cancer杂志（影响因子10.679）发表了关于外泌体在胰腺癌肿瘤再生长中的研究。肿瘤再生长是放射治疗失败的主要原因。以往的研究表明，死亡的肿瘤细胞通过促进残留的肿瘤再生细胞(TrCs)的增殖，
文章导读 2020年3月20日，云序客户上海交通大学附属第一人民医院田聆教授课题组在高分期刊Moleular Cancer杂志（影响因子10.679）发表了关于外泌体在胰腺癌肿瘤再生长中的研究。肿瘤再生长是放射治疗失败的主要原因。以往的研究表明，死亡的肿瘤细胞通过促进残留的肿瘤再生细胞(T
定位在肠隐窝中的静态细胞是否是干细胞，长期以来存在很大的争议。答案似乎可以说是也可以说不是，这取决于你对于“干细胞”这一术语的定义。 小肠上皮细胞层是哺乳动物机体的自我更新支持者，它的生命周期只有4-5天。结合其特征性的隐窝-绒毛结构，这一上皮细胞成为了研究哺乳动物干细胞的选择模型。肠隐窝
实验材料过表达σ32 的大肠杆菌细胞株试剂、试剂盒氯霉素氨苄青霉素异丙基硫代-β-D-半乳糖苷利福平LB 培养基SDS 样品缓冲液脱氧胆酸钠仪器、耗材Oak Ridge 离心管带刻度的聚丙烯锥形离心管Tissue-TearorTM 匀浆器超声破碎器实验步骤材料与设备过表达σ32 的大肠杆菌
Nature争鸣 | 一场关于乳腺癌细胞命运决定的争论： 细胞命运的紊乱是许多人类疾病的基础，其中也包括乳腺癌。然而，乳腺细胞命运的调节机制在很大程度上是未知的。乳腺上皮由分化的管腔上皮细胞和基底肌上皮细胞，以及未分化的干细胞和更多限制性祖细胞组成，乳腺癌起源于此，但乳腺上皮层次结构的分子机制
（5）垂死的肿瘤细胞释放的PGE2促进TRC的增殖如前所述，垂死的肿瘤细胞能促进报告细胞的增殖，这暗示着TRCs被除了外泌体miR-194以外的物质驱使加速了增殖。众所周知，受辐射的垂死肿瘤细胞还释放了PGE2，这是一种脂质代谢产物，被认为是化学放疗后肿瘤重生的重要介质。因此，作者通过ELISA定量
当C.elegans线虫在腐烂的水果上蜿蜒而行寻找细菌吃的时候，它有时会吃到不该吃的细菌。有些细菌在被摄入后对线虫是致命的，但不幸的是，线虫不能每次都把它们和有营养的种类区分开来——明白的时候，为时已晚。 不过，普林斯顿大学的研究人员最近在实验室观察线虫时发现，虽然为时已晚，它们还是有办法“转
近20年来，高通量技术的发展支持了大规模的基因组、转录组和蛋白质组定量分析。这些数据被用来分析在不同系统和条件下转录组与蛋白质组的定量关系。这些研究有时候会导致一些冲突的结论，尤其是究竟在何种程度上mRNA的量控制了蛋白质的量。 基础生命科学研究和转化生命科学研究的一个核心问题是：基因组
作为潜在的新一代治疗和研究工具，几乎没有什么生命科学技术比基因组编辑蛋白质更具发展前景——研究人员可通过编程这些分子来改变特定基因，以治疗或甚至治愈一些遗传性疾病。 可是，要将这些基因组编辑蛋白导入到细胞中，尤其是活体动物或人类患者体内，对于研究人员而言却仍是一个巨大的挑战。 通常，研究人
[实验目的] 1 了解细胞转染技术原理和基本方法 2 磷酸钙沉淀法的基本技术要点 [实验原理] 磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法，磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮作用进入靶细胞，被