核酸电泳的指示剂与染色剂

指示剂 核酸电泳常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色.溴酚兰在碱性液体中 呈紫兰色,在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中,溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同.二甲苯青的水溶液呈兰色,它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳时,其迁移速率分别与2Kb和1.6Kb的双链线性DNA大致相似. 指示剂一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成载样缓冲液.载样缓冲液的作用有①增加样 品密度,使其比重增加,以确保DNA均匀沉入加样孔内.②在电泳中形成肉眼可见的指 示带,可预测核酸电泳的速度和位置.③使样品呈色,使加样操作更方便. 染色剂 核酸电泳后,需经染色后才能显现出带型,最常用的是溴化乙锭染色法,其 次是银染色. 溴化乙锭(ethidium bromide,EB)是一种荧光染料,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对 之间,在紫外线激发下,发出红色荧光.根据情况可在凝胶电泳液中......阅读全文

核酸电泳的指示剂与染色剂

  指示剂   核酸电泳常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色.溴酚兰在碱性液体中 呈紫兰色,在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中,溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同.二甲苯青的水溶液呈兰色,它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳时,

核酸电泳的指示剂与染色剂

  指示剂    核酸电泳常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色.溴酚兰在碱性液体中 呈紫兰色,在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中,溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同.二甲苯青的水溶液呈兰色,它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳

核酸电泳指示剂和染色剂的选择

指示剂:核酸电泳常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色.溴酚兰在碱性液体中 呈紫兰色,在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中,溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA段大致相同.二甲苯青的水溶液呈兰色,它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳时

色素试剂指示剂、显色剂和染色剂

在化学试剂中,把带有颜色或可改变颜色的一类试剂统称为色素试剂,它包括了指示剂、显色剂和染色剂。酸 碱指示剂是遇到酸、碱能改变试剂颜色的指示剂,主要用来指示溶液的 PH 值,指示酸碱滴定的终点,如:甲基橙、酚酞、甲基红等。这些酸碱指示剂也是一种染料,但一般染料并不能直接作为酸碱指示剂,一般要进行提

GelRedTM核酸凝胶染色剂操作步骤

贮存和处置方法:    GelRed 10,000X in DMSO可在室温条件下储存一年以上。尽管并非必须,GelRed 依旧可以在低温、避光环境下长时间贮存。但在正常的室内光照实验条件下,该染色剂可以安全操作。应用:    GelRed 是一种具有凝胶染色特性,并被设计为替换高毒性染色剂-

核酸电泳实验

琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶EB(德元国际Cat# LY5009)染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外

核酸电泳(RNA电泳与DNA电泳)

(一)DNA的凝胶电泳:凝胶电泳是分子克隆的中心技术之一。琼脂糖凝胶用于分离大于200~1000bp的片段;操作简单、快速,且分离范围广,分辨率高。2.聚丙烯酰胺凝胶用于分离5-500bp的片段; 效果好、分辨率极高,相差1bp的DNA片断就能分开,能容纳相对大量的DNA ,用于核苷酸多态性的分析。

PCR扩增产物的电泳分析

凝胶电泳分琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种。一、琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物。根据琼脂糖的溶解温度,把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖。低熔点琼脂糖熔点为62~65℃,溶解后在 37℃下维持液体状态约数小

PCR扩增产物的电泳分析1

凝胶电泳分琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种。一、琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物。根据琼脂糖的溶解温度,把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖。低熔点琼脂糖熔点为62~65℃,溶解后在 37℃下维持液体状态约

核酸凝胶电泳2

二、核酸电泳的指示剂与染色剂【指示剂】电泳过程中,常使用一种有颜色的标记物以指示样品的迁移过程,核酸电泳常用的指示剂有两种:溴酚兰,呈蓝紫色;二甲苯青,呈蓝色。溴酚蓝分子量为670道尔顿,在不同溶液凝胶中,迁移速度基本相同,其分子筛效应小,近似自由电泳。在0.6%、1%、2%的琼脂糖凝胶电泳中,溴酚

核酸电泳仪类型

核酸电泳仪类型有多种。1、按分离目的可分:实验室核酸电泳仪和工业核酸电泳仪。2、按分离装置可分:核酸毛细管电泳仪和核酸芯片电泳仪等。3、按分离规模可分:微型核酸电泳仪、小型核酸电泳仪和大型核酸电泳仪。4、按分离装置数量可分:核酸一维电泳仪和核酸阵列电泳仪等。5、按灵敏性可分:微量核酸电泳仪和痕量核酸

核酸凝胶电泳4

5、室温下聚合至少30min,若聚合完全,梳齿下可见二条折光线,小心拔出梳子,用水冲洗样品孔。6、在电泳槽中加入1×TBE缓冲液,使缓冲液覆盖样品孔,并用缓冲液稍淋洗样品孔。7、加上1/6体积6×上样缓冲液与DNA样品及DNA分子量标准液中混合,用微量进样器吸取,小心快速地加入加样孔中(一般加样量3

核酸凝胶电泳3

3、电泳:电压<10V/cm,电泳至溴酚兰移出样品槽到凝胶板的2/3距离时,关闭电源。4、取出凝胶块,置紫外透射反射分析仪上观察,即可见桔红的DNA区带。【注意事项】1、加样时枪头不要碰坏孔壁,否则DNA带型不整齐。大多情况下,加样时不必更换枪头,可在阴极槽中反复吸打电泳缓冲液清洗,但对Southe

核酸凝胶电泳1

核酸是带均匀负电荷的分子,在电场中向正极移动,不同大小和构象的核酸分子的电荷密度大致相同,在自由泳动时,各核酸分子的迁移率区别很小,难以分开。以适当浓度的凝胶介质作为电泳支持介质,具有分子筛效应,使得分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大差异,达到分离的目的。此为分离、鉴定、纯化核酸片段的标准方

核酸的电泳与检测

【实验目的】(1)了解核酸琼脂糖凝胶电泳的原理,学会其具体的操作程序。(2)对提取的DNA进行检测,掌握紫外电泳图谱的观察分析方法。【实验原理】琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。带电荷的物质在电场中的定向运动称为电泳,核酸分子是两性解离分子,在pH8.0时,DNA

核酸电泳仪类型

 核酸电泳仪类型有多种。1、按分离目的可分:实验室核酸电泳仪和工业核酸电泳仪。2、按分离装置可分:核酸毛细管电泳仪和核酸芯片电泳仪等。3、按分离规模可分:微型核酸电泳仪、小型核酸电泳仪和大型核酸电泳仪。4、按分离装置数量可分:核酸一维电泳仪和核酸阵列电泳仪等。5、按灵敏性可分:微量核酸电泳仪和痕量核

PCR技术(九):PCR扩增产物的电泳分析

凝胶电泳分琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种.一、琼脂糖凝胶电泳:  琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和 鉴定核酸的方法.琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物.根据琼脂糖的溶解温度, 把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖.低熔点琼脂糖熔点为62~65℃,溶解后在 37℃下维持液体

核酸蛋白转移电泳及杂交

一、DNA Southern Blot及杂交 本技术可用于基因组DNA特定序列定位,尤其可分析某些基因的限制性内切酶长度多态性,对遗传性疾病的早期基因诊断、产前诊断或基因变异等方面的研究有应用价值,其过程包括:样品DNA内切酶水解、水解片断的琼脂糖凝胶电泳分离、分离后水解片断的转移(固定)、特异性D

琼脂糖核酸电泳实验

琼脂糖核酸电泳实验1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架 好梳子;2.根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确 称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般20~30 ml);3.放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加

简要介绍核酸电泳的原理

 带电荷的物质在电厂中趋向运动称为电泳,核酸电泳通常在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行,核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可缺少的组成部分。那么核酸电泳的原理是什么呢,下面我就就来说一下。核酸电泳的原理:1.核酸分子中糖-磷酸骨架中的磷酸基团,呈负离子化状态;核酸分子在一定的电场强度的电场中,他

DNA琼脂糖核酸电泳

核酸电泳是进行核酸研究的重要手段,可以用于:(1)核酸探针;(2)核酸扩增;(3)序列分析等技术。实验方法原理带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。核酸电泳是进行核酸研究的重要手段,是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可或缺的组成部分。核酸电泳通常 在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行,浓度不同

DNA琼脂糖核酸电泳

            实验方法原理 带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。核酸电泳是进行核酸研究的重要手段,是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可或缺的组成部分。核酸电泳通常 在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行,浓度不同的琼脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子筛网

DNA琼脂糖核酸电泳

1. 用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架好梳子;2. 根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般20~30 ml) ;3. 放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加入一滴荧光染料

核酸电泳的步骤方法介绍

 核酸电泳是进行核算研究的重要手段,常用于和琼脂糖凝胶聚丙烯酰胺凝胶两种,凝胶电泳操作简单,是分离鉴定和纯化核算的一种常用方法,那么核酸电泳的步骤有哪些的呢?琼脂糖凝胶电泳的步骤:用透明胶将玻璃板或电泳装置所配备的塑料盘的边缘圈封,制成胶模,置水平工作台上;(2) 称取适量琼脂糖,置电泳缓冲液中,加

琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量

一.原理带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。其中,凝胶电泳由于其操作简便、快速、灵敏等优点,使它成为分离、鉴定和提纯核酸的首选标准方法。与蛋白质分子类似,核酸分子也是两性解离分子。在pH3.5时,碱基上的氨基基团解离,而三个磷酸基团中只有第一个磷酸解离,整个分子带正电荷,在电场中向负极泳动;在p

核酸凝胶电泳观察法

实验原理:琼脂糖是海藻中提取的线状高聚物,不同浓度的琼脂糖密度不同,一般PCR产物使用2%浓度,0.5Kb-10Kb的DNA使用1%浓度,基因组DNA使用0.3%-0.7%浓度;不同大小的核酸在同一浓度的凝胶中迁移率不同,因为分子越大其受琼脂糖的阻力越大,迁移率与碱基对的对数值成反比;同分子量不同构

核酸凝胶电泳染料的选择

凝胶电泳是我们最基本的分子实验。其基本原理是电泳分子在电场作用下移动,因此它同电场的强度、电泳分子本身所带的净电荷数成正比。由于在电泳中使用了无反应活性的稳定的支持介质,从而降低了对流运动,故电泳的迁移率又同分子的摩擦系数成反比的。目前实验室中最常用的琼脂糖凝胶电泳染料有EB、GeneFinderT

PCR扩增产物的电泳分析2

2)染色剂:核酸电泳后,需经染色后才能显现出带型,最常用的是溴化乙锭染色法,其次是银染色。溴化乙锭(ethidium bromide,EB)是一种荧光染料,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下,发出红色荧光。根据情况可在凝胶电泳液中加入终浓度为 0.5ug/ml的EB,有时亦可

核酸凝胶电泳染料该如何选择?

凝胶电泳是我们基本的分子实验。其基本原理是电泳分子在电场作用下移动,因此它同电场的强度、电泳分子本身所带的净电荷数成正比。由于在电泳中使用了无反应活性的稳定的支持介质,从而降低了对流运动,故电泳的迁移率又同分子的摩擦系数成反比的。目前实验室中常用的琼脂糖凝胶电泳染料有EB、GeneFinder

琼脂糖核酸电泳标准实验步骤

琼脂糖核酸电泳1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架好梳子;2.根据欲分离DNA片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般20~30 ml);3.放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加入一滴荧光染