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光谱染色体核型分析实验(二)

三、染色体标本预处理和变性1.染色体标本至少自然老化2d或用前37℃过夜。2.染色体标本在系列乙醇(70%、80%和95%)中分别脱水5min,晾干。3.加入15〜20μL的10%胃蛋白酶储存液到50mL预热的0.01mol/L HCl中,将染色体标本在37℃染色缸中温育5min。同时,准备一缸70%甲酰胺/2×SSC溶液并放入75℃水浴中预热。4.取出标本,在室温下的1×PBS中漂洗5min。5.在1×PBS/MgCl2室温温育5min。6.向50mL 1×PBS/MgCl2中加入1.5mL37%甲醛,在室温下的该溶液中温育标本10min。7.在室温中的1×PBS中漂洗5min。8.按步骤2中所述方法再次进行系列乙醇脱水。9.晾干片子后,检查甲酰胺溶液的温度是否达到75℃;将染色体标本在75℃甲酰胺溶液中变性2min。10.迅速将标本转移到冰冷的70%乙醇中并用系列乙醇脱水后晾干。四、探针变性1.对于每张标本,22mm×22m......阅读全文

光谱染色体核型分析实验(二)

三、染色体标本预处理和变性1.染色体标本至少自然老化2d或用前37℃过夜。2.染色体标本在系列乙醇(70%、80%和95%)中分别脱水5min,晾干。3.加入15〜20μL的10%胃蛋白酶储存液到50mL预热的0.01mol/L HCl中,将染色体标本在37℃染色缸中温育5min。同时,准备一缸70

光谱染色体核型分析实验

实验方法原理光谱染色体核型分析(SKY)采用24种颜色对所有染色体进行涂染,在一次试验中可以观察到每一条染色体。该技术以光谱成像和傅里叶光谱学原理为基础。对流式分选的染色体进行PCR标记,直接标记荧光素或间接标记半抗原。5种光谱学不同的纯色染料进行组合得到独特的染色体探针混合物。探针混合物与中期染色

光谱染色体核型分析实验

基本方案             实验方法原理 光谱染色体核型分析(SKY)采用24种颜色对所有染色体进行涂染,在一次试验中可以观察到每一条染色体。该技术以光谱成像和傅里叶光谱学原理

光谱染色体核型分析实验(一)

实验方法原理 光谱染色体核型分析(SKY)采用24种颜色对所有染色体进行涂染,在一次试验中可以观察到每一条染色体。该技术以光谱成像和傅里叶光谱学原理为基础。对流式分选的染色体进行PCR标记,直接标记荧光素或间接标记半抗原。5种光谱学不同的纯色染料进行组合得到独特的染色体探针混合物。探针混合物与中期染

光谱染色体核型分析

实验材料 AppliedSpectralImaging ( MigdalHaemekIsrael) 试剂盒组织样本试剂、试剂盒 组织培养基秋水仙胺柠檬酸盐KCl甲醇冰乙醇去离子甲酰胺20 X SCCHClPBS MgCl2分装标记探针二甲苯仪器、耗材 解剖刀和刀片 无菌培养皿组织培养瓶培养箱水浴锅离

染色体核型分析

一、实验目的 掌握染色体核型分析的各种数据指标,学习染色体核型分析的基本方法。二、实验原理 染色体核型是指将动物、植物等的某一个体或某一分类群(亚种、种、属等)的体细胞整套染色体按它们相对恒定的特征排列起来的图像。核型分析通常需辨析每条染色体的特征。它包括染色体的数目、长度、

染色体核型分析方法

  镜下选择染色体分散适度(不过于分散和相互重叠),染色体长短合适,染色清晰的分裂相,在油镜下观察。  1.计数  将一个细胞中的全部染色体按其自然位置划成几个小区,为了防止重数或漏数,可按其镜下形态画出简图然后计数,确定有无数目异常。人类正常体细胞2n=46,其中常染色体22对,性染色体1对,正常

染色体核型分析的分析技术

  一、GRQ带技术  人类染色体用Giemsa染料染色呈均质状,但是如果染色体经过变性和(或)酶消化等不同处理后,再染色可呈现一系列深浅交替的带纹,这些带纹图形称为染色体带型。显带技术就是通过特殊的染色方法使染色体的不同区域着色,使染色体在光镜下呈现出明暗相间的带纹。每个染色体都有特定的带纹,甚至

染色体核型分析的介绍

  染色体核型分析技术,传统上是观察染色体形态,近年来,采用荧光原位杂交技术,将荧光素标记的探针进行染色体核型特定位点的检测和标记,可以精确地检测染色体上DNA链中,单个碱基的突变,从而大大提高了染色体核型分析的精度。

人类染色体核型分析

实验概要学习和掌握人类染色体核型分析的方法,进一步识别和鉴定人类染色体。实验原理核型(karyotype)一词在20世纪20年代首先由苏联学者T. A. Levzky等人提出。核型分析的发展有三项技术起了很重要的促进作用,一是1952年美籍华人细胞学家徐道觉发现的低渗处理技术,使中期细胞的染