Antpedia LOGO WIKI资讯

哺乳动物中制备基因组DNA实验——制备DNA

在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素,以保证DNA的完整性,为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp,可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取,常是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提而实现的。实验材料动物组织试剂、试剂盒PBS乙酸铵乙醇酚氯仿异戊醇TE仪器、耗材离心机摇床研钵实验步骤1. 切下组织并立即剪成小块,置于液氮中冻结。 2. 将200 mg~1 g 的组织用预冷的研钵和研杵研碎,或用锤子将其捣为细粉末,每100 mg 组织用1. 2 ml 消化缓冲液悬浮。 3. 500 g 离心细胞5 min,弃上请。贴壁生长细胞先用胰酶消化。4. 细胞用1~10 ml 冰冷的PBS重悬,500 g 离心5 min,弃上清,重复1次。5. 用1体积 的消化缓冲液重悬细胞。......阅读全文

酵母DNA微量制备

实验概要 本实验介绍了分别从40ml和5ml酵母培养液中制备酵母DNA的操作流程。 实验步骤 1. 酵母DNA微量制备(40ml)    1) 在125ml三角瓶中用40ml YPD培养液在30℃条件下培养细胞达最大生长量(过夜)。    2) 将上述培养物移入螺盖离心管,用医用离心机或

胸腺DNA的制备

实验概要本实验介绍了浓盐法小牛胸腺DNA制备的原理及操作步骤。实验原理DNA在生物体内是以与蛋白质形成复合物的形式存在的,因此提取出脱氧核糖核酸蛋白复合物(DNP)后,必须将其中的蛋白质除去。小牛胸腺,鱼类精子和植物种子的胚等含有丰富的DNA,可作为提取DNA的良好材料。动物和植物组织的脱氧核糖核蛋

哺乳动物中制备基因组DNA实验——制备DNA

在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素,以保证DNA的完整性,为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp,可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取,常是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提而实现的。实验材料动物组织试剂、

酵母菌DNA制备

实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD破菌缓冲液酚氯仿异戊醇LB仪器、耗材 玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤 1.  注盛于一个13 mm×100 mm 无菌玻璃试管中的2 ml 培养基接种含有带目的基因的质粒的酵母单菌落,在转动或摇动培养箱中30℃过夜培养到静止期。2.  将1.5 ml 的过夜培养

质粒DNA大量制备实验

碱裂解法 平衡离心法             实验方法原理 这一方案科能是最常用的质粒制备方法,该法不仅相当决捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。

酵母DNA的小量制备

实验方法原理 通过消化细胞壁,然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割,也可用作 PCR 的模板。实验材料 酶解酶 100T酵母细胞试剂、试剂盒 异丙醇醋酸钾SDS醋酸钠山梨糖醇缓冲液T

DNA芯片的制备方式

DNA芯片又叫做基因芯片(gene chip)或基因微阵列(microarray),寡核酸芯片,或DNA微阵列,它是通过微阵列技术将高密度DNA片段阵列以一定的排列方式使其附着在玻璃、尼龙等材料上面。由于常用计算机硅芯片作为固相支持物,所以称为DNA芯片。

快速制备酵母DNA法

实验概要本实验制备了酵母转化质粒,快速从转化酵母菌中分离了用于Southern分析的基因组DNA。主要试剂2% Triton X-100,1%SDS,100mmol/L NaCl,10mmol/L Tris-HCl(pH8),1mmol/L Na2EDTA,苯酚:氯仿:已戊醇(25:24:1),YP

质粒DNA大量制备实验

实验方法原理 这一方案科能是最常用的质粒制备方法,该法不仅相当决捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 葡萄糖TrisEDTATENaOHSDS异丙醇乙醇乙酸甲仪器、耗材 离心机漩涡混合器水浴锅实验步骤 1.  往2 ml 烧瓶中加入500 ml ,含有适当抗生素的L

酵母DNA的小量制备

            实验方法原理 通过消化细胞壁,然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割,也可用作 PCR 的模板。