elife：细胞调控分泌蛋白磷酸化新机制
近日，美国加州大学圣地亚哥分校的研究人员在国际期刊elife在线发表了他们关于细胞通过分泌途径调控胞外蛋白磷酸化相关分子机制的最新研究进展。 研究人员指出，之前研究已经发现胞外存在大量磷酸化蛋白，但通过分泌途径发挥激酶活性的磷酸激酶直到最近才被发现，目前对此类磷酸激酶调控作用的相关研究仍较少。Fam20C是位于高尔基体上的一种酪蛋白激酶，能够对多种分泌蛋白进行磷酸化并且对适当的生物矿化作用至关重要。 Fam20A是Fam20C的一种类似物，在釉质形成过程中发挥重要作用，但Fam20A的生化功能仍不清楚。研究人员发现Fam20A能够增强Fam20C的激酶活性，促进釉基质蛋白的磷酸化。Fam20A是一种假激酶，能够与Fam20C形成功能性复合物，这种复合物会通过分泌途径增强胞外蛋白磷酸化。 这项研究揭示了Fam20C与Fam20A协同调控釉质形成的分子机制，并为通过分泌途径调控胞外蛋白磷酸化相关研究提供了重要启示。......阅读全文
DNA结合蛋白的磷酸化研究
磷酸化化学计量的确定及磷蛋白形成动力学的测定l 磷酸化作用化学计量的确定1．在冰上建立下列反应混合液：Tris-HCl（50mmol/L；pH8.0）/MgCl2（10mmol/L） 250μlATP（10mmol/L）
磷酸化蛋白质组学研究获进展
中科院大连化物所生物技术部1809组封顺、叶明亮、邹汉法等人关于新型金属离子固定化亲和色谱固定相应用于磷酸化蛋白质组学的研究成果(Immobilized Zirconium Ion Affinity Chromatography for Specific Enrichment of Phosphop
蛋白质磷酸化研究的相关方法节选
对于信号转导科研来说，抗酪氨酸磷酸化抗体的出现是一个意义重大的事件。在没有抗酪氨酸磷酸化抗体之前，蛋白质和酶的酪氨酸磷酸化只能通过非常危险的并且很费时的放射性实验来检测。而利用抗酪氨酸磷酸化抗体，则可以通过Western Blot或其它免疫学方法轻松地检测到磷酸化信号。常规的检测方法包括：用抗酪
利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化实验
实验材料 异丙基 β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒 非变性裂解液非变性洗涤液非变性洗脱液苯甲基磺酰氟仪器、耗材 超声匀浆器聚丙烯柱实验步骤 3.1 非变性条件下重组激酶的纯化用于磷酸化筛选的激酶必须是可溶和有活性的，且无其他激酶参杂的纯化激酶。因此，我们可以从 cDNA 表达文库中，大量生产和纯
利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化实验
实验材料异丙基 β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒非变性裂解液非变性洗涤液非变性洗脱液苯甲基磺酰氟仪器、耗材超声匀浆器聚丙烯柱实验步骤3.1 非变性条件下重组激酶的纯化用于磷酸化筛选的激酶必须是可溶和有活性的，且无其他激酶参杂的纯化激酶。因此，我们可以从 cDNA 表达文库中，大量生产和纯化组氨酸标记
利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化实验
实验材料：异丙基 β-D-硫代半乳糖苷 试剂、试剂盒：非变性裂解液 非变性洗涤液
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料测序级膜蛋白酶 试剂、试剂盒二硫苏糖醇 碘代乙酰
蛋白质磷酸化
Tyrosine Kinase Assay Using Synthetic Peptides (T. Miller)Small synthetic peptide substrates are especially well suited for applications such as assay
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤这里所述的方法概括为下列几个步骤：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质（见 24. 3.1 )；固相金属螯合亲和层析（IMAC) 富集磷酸肽（见 24. 3. 2 )；用串联质谱对磷酸
磷酸化蛋白鉴定实验
实验材料 测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒 二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材 螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤 这里所述的方法概括为下列几个步骤：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质（见 24. 3.1 )；固相金属螯合亲和层析（IMAC) 富集磷酸肽（见 24. 3. 2 )；用串