蛋白质重组葡激酶高效液相色谱胰蛋白酶肽指纹图法

本方法采用高效液相色谱法测定胰蛋白酶酶解后的肽指纹图,适用于无盐冰冻干燥不同批次的葡激酶的肽指纹图谱分析。原理:将蛋白质进行酶解根据胰蛋白酶的选择性胰蛋白酶裂解位点在精氨酸Arg 和赖氨酸Lys 的羧基端利用液相色谱法分析酶裂解后生成的肽片段的指纹图谱通过比较在相同条件下所得肽段的数目和相对含量来鉴定蛋白质。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文

蛋白质胰蛋白酶磷酸肽图谱制定实验

 实验方法原理 实验材料 含 32P 标记的蛋白质的样品试剂、试剂盒 荧光墨水/染料碳酸氢铵2-巯基乙醇SDS载体蛋白(溶于去离子水中)三氯乙酸(TCA)乙醇过氧化氢甲酸TPCK-处理的胰蛋白酶(溶于去离子水/ HCl )电泳缓冲液绿色标记染料层析缓冲液仪器、耗材 单边剃刀刀片/手术刀片闪烁计数器1

运用肽库筛选磷酸化激酶motif方法

Screening Kinase Phosphorylation Motifs Using Peptide LibrariesIsaac A. Manke and Michael B. YaffeCenter for Cancer Research, Massachusetts Institute

蛋白质胰蛋白酶磷酸肽图谱制定实验1

实验材料含 32P 标记的蛋白质的样品试剂、试剂盒荧光墨水/染料碳酸氢铵2-巯基乙醇SDS载体蛋白(溶于去离子水中)三氯乙酸(TCA)乙醇过氧化氢甲酸TPCK-处理的胰蛋白酶(溶于去离子水/ HCl )电泳缓冲液绿色标记染料层析缓冲液仪器、耗材单边剃刀刀片/手术刀片闪烁计数器1.7 ml 微量离心管

体细胞重组定位法介绍

原理相同于基因纯合化的定位方法。由于体细胞交换发生得较少,所以常用 X射线处理杂合体使之发生更多的体细胞交换。

重组质粒的电转化法

首先,将0.1cm的电击杯放在冰上进行预冷,冻存的感受态细胞取出冰上溶解。2然后,用100微升的感受态细胞加入1微升纯化的连接液,或者加入0.5微升未纯化的连接液,小心混匀,在冰上放置二十分钟。3然后,将混合液加入预冷的电击杯中,注意擦干杯外的水,防止电火花,放入电转化仪的反应槽内,接上电源。4然后

大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒使用说明

原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 TAP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 TAP与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠TAP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值

关于通则重组胰蛋白酶检测要求国家药品标准草案的公示

  国家药典委拟制定通则“重组胰蛋白酶检测要求”国家药品标准,为确保标准的科学性、合理性和适用性,现公示征求社会各界意见(详见附件)。公示期为三个月。请相关单位认真研核,若有异议,请及时来函提交反馈意见, 并附相关说明、 实验数据和联系方式。 来函需加盖公章, 收文单位为“国家药典委员会办公室”,同

关于通则重组胰蛋白酶检测要求国家药品标准草案的公示

  近日,国家药典委员会拟制定通则“重组胰蛋白酶检测要求”国家药品标准,为确保标准的科学性、合理性和适用性,现公示征求社会各界意见(详见附件)。公示期为三个月。请相关单位认真研核,若有异议,请及时来函提交反馈意见, 并附相关说明、 实验数据和联系方式。 来函需加盖公章, 收文单位为“国家药典委员会办

大鼠肌酸激酶(CK)ELISA检测法

大鼠肌酸激酶(CK)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 CK 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CK与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠CK,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidi

酶在体内存在的几种主要形式(一)

  一、酶原  有些酶在细胞内合成时,或初分泌时,没有催化活性,这种无活性状态的酶的前身物称为酶原(zymogen)。酶原向活性的酶转化的过程称为酶原的激活。酶原激活实际上是酶的活性中心形成或暴露的过程。  胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰糜蛋白酶、羧基肽酶、弹性蛋白酶在它们初分泌时都是以无活性的酶原形式存在

近年我国批准上市的“中国1类”新药(生物药篇)

  创新药物的研发,是使我国由医药大国走向医药强国的必由之路。国家无论是“863计划”、“973计划”、还是今天的“国家科技重大专项”,都对新药研发寄予了厚望并给予了多方面的鼓励支持,国内药企亦不负众望,共同肩负起新药创制的重任。经多年厚积薄发,一个个具有自主知识产权的新药产品诞生并成功上市,“中国

蛋白质与多肽提取分离方法1

1 分离方法采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析

蛋白质代谢的消化过程

  外源蛋白有抗原性,需降解为氨基酸才能被吸收利用。只有婴儿可直接吸收乳汁中的抗体。可分为以下两步:  1、胃中的消化:胃分泌的盐酸可使蛋白变性,容易消化,还可激活胃蛋白酶,保持其最适pH,并能杀菌。胃蛋白酶可自催化激活,分解蛋白产生蛋白胨。胃的消化作用很重要,但不是必须的,胃全切除的人仍可消化蛋白

关于蛋白质代谢的消化过程介绍

  外源蛋白有抗原性,需降解为氨基酸才能被吸收利用。只有婴儿可直接吸收乳汁中的抗体。可分为以下两步:  1、胃中的消化:胃分泌的盐酸可使蛋白变性,容易消化,还可激活胃蛋白酶,保持其最适pH,并能杀菌。胃蛋白酶可自催化激活,分解蛋白产生蛋白胨。胃的消化作用很重要,但不是必须的,胃全切除的人仍可消化蛋白

“指纹图谱”解开灵芝“密码”

    全球权威药学专业期刊《美国质谱学杂志》日前公布了中国科学院上海中药现代化研究中心一项最新研究成果:科学家们从上海绿谷集团的灵芝产品中分离鉴定出5 大类32种灵芝三萜,其中6种是首次发现的新活性物质。与此同时,绿谷集团自主研发的灵芝、丹参、枸杞等5大系列、10余种创新中药先后拿到12个国家的

中药指纹图谱的分类

狭义的中药指纹图谱是指中药化学(成分)指纹图谱,广义的中药指纹图谱则可按应用对象、测定手段进行不同的分类。 中药指纹图谱按测定手段可分为中药化学(成分)指纹图谱和中药生物指纹图谱。中药生物指纹图谱主要是测定各种中药材的DNA图谱,由于每个物种基因的唯一性和遗传性,中药材DNA指纹图谱可用于对中药材的

Promega在ASMS-2009上推出鉴定蛋白质的新途径

  Promega利用ProteaseMAX表面活性剂推出了一项创新简化的胶内酶切技术。该项技术给分析人员提供了以下几点好处:   节省时间:整个胶内酶切过程只需一个小时的时间   省去了萃取步骤:蛋白质分解和肽段回收一步完成。   更多的数据:该分解技术保持了原有肽段的信息。   

蛋白质胰蛋白酶磷酸肽图谱制定实验_从纤维平板上

验材料烧结的聚乙烯片TLC 平板(已分离过磷酸肽并经过放射自显影的)试剂、试剂盒电泳缓冲液仪器、耗材玻璃棒1000 μl(蓝色)移液器吸头单边剃刀刀片实验步骤实验材料、试剂、仪器耗材详见「其他」。1. 用锋利的刀片小心地切去蓝色吸头领圈的部分,细的吸口端也裁去约 3 mm。2. 用玻璃棒将一烧结的聚

蛋白质胰蛋白酶磷酸肽图谱制定实验——固相蛋白消化

试剂、试剂盒甲醇PVP-360(溶于乙酸)50 mmol L 碳酸氢铵pH 8.0仪器、耗材PVDF 膜/硝酸纤维素膜保鲜膜/聚酯薄膜实验步骤1. 用 SDS-PAGE 凝胶电泳分离 32P 标记的样品,用标准的湿式或半干式蛋白质转移方法将蛋白质转移到 PVDF 或硝酸纤维素膜上。2. 将膜晾干并用

葡甲胺

性状本品为白色结晶性粉末;几乎无臭。本品在水中易溶,在乙醇中略溶,在三氯甲烷中几乎不溶。熔点本品的熔点(通则0612)为128~132℃。比旋度取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.10g的溶液,在25℃时,依法测定(通则0621),比旋度为-15.5°至-17.5鉴别(1)取本

ST通葡拟募资5.4亿做葡萄酒主业重组绯闻主角入驻

  注资传闻不断的*ST通葡在停牌一周后抛出非公开增发方案。除了募投项目是做大葡萄酒主业外,此次的增发对象也是一大看点,此前重组传闻的主角洮儿河酒业此次将获配990万股。   ST通葡今日公告,拟以8.98元/股的价格向吉祥酒店、洮儿河公司以及唐嘉孺等6名自然人对象非公开发行6000万股,募集资金

连续监测法测肌酸激酶生化检验

肌酸激酶(CK)是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体,正常人体中有三种同工酶: CK~BB(CK1):主要存于脑组织、前列腺、肠、肺、膀胱、子宫、胎盘及甲状腺中; CK~MB(CK2):主要存于心肌; CK~MM(CK3):主要存于肌肉组织。 CK作用后生成的磷酸肌酸含高能医学教育网整理磷酸键,是

大鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA检测法

大鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 PKA 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 PKA与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠PKA,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strep

连续监测法测肌酸激酶生化检验

肌酸激酶(CK)是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体,正常人体中有三种同工酶:CK~BB(CK1):主要存于脑组织、前列腺、肠、肺、膀胱、子宫、胎盘及甲状腺中;CK~MB(CK2):主要存于心肌;CK~MM(CK3):主要存于肌肉组织。CK作用后生成的磷酸肌酸含高能医学教育网整理磷酸键,是肌肉收缩时

大鼠脑钠肽(BNP)ELISA检测法

大鼠脑钠肽(BNP)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 BNP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 BNP与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠BNP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加

狗脑钠肽(BNP)ELISA检测法

狗脑钠肽(BNP)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗狗 BNP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的BNP与单抗结合,加入生物素化的抗狗BNP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫

蛋白质的消化需要哪三种酶

它在胃里被酸解,在小肠中被彻底酶解并吸收。具体用到的酶很多,给你详细资料,答题的时候不用写酶原,就记住胰蛋白酶糜蛋白酶切短,氨基肽酶羧基肽酶切碎成氨基酸就好了。(1)胰蛋白酶原:胰液分泌的为无活性的胰蛋白酶原,需在胃酸、肠激酶的作用下,才能迅速转化为有活性的胰蛋白酶,同时胰蛋白酶又可自身激活,组织液

肠激酶的结构特点

天然肠激酶由1条结构亚基 (重链) 和1条催化弧基 (轻链) 构成, 两者通过1个分子间二硫键结合, 结构亚基负责将催化亚基固定在小肠刷状缘膜上并引导它向肠腔移动, 催化亚基可以特异性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列并沿序列的羧基端切下, 将胰蛋白酶原活化为胰蛋白酶, 从而启动各种酶原

关于肠激酶的结构特点介绍

  天然肠激酶由1条结构亚基 (重链) 和1条催化弧基 (轻链) 构成, 两者通过1个分子间二硫键结合, 结构亚基负责将催化亚基固定在小肠刷状缘膜上并引导它向肠腔移动, 催化亚基可以特异性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列并沿序列的羧基端切下, 将胰蛋白酶原活化为胰蛋白酶, 从而启动各种

肠激酶的结构特点

天然肠激酶由1条结构亚基 (重链) 和1条催化弧基 (轻链) 构成, 两者通过1个分子间二硫键结合, 结构亚基负责将催化亚基固定在小肠刷状缘膜上并引导它向肠腔移动, 催化亚基可以特异性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列并沿序列的羧基端切下, 将胰蛋白酶原活化为胰蛋白酶, 从而启动各种酶原