Freezing Cells:
Cells should be growing well or known to be in log phase
Count, collect and pellet cells in a 15mL test tube
Resuspend in freezing media so that the concentration is no more than 5x10^6 cells/mL of cold freezing media
Transfer 1mL of cells to appropriately labelled cryovials and maintain on ice for approximately 30minutes
Transfer vials to -80C freezer for 24hrs
Transfer to liquid nitrogen dewar or -140C freezer for long-term storage.
Freezing media
10% DMSO
90% FCS
you'll need 1mL per 5x10^6 cells
Thawing Cells:
Remove vial from Liquid Nitrogen or -140C freezer and immediately transfer to 37C water bath
While holding the tip of the vial, gently agitate the vial, being careful hnot to allow water to penetrate the cap or seal
When completely thawed, transfer contents of vial to 15mL test tube
Slowly add 10mL warm complete media and spin at 1000g for 5min
Decant media and resuspend pellet in a volume of complete media appropriate for flask or macrowell
Transfer cells to flask or 24 well plate and incubate at 37C and 5%CO2
Cells can be checked visually or counted, beginning at approximately 1hr, for an estimate of viability. Immediate cell counts can be misleading
non-LTR逆转录转座子,或LongInterspersedNuclearElements(LINEs),是一类丰富的真核转座子,通过靶启动逆转录(TPRT)插入基因组。在TPRT过程中,一个目标D......
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2023年3月18日,《CellStemCell》期刊以封面文章的形式在线发表了中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心(神经科学研究所)、神经科学国家重点实验室陈跃军研究组题为《人神经分化过程中跨时间......
研究表明,人造光(artificiallight)是引发机体代谢紊乱的一种高风险因素,然而,光调节机体代谢背后的神经机制,目前研究人员并不清楚。近日,一篇发表在国际杂志Cell上题为“Lightmod......
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载脂蛋白E的三种亚型(APOE2,APOE3和APOE4)仅在两个氨基酸位置上存在差异,但其免疫调节作用却截然不同。这种APOE亚型依赖的潜在机制仍然是谜。2023年1月2日,西湖大学施一公团队在Ce......
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