10月12日,国际学术期刊Nature Communications 在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所国家蛋白质科学中心(上海)吴立刚研究组的最新研究成果:Ribozyme-enhanced single-stranded Ago2-processed interfering RNA triggers efficient gene silencing with fewer off-target effects,该成果发明了一种较传统shRNA(short hairpin RNA)更为安全的高效RNA干扰(RNAi)载体——saiRNA。 RNAi是由siRNA介导的特异性降解具有互补序列的RNA,从而在转录后水平沉默靶基因表达的现象。RNAi在真核生物进化中高度保守,目前已被广泛应用于基因功能的研究,并可开发成为小核酸药物直接用于疾病治疗,近期已有几十种siRNA药物进入一期或二期临床试验,......阅读全文
干细胞是人体内一种尚未分化的细胞,可定向分化成为多种人体组织。利用干细胞,科学家们定向培养出了心脏、肺部、胃等人体组织,近日,这项技术又被应用到视网膜的再生之中。 我们身体的很多组织(如皮肤)在遭受损伤后会自愈,这是
12月,首先是Braod研究院的研究人员在CRISPR–Cpf1的基础上打造了一个多重化基因编辑系统,其后,来自中科院动物所的研究人员也在CART细胞中实现多基因编辑。这两项成果分别公布在Science和Cell Research杂志上。 CRISPRs和CRISPR相关蛋白(Cas)蛋白的新
一、受体细胞 :受体细胞的选择是否合适将关系到能否表达,特别是高效表达。首先要注意不同的表达载体与受体细胞的关系,即原核表达载体适合原核细胞,真核载体则适合真核细胞,而农杆菌仅适用于植物细胞。即使大肠杆菌质粒,也应注意选择合适的菌种。例如,当用含有T7 噬菌体启动子的载体表达外源基因时,由于T7
报告基因(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,其表达产物非常容易被鉴定。把它的编码序列和基因调节序列相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。作为报告基因必须具备的条件:(1)全序列已测定(2)表达产物在手提细胞中不存在,即无背景,
由于腺病毒易于培养、纯化,宿主范围广,故采用该类病毒构建的载体被广泛应用腺病毒载体的构建依赖于腺病毒穿梭质粒和包装载体之间的同源重组。但是哺乳动物细胞内的这种同源重组效率很低,利用细菌内同源重组法构建重组体效率会大大提高,即将外源基因插入到腺病毒穿梭质粒中,形成转移质粒,将其线性化后与腺病毒包装质粒
生物的遗传物质基础是核酸(nucleic acid),它也是基因的基本结构,它们的化学组成分子结构符合遗传物质的稳定性、连续性及多样性的要求。 (一)核酸的化学组成 核酸结构的基本单位是核苷酸(nucleic acid),每个核苷酸由1个磷酸、1个五碳糖和1个碱基3部分组成。核
脂肪酸在人类健康和疾病中扮演着关键角色,但是近年来科学家对于不同的脂肪酸对机体的益处和坏处始终争论不断。为此,小编为大家盘点了关于脂肪酸对机体健康影响的最新研究进展,帮助大家一起了解脂肪酸对人体健康的诸多影响! 【1】Science:揭示短链脂肪酸触发植物对细菌的免疫反应 DOI:10.11
BRGSF小鼠:重度免疫缺陷小鼠免疫缺陷小鼠的发展史免疫缺陷小鼠是指免疫系统上一种或者多种免疫成分(比如T、B、NK细胞)存在缺陷/缺失的小鼠。这种小鼠被广泛应用于肿瘤学(比如肿瘤生长、转移、抗肿瘤药物筛选)、免疫学(比如免疫细胞发育增殖机制、免疫疾病发生机理)、传染病学(比如病毒/细菌性传染病致病
DNA,RNA和蛋白质是三种重要的生物大分子,是生命现象的分子基础。基因组DNA中的基因通过转录为mRNA并进一步翻译为蛋白质,很多种类的蛋白质在最终发挥功能时又经历磷酸化、糖基化、酶原激活等翻译后修饰。DNA的遗传信息决定生命的主要性状,而mRNA在信息传递中起很重要的作用。其它两大类RNA,rR
作为后基因组时代出现的新兴研究领域之一, 蛋白质组学(proteomics)正受到越来越多的关注。 蛋白质组学的研究目标是对机体或细胞的所有蛋白质进行鉴定和结构功能分析。 蛋白质组学的研究不局限任何特定的方法。 高分辨率的蛋白质分离技术如二维凝胶电泳和高效液相层析, 经典的蛋白质鉴定方法如氨
作为后基因组时代出现的新兴研究领域之一, 蛋白质组学(proteomics)正受到越来越多的关注。 蛋白质组学的研究目标是对机体或细胞的所有蛋白质进行鉴定和结构功能分析。 蛋白质组学的研究不局限任何特定的方法。 高分辨率的蛋白质分离技术如二维凝胶电泳和高效液相
最近由于RNA干扰(RNA interference,RNAi)的发现使反义领域的研究增多。这种自然发生的现象最早是在秀丽线虫中发现的(1),是序列特异性地使转录后的基因沉默的有力机制。由于最近两年在RNAi领域取得的进步,已经有许多这方面的综述发表(2-4)。RNA干扰是由长的双链 RNA
Rnai最近由于RNA 干扰(RNA interference,RNA i)的发现使反义领域的研究增多。这种自然发生的现象最早是在秀丽线虫中发现的(1),是序列特异性地使转录后的基因沉默的有力机制。由于最近两年在 RNA i领域取得的进步,已经有许多这方面的综述发表(2-4)。RNA 干扰是
本文中,小编整理了多篇研究成果,共同聚焦科学家们在肿瘤抑制因子p53研究中取得的新成果,分享给大家!图片来源:NIH 【1】Cell Rep:揭示p53突变在癌症中的新模式和新功能 doi:10.1016/j.celrep.2019.07.001 TP53是研究最广泛的癌症基因之一,以其抑
在病毒感染晚期,由于大量外源蛋白的表达引起昆虫细胞的裂解,胞质内的物质释放出来,与 目的蛋白混在一起,从而使蛋白的纯化工作变得很困难,另外水解酶的释放会降解重组蛋白。为了克服以上这些困难,科学工作者先后尝试用丝蛾肌动蛋白基因启动子或杆状病毒ie-1基因启动子表达外源蛋白,但效果都不明显。Farr
从进化的角度讲,酵母与制作止痛剂可谓风马牛不相及。但是通过对这种微生物的基因重新进行编辑,美国斯坦福大学科学家Christina Smolke使其精确地拥有了这一功能,Smolke团队用糖作为一种原料,将酵母转变成了一个“生物工厂”,生产出了有效的止痛剂氢可酮。 这是合成生物学的有名案例之一。
自上世纪70年代基因工程技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今日已取得令人瞩目的成就 。随着人类基因组计划的完成,越来越多的基因被发现,其中多数基因功能不明。利用表达系统在哺乳动物细胞内表达目的基因是研究基
类基因组中仅有1.5%~2.0%编码蛋白的基因得以稳定转录,而剩余的绝大多数RNA无编码蛋白的功能。长链非编码RNA(lncRNA)是一类异质性的非编码RNA,根据lncRNA的功能,可将其分为信号分子、诱饵分子、引导分子和骨架分子4类。人们以往仅将这些不具编码功能的RNA视为进化过程中产生的废
一位澳大利亚科学家日前宣布他对法医DNA检测技术做了改进,通过检测单一细胞就能识别出个体。 Scotsman Ian Findlay是澳大利亚昆士兰大学基因组研究所的一名研究人员,他表示这个新检测技术的准确度相当于当前DNA检测方法检查200到500个细胞所达到的准确度。 “我们
通过测定转染细胞的报告基因表达,如β-gal或CAT,可以确定导人的DNA是否已被整合到宿主细胞主要用于(1)测定基因表达(2)基因整合评价(3)细胞的调控。来源于《动物细胞培养:基础技术指南(第五版)》实验方法原理氯霉素乙酰转移酶报告基因(chloramphenicol acetyltransfe
【原理】RNA沉默是发生在植物(转录后基因沉默或共抑制)、动物(RNA干扰,RNAi)和真菌(消除作用)等真核生物细胞中的的特异性和高效率的mRNA降解机制。在哺乳动物细胞中,RNAi通常用于阻断特定基因的表达从而研究基因的功能。将靶向特定基因的大约21碱基长短的双链siRNAs(smallinte
实验概要本文介绍了iRNA干扰GFP表达实验的原理及方法步骤。实验原理RNA沉默是发生在植物(转录后基因沉默或共抑制)、动物(RNA干扰,RNAi)和真菌(消除作用)等真核生物细胞中的的特异性和高效率的mRNA降解机制。在哺乳动物细胞中,RNAi通常用于阻断特定基因的表达从而研究基因的功能。将靶向特
通过外源DNA的重组、克隆、以及鉴定,可以获得所需的特异DNA克隆。外源克隆基因在某种表达载体及适宜的宿主细胞中可表达为相应的蛋白质,这就组成了外源基因的蛋白表达系统。表达后的蛋白质必须具有原来的生物学活性,这是基于正确的基因转录、转录后加工、mRNA翻译及翻译后修饰,同时与表达载体的结构和表达体系
1.2 RNAi的作用特点 (1)“共抑制”性。RNAi是双链RNA介导的转录后基因沉默机制,它的启动子相当活跃,外源基因可以转录,但不能正常积累mRNA;RNAi作用不仅使外源基因在转录后水平上失活,同时诱导与其同源的内源基因沉默。 (2) 高效性。试验证明双链RNA干扰m
四、基因诊断与基因治疗 基因克隆和基因分析的手段得到与人类疾病有关的基因异常变化、以及致病微生物基因结构方面的知识,就可能用检测和分析基因的方法去诊断疾病。对与疾病相关的基因及其调控了解,就有可能导入外源目的基因去纠正基因缺陷或改变基因表达调控以期达到治疗疾病的目的。这些都是分子生物
马上就要过年了,吃货的春天又将来临,想必大家都已经准备好了上好的食材,时刻准备着磨刀嚯嚯向猪羊。或与家人团圆欢聚,或与朋友把酒言欢,或畅谈发小一吐不快,或智斗姑姨险避相亲,但是都逃不开一个字儿:吃!那么问题就来了:怎么海吃海喝才能不长肉呢?我们来看看达尔文怎么说:物竞天择,适者生存!这是什么意思
过去100年发生的多起事件让世人密切关注未来发生传染病大流行的风险。2018年是1918年流感流行的100周年,估计有数千万人死于100年前那次流感。现在拥有比一个世纪前更好的干预措施,季节性流感疫苗,但不一定完全有效预防。每年需要接种或选择接种的人所占比例较小。世界上还有抗生素可以帮助治疗细菌
现代分子生物学和免疫学的进展加深了我们对许多疾病的了解,并且导致了免疫新策略的产生,免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。本文盘点了与免疫学有关的分子生物学实验技术汇总。 一、GST pull-down实验 GST是指谷胱甘肽巯基转移酶,GST pull-down实验是一个行之有效的验
利用两种互补的分析方法,Whitehead研究所和麻省理工学院-哈佛大学Broad研究所的科学家们,第一次在人类基因组中鉴别出了人类细胞系或培养人类细胞生存及增殖必需的基因宇宙。 他们的研究结果和在该研究中开发出的材料,不仅为全球科研团体提供了宝贵的资源,还可应用于发现各种人类癌症药物可靶向的
人为什么会变老?对于人类来说,如何才能长生不老真的是一个令人着迷的问题。但是至今为止都没有一个让人满意的答案。衰老一直是生命过程中的核心环节,也是影响整个人类社会健康发展的重要问题。目前世界各国均面临着严重的人口老龄化,数据显示到2050年约三分之一的中国人口年龄将超过60岁。因此,深入了解衰老