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《Cell》子刊:逆转蛋白质聚集的天然细胞机制

你在平底锅里打一颗鸡蛋,只需几分钟蛋清就会从透明的粘液状态变成富有弹性的白色固体,蛋黄也慢慢变硬,一系列生理和化学变化导致鸡蛋内化学键断裂、蛋白质发生聚集和重塑,你得到了一颗不可逆的固态煎蛋。 从生鸡蛋到熟煎蛋容易,但是,从熟煎蛋到生鸡蛋却不可逆。特拉维夫大学(Tel Aviv University,TAU)的科学家发现了细胞打破“人类常识”的隐秘细胞途径。利用自然机制逆转蛋白质聚集,能对患病细胞产生积极生理影响,比如治愈阿尔兹海默症、帕金森和疯牛病。 TAU分子细胞生物学和生物技术学院的Martin Kupiec教授和Kobi Simpson-Lavy博士领导的研究团队在《Molecular Cell》发表最新文章。 “大部分细胞功能的执行者是蛋白质,如果蛋白质聚集成‘斑点(blob)’,它们就会失活,”Kupiec教授说。“随着年龄增长,蛋白质聚集倾向增加,各种各样的疾病也随之而来,例如神经退行性疾病。” “此外......阅读全文

免疫共沉淀实验方法

免疫共沉淀(co-immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质x

全新合成蛋白质只对癌细胞下手

  对于癌细胞的特异性鉴定和消融,是医学研究中长期存在的问题,直至目前也尚未完全被解决。癌细胞为什么如此难以被攻克?原因可以归结于它们不受控制的增殖和存活能力。目前,用于癌症治疗的靶向药物能够及时抑制癌细胞信号传导,但这些药物也会受到毒副作用的限制,可能对癌症患者造成多重伤害。Michael Z.

研究蛋白质与DNA相互作用的主要方法

  一、引言   在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用的问题。   重组DNA技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因。现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性。为此需要:   a、鉴定分析

大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入实验

氨基酸类似物的掺入越来越有用。非天然氨基酸的定点掺入,使得运用化学生物学对特定蛋白质的研究和应用成为可能。但是,非天然氨基酸的整体掺入也检验着蛋白质组和基因编码假定。例如,有机体对非天然氨基酸的适应可能会导致新的基因编码。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。实

Cell:热休克诱发细胞内蛋白质聚集的分子机理

  当细胞暴露于较高非致死性的温度下时,细胞内的蛋白质聚集体就会形成,这似乎是对压力产生反应的一种表现形式,但损伤蛋白的积累似乎并不会在形成过程中被破坏;近日刊登在国际杂志Cell上的一项研究论文中,来自芝加哥大学和哈佛大学的研究人员通过研究发现,当细胞回归到正常温度下时,这种蛋白聚集可以被完全逆转

研究蛋白质与DNA相互作用的主要方法

一、引言在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用的问题。重组DNA技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因。现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性。为此需要:a、鉴定分析参与基因表达调控的DNA元件

Nature发布突破性蛋白质新技术

  斯克里普斯研究所(TSRI)的科学家们开发出了一种强大的新方法来寻找结合特定蛋白质的候选药物。  发表在本周《自然》(Nature)杂志上的这种新方法是一个重大的进展,它可以同时应用于大量的蛋白质,甚至直接应用于自然细胞环境中成千上万不同的蛋白质。一些小分子可以用来确定它们靶蛋白的功能,并可充当

蛋白质(十四)食物含量

食物含量含蛋白质多的食物包括:蛋白质牲畜的奶,如牛奶、羊奶、马奶等;畜肉,如牛、羊、猪肉等;禽肉,如鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鸵鸟等;蛋类,如鸡蛋、鸭蛋、鹌鹑蛋等及鱼、虾、蟹等;还有大豆类,包括黄豆、大青豆和黑豆等,其中以黄豆的营养价值最高,它是婴幼儿食品中优质的蛋白质来源;此外像芝麻、瓜子、核桃、杏仁、松

免疫共沉淀(Co-IP)

            实验方法原理 以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整

免疫共沉淀(Co-IP)

实验方法原理 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如

渗透细胞蛋白磷酸化实验

基本方案 带分析 备择方案1 制备用于SDS-PAGE的天然细胞样品 备择方案2 制备用于等电聚焦的天然细胞样品            

RNAi的机理与应用

  RNAi 技术的机理与应用   关于 RNAi 技术   RNA 干扰(RNA interference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链 RNA( double-stranded RNA,dsRNA) 诱发的、同源 mRNA 高效特异性降解的现象。   RNAi 受到追捧的

几种蛋白表达系统优缺点分析

  蛋白表达是指用模式生物如细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术。蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系,通过这个体系可以实现外源基因在宿主中表达的目的。   1、宿主。表达蛋白的生物体。可以为细菌、酵母、植物细胞、动物细胞等。由于各种生物的特性

几种蛋白表达系统优缺点分析

蛋白表达是指用模式生物如细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术。蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系,通过这个体系可以实现外源基因在宿主中表达的目的。1、宿主。表达蛋白的生物体。可以为细菌、酵母、植物细胞、动物细胞等。由于各种生物的特性不同,适合表

RNAi的机理与应用(一)

关于 RNAi 技术 RNA 干扰(RNA interference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链 RNA( double-stranded RNA,dsRNA) 诱发的、同源 mRNA 高效特异性降解的现象。RNAi 受到追捧的原因主要有两个方面,一方面, RNAi 可以说是基

打破CAR-T疗法副作用魔咒 中国科学家首次解密CRS发生机制

  嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法通过对肿瘤杀伤性T细胞进行基因工程化改造,使其能够特异性靶向结合肿瘤细胞表面抗原,提升肿瘤细胞清除效果。CAR-T疗法的发展日新月异,在抗B细胞恶性肿瘤的临床应用方面取得了成功。尽管如此,细胞因子释放综合征(CRS)作为CAR-T疗法的一个常见急性副作用,大大

全新光学显微成像技术帮科学家看到活细胞蛋白质

   这些技术为研究人员插上前进的翅膀。  荧光标签和光片成像相结合,产生超分辨率图像。图片来源:Wesley R. Legant  生物物理学家Joerg Bewersdorf说,2006年是荧光显微镜学的奇迹之年。而与之相媲美的另一个年份是1905年,当时爱因斯坦以相对论、量子论和原子物理学变革

分子生物学常用实验技术(page 1)

第一章质粒DNA 的分离、纯化和鉴定 第二章DNA 酶切及凝胶电泳 第三章大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重组质粒的连接、转化及筛选 第六章基因组DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技术 第八章聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆 第九章分

DNA重组(DNA recombination)技术:外源基因的蛋白表达-2

2.包涵体的分离与纯化细胞破碎时提取细胞内产物的关键。对于细菌的裂解常用的有酶溶法、超声破碎法、化学渗透法、玻璃珠研磨等。包涵体可通过超声波、匀浆等常规的方法是菌体破碎后,离心就可得到。密度梯度离心后可得到高纯度的包涵体。包涵体一般不溶于水,为了获得可溶性的蛋白质可加入强蛋白质变性剂后使其溶解。一般

邹鹏/王建斌合作发展空间特异性RNA标记技术

  真核细胞转录组在三维空间中的分布特征对于基因表达具有重要调节作用。在记忆形成、胚胎发育、细胞增殖等一系列生理学过程中,细胞通过将特定RNA分子选择性富集在亚细胞区域,能够实现对蛋白质翻译过程的精准调控,或帮助建立和维持染色体三维结构。因此,发展一种能在转录组层面解析细胞中RNA三维空间定位的方法

细胞电路开关划开生命的灵魂

  莱斯大学的科学家们开发了一种合成蛋白开关来控制细胞内的电子流。 这是一个概念验证,合成生物学家Joff Silberg的实验室让细胞在引入一种化学物质后,表达一种含金属的蛋白质,再被另一种化学物质在功能上激活。如此,当这些蛋白质被放入细胞,它们就可被简单地打开和关闭。  “这里的‘开关’并非隐喻

16亿美元!默沙东与Sutro合作开发癌症 免疫疾病治疗药物

  7月24日,Sutro Biopharma与Merck&Co以高达16亿美元的价格签署了一项合作和许可协议,旨在发现和开发针对癌症和自身免疫性疾病的新型免疫调节疗法。  Sutro的无细胞蛋白质合成技术与默克的免疫学和癌症专业技术相结合,Sutro将主要负责临床前研究,而默克将获得从合作中获得全

用于外源蛋白质生产的细菌表达系统

细菌表达系统有各种各样的载体和宿主菌可供选择,大部分工程菌的增殖时间短, 不仅便于快速评价实验结果,而且降低了技术和设备无菌要求的严格性。经过简单的调整, 许多在实验室规模下具有的这些内在优点在大规模的自动生产过程中也具有 。实验步骤一、使用大肠杆菌生产外源蛋白有越来越多的细菌表达系统可用于外源蛋白

用于外源蛋白质生产的细菌表达系统

            实验方法原理 实验步骤 一、使用大肠杆菌生产外源蛋白 有越来越多的细菌表达系统可用于外源蛋白的生产。影

Cell:科学家阐释天然无序蛋白质的研究进展

  截至目前为止研究人员并不清楚细胞中的蛋白“交通”如何运转地这么迅速,而且可以足够精确地抑制不必要分子的通过,近日,一项刊登在国际杂志Cell上的研究报道中,来自德国、法国和英国的研究人员解开了这个谜题。  在细胞中蛋白质可以识别其它的蛋白质,每一种蛋白质都会在一类特殊的蛋白质中从事特殊的工作,就

大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入实验

大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入             实验材料 大肠杆菌菌株 色

定量蛋白质组学方法分类介绍

  【蛋白研究系列专题】-4丨定量蛋白质组学方法,您值得拥有   1 背景和意义    从生命活动的直接执行者——蛋白质的角度研究生命现象和规律(特别是疾病防治和病理研究)已成为研究生命科学的主要手段。而这些研究往往离不开对细胞、组织或器官中含有蛋白质种类和表达量的研究。对处不同时期、不同条件下

真核细胞表达系统-3

由于腺病毒易于培养、纯化,宿主范围广,故采用该类病毒构建的载体被广泛应用腺病毒载体的构建依赖于腺病毒穿梭质粒和包装载体之间的同源重组。但是哺乳动物细胞内的这种同源重组效率很低,利用细菌内同源重组法构建重组体效率会大大提高,即将外源基因插入到腺病毒穿梭质粒中,形成转移质粒,将其线性化后与腺病毒包装质粒

真核细胞核糖体真的只有两种吗?

  一种名叫核糖体的细胞器可生产蛋白质。过去许多研究学者认为,核糖体之间不存在差别,任意一个核糖体能制造体内任何蛋白。6月15日一篇挑衅性文章表明,有一些核糖体只生产专门产品,其他蛋白质生产概不负责!  生物学家们争论不休,到底核糖体有没有“术业”分工?在这篇《Molecular Cell》文章发表

《自然》:临床重大发现,抗癌神药可将癌症死亡率降低34%

  上个世纪70年代,一名肿瘤医生报告了一位“奇怪”的病例。一位38岁的乳腺癌伴随骨转移患者,在确诊后,由于极度悲伤过度变成了重度酗酒者。医生为了让她好好的度过余下时光,停止了所有治疗,选择给她开了戒酒药。  然而,让医生倍感意外的是,这位患者在家该吃吃改喝喝,一直活了近10年,最后还是因为醉酒摔死