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此过程在真核细胞和原核细胞中高度类似，下面只以原核细胞为例进行讨论。涉及到的因子主要有EF·Tu和EF·G，在真核细胞中对应的名称分别是是eEF1和eEF2。A. tRNA的转运和入位（1）非起始AA·tRNA结合EF·Tu·GTP形成一个三元复合物；（2）该三元复合物结合至核糖体P位点，tRNA反密码子和mRNA密码子进行配对，伴随着tRNA构象改变；（3）小亚基RNA中G530、A1492、A1493等位点和密码子及反密码子互作，使其稳定配对；（4）EF·Tu在核糖体大亚基因子结合位点（FBS）His-84氨基酸残基的刺激下将GTP水解成GDP和Pi；（5）EF·Tu·GDP对核糖体亲和力较低从中释放； [2] （6）tRNA进一步发生构象变化，使得其受体臂3‘端和P位点上受体臂3’端距离很近，为肽链的转移作准备；tRNA的特异性配对大多在此过程中得以筛选确认。如果反密码子和密码子不能成功匹配，会影响以下......阅读全文
此过程在真核细胞和原核细胞中高度类似，下面只以原核细胞为例进行讨论。涉及到的因子主要有EF·Tu和EF·G，在真核细胞中对应的名称分别是是eEF1和eEF2。A. tRNA的转运和入位（1）非起始AA·tRNA结合EF·Tu·GTP形成一个三元复合物；（2）该三元复合物结合至核糖体P位点，tRNA反
本过程细胞主要需完成以下目标：（1）使翻译停止，不再有新的氨基酸掺入；（2）释放合成的多肽链；（3）释放结合在mRNA上的各组分；（4）确保核糖体大小亚基以及重要因子的重复利用。原核细胞和真核细胞在此过程的处理上有明显不同，下面将分开介绍。 （一）原核细胞A.肽链的释放（1）释放因子RF1/2 （t
方法 1：重组载体构建同前面实验 2：诱导表达：提取带重组片断的质粒DNA转化BL21（DE3）受体菌37℃活化过夜，转入新鲜培养基摇菌至对数生长期（约2－3小时），加入IPTG至终浓度0.4mM，继续培养6小时 3：表达产物提取及鉴定见实验十九
1体外TNTRT7 转录/翻译系统表达重组基因体外翻译是研究基因表达、基因调控的一类重要技术，该技术可广泛用于基因表达量、启动序列等调控因子的确立，并结合PTT实验筛选天然突变或人工诱变的基因片段，还可用来进行蛋白和DNA结合方面的研究。早期的体外翻译研究大多是提取mRNA然后通过网织红细胞或麦胚系
任何体内的生物反应都必须在调控的作用下，才有意义。翻译的调控是十分精密复杂的。在原核生物里翻译调控的基本单位不是单个的mRNA而是mRNA中的单个阅读框。以ATP合成酶为例，在原核生物里，该酶包含A、B、C、D、E、F、G、H等多个亚基，其基因拷贝均为一份，在转录时转录到同一个mRNA上。而实际每个
中文名称非翻译区英文名称untranslated region;UTR定 义成熟mRNA分子5'或3'端不被翻译的部分。应用学科遗传学（一级学科），分子遗传学（二级学科）
上游开放阅读框uORF广泛存在于动植物基因的5’非翻译区，通常能够抑制下游主开放阅读框pORF的翻译。中国科学院遗传与发育生物学研究所高彩霞研究组率先利用CRISPR/Cas9技术对uORF进行编辑，发现能够显着提高目标基因的翻译效率，建立了利用基因组编辑调控内源基因蛋白质翻译效率的新方法，相关成果
上游开放阅读框uORF广泛存在于动植物基因的5’非翻译区，通常能够抑制下游主开放阅读框pORF的翻译。中国科学院遗传与发育生物学研究所高彩霞研究组率先利用CRISPR/Cas9技术对uORF进行编辑，发现能够显着提高目标基因的翻译效率，建立了利用基因组编辑调控内源基因蛋白质翻译效率的新方法，相关
DNA的克隆是指在体外将含有目的基因或其它有意义的DNA片段同能够自我复制的载体DNA连接，然后将其转入宿主细胞或受体生物进行表达或进一步研究的分子操作的过程，因此DNA克隆又称分子克隆，基因操作或重组DNA技术。实验材料DNA试剂、试剂盒TE核苷三磷酸混合液RNA聚合酶缓冲液异丁醇NaOHTCA仪
实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE核苷三磷酸混合液RNA聚合酶缓冲液异丁醇NaOHTCA仪器、耗材 离心机摇床实验步骤 1. 亚克隆编码蛋白质的目的DNA片段于质粒载体的SP6或T7启动子的下游。 2. 通过CsCl/溴化乙锭离心或PEG沉淀制备质粒DNA。 3. 用位点在终止密码子的立即下游