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蛋白质组实验全套流程方案1

蛋白质组实验流程双向电泳的样品的制备样品制备原则样品制备是双向电泳中最关键的一步,将直接影响2-DE结果好坏。目前并没有一个通用的样品制备方法,尽管处理方法多种多样,但都遵循几个基本的原则:1)尽可能的提高样品蛋白的溶解度,抽提最大量的总蛋白,减少蛋白质的损失;2)减少对蛋白质的人为修饰;3)破坏蛋白质与其他生物大分子的相互作用,并使蛋白质处于完全变性状态。根据这一原则,样品制备需要四种主要的试剂:离液剂(chaotropes),主要包括尿素(Urea)和硫脲(thiourea);表面活性剂(sufactants),也称去垢剂,如CHAPS与Zwittergent系列等双性离子去垢剂;还原剂(reducing agents),最常用的是二硫苏糖醇(DTT)和磷酸三丁酯(TBP)等。当然,也可以选择性的加入Tris-base,蛋白酶抑制剂以及核酸酶。样品的来源不同,其裂解的缓冲液也各不相同。通过不同试剂的合理组合,以达......阅读全文

蛋白质组实验全套流程方案-1

 蛋白质组实验流程双向电泳的样品的制备样品制备原则样品制备是双向电泳中最关键的一步,将直接影响2-DE结果好坏。目前并没有一个通用的样品制备方法,尽管处理方法多种多样,但都遵循几个基本的原则:1)尽可能的提高样品蛋白的溶解度,抽提最大量的总蛋白,减少蛋白质的损失;2)减少对蛋白质的人为修饰;3)破坏

蛋白质组实验全套流程方案-2

聚丙烯酰胺凝胶的配制表1 配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液溶液成分不同体积(ml)凝胶液中各成分所需体积(ml)5101520253040506%   水2.65.37.910.613.215.921.226.5   30%丙烯酰胺溶液123456810   1.

北京胃癌蛋白质组全套检测时间缩短至1天

  胃癌是我国高发的恶性肿瘤之一,晚期胃癌患者五年生存率不足5%。临床上治疗胃癌的一线用药多为广谱抗癌药,造成化疗毒副作用大、疗效不明显。2013年,北京市科委在“生命科学领域前沿技术培育”专项中设立“基于蛋白质组学的胃癌个体化治疗技术研究”课题,日前取得了重要进展,胃癌蛋白质组全套检测时间缩短至1

年末机床全套保养方案

  1.切断电源   保养时,必须切断电源,然后进行工作,以确保操作安全。   2.清理工作位置   清理工作区域,确保清洁过程中有整洁和足够的空间   3.拆下并清洗机床各罩壳   保持内外清洁,无锈蚀,无油污。【金属加工微信,内容不错,值得关注】   4.刀架和滑板部分的保养   

cDNA文库组标准流程-1

一.Total RNA的提取 (一) 试剂配制 准备工作: 1.研钵、5ml/10ml/ 25ml移液管、100ml/250ml量筒、250ml /100ml容量瓶、药匙、 试剂瓶等玻璃制品均用锡纸包裹口部,置于烤箱内,180℃,烤6小时。 2.50ml/1.5ml离心管

酶联免疫吸附实验(ELISA) 全套解决方案

基本原理  1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗

全套抗体标记工具-全套抗体和蛋白质标记试剂盒的使用-1

     用特定标签标记抗体已成为生物科学和医学研究中的重要且常规程序,标签的范围从视觉标记(例如荧光染料)到半抗原分子(例如生物素),标签的作用有增强免疫复合物和蛋白质-蛋白质相互作用的可见性,以及用于蛋白质的分离和纯化。        在确定选择哪种标签类型时,应侧重于抗体的下游应用。荧光标

方案1 蛋白质的过甲酸氧化实验

实验材料冻干的纯化蛋白样品试剂、试剂盒甲酸氢溴酸过氧化氢NaOH 固体仪器、耗材旋转蒸发器小试管实验步骤1.加入 100ul 过氧化氢到 900ul 甲酸中,在室温下放置让,将反应产生过甲酸 (HCOOOH)。2.在冰上冷冻过甲酸至 0°C。3.在预冷的小试管中,将蛋白质溶解于 50ul 过甲酸中(

代谢组学全流程解决方案

赛默飞基于其超高分辨的静电场轨道阱(Orbitrap)质谱平台结合其功能强大的软件平台,提供代谢组学全流程解决方案。该方案不仅覆盖从极性代谢物到非极性代谢物的全面检测、峰提取与定量、统计学分析与可视化作图、代谢产物的全面鉴定、代谢通路分析等全流程的要求,而且还整合了从非靶标生物标记物发现到靶标生物标

蛋白质组学鉴定技术流程

蛋白质组(Proteome)的概念,蕞早由澳大利亚Macquarie大学的Wilkins和Williams于1994年首先提出的,是指一个基因组(Genome),或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。蛋白质组学(Proteomics)以细胞、组织或生物体全体蛋白质为研究对象,通过高通量的色谱质谱联用技术