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荧光组化实验中的注意事项

1.每种荧光染料,均有自己的最适PH值,此时荧光最强。当pH改变时,不仅荧光强度减弱,而且波长将有所改变,因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。2.放荧光染色在20。C以下时荧光比较稳定,温度升高常出现温度猝灭。3.在荧光观察中,常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭,造成观察和照相困难。为此最好用能量小的长波长光进行观察,需照相时再适当增强激发光。4.一般荧光染液的浓度在万分之一以下,甚至亿万分之一,也能使标本着色。在一定的限度内,荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强,但超过限度,荧光强度反而下降,这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。......阅读全文

细胞介导细胞毒作用检测法:时间分辩荧光分析法

1)铕荧光检测法:标记靶细胞:1、EuCl3的制备:称取58.08mg Eu2O3,用少量1N HCl搅拌至溶解,再用1N NaOH调节pH至4.0。加双蒸水配成33~100mmol/L的保存液,4℃保存备用。2、用预冷的标记液将靶细胞浓度调整到5×106/ml,加50μl 10mg/ml硫酸葡聚糖

细胞介导细胞毒作用检测法4:时间分辩荧光分析法

时间分辩荧光分析法1)铕荧光检测法标记靶细胞1.EuCl3的制备:称取58.08mg Eu2O3,用少量1N HCl搅拌至溶解,再用1N NaOH调节pH至4.0。加双蒸水配成33~100mmol/L的保存液,4℃保存备用。2.用预冷的标记液将靶细胞浓度调整到5×106/ml,加50μl 10mg/

小鼠胚胎的长时间、6D活细胞观察

哺乳动物细胞胚胎植入发育和时间空间的变化协调是密不可分的,因此,对于这些发育过程的分析也必须是实时,动态而且3D的。我们过去经常使用的荧光蛋白表达技术,mRNA显微注射以及时相荧光显微观察使得活细胞成像成为了可能,但传统的荧光显微镜得到的数据却不能用来构建三维构象,这是由于荧光显微镜不能透过胚胎的厚

新成像系统有望将癌瘤“一网打尽”

  如果恶性肿瘤可以全部切除,癌症病人就有康复的可能。但一些肿瘤的体积很小,而且与健康组织相连,难以肉眼识别,往往成为“漏网之鱼”,一有机会就复发。德国科研人员推出一种新型成像系统,有望将微小的恶性肿瘤也“一网打尽”,大大提高癌症病人康复的几率。   德国弗劳恩霍夫制造技术与自动化研究所日前发表新

ClonePix技术快速筛选和开发高表达GPCR的哺乳细胞系(二)

ClonePix2系统成像和挑取表达GPCR(M1)的细胞克隆   ClonePix2 成像和挑取阳性(CHO-M1)和阴性(CHO-K1)细胞。明场成像识别每个克隆的位置和形态,荧光成像识别高表达的M1。对PE标记的抗体,使用Cy5通道曝光6,000ms。 无论是直接标记方法还是双抗体方

同比增长600% 达安基因公布2020年Q1财报

  4月15日讯 达安基因发布2020年Q1业绩预告,预计一季度净利为1.86亿元-2亿元,同比增长558%-608%。报告期内,受新型冠状病毒肺炎疫情影响,市场对新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测试剂盒及核酸检测仪器、相关耗材的需求量大幅度增长,对公司业绩产生了积极影响。  中山大学达安基

基因编辑领域再获突破 成功修复一种致命基因突变

   自20世纪初至今,短短百年之内,基因技术研究领域的高歌猛进,让人类与基因之间的关系发生了巨变。去年,首例基因编辑婴儿的问世引发了众多热议,但是抛开伦理问题,基因技术无疑在不断走向成熟。近日,宾夕法尼亚大学医学院和费城儿童医院在基因编辑领域再次取得突破,他们的研究团队成功修复了小鼠的一种致命基因

通过基因编辑技术对先天性肺部疾病进行缓解或治愈

   自20世纪初至今,短短百年之内,基因技术研究领域的高歌猛进,让人类与基因之间的关系发生了巨变。去年,首例基因编辑婴儿的问世引发了众多热议,但是抛开伦理问题,基因技术无疑在不断走向成熟。近日,宾夕法尼亚大学医学院和费城儿童医院在基因编辑领域再次取得突破,他们的研究团队成功修复了小鼠的一种致命基因

体视荧光显微镜MZ80安装全过程(一)

2009年广州明美成功研发国内第一款体视荧光显微镜,性能基本达到国外知名厂家的同等水平,但价格只有其一半左右,具有良好的性价比。明美工程师在这两年时间过程中不断的进行产品优化,该产品性能稳定并赢得众多客户的一致好评。体视荧光显微镜是活体动物体内荧光成像技术的核心技术。它主要广泛应用于生物医学、工业检

中国科研工作者对抗体试剂问题的反思

  2015年5月19日 Nature杂志从美国和加拿大几位资深科学家的亲身经历,深度阐述了目前抗体试剂的现状与问题,给全世界科研工作者敲响了警钟。身为中国科研工作者,我们遇到的抗体试剂问题只怕比国外同行来得更多,当下除了抱怨,我们更应深刻反思:如何才能获得高质量、合适的抗体试剂。  获得高质量、合

阿尔茨海默病患者的记忆或许并没有丢失 而是被“封印”了

  记忆丧失是阿尔茨海默病的主要症状之一。长期以来,人们认为聚集在大脑中的淀粉样蛋白斑破坏了那些储存记忆的神经元。但是,最近一项来自于哥伦比亚大学的研究却发现,阿尔茨海默病模型小鼠失去的记忆能够被重新唤起。这项颠覆传统观点的研究认为,阿尔茨海默病或许并不会损伤记忆本身,而是破坏了我们重新唤起记忆的能

手术导航系统在肿瘤治疗中应用

在众多的肿瘤治疗方案中,早期诊断和外科手术完全切除是最有效的方法之一,但肿瘤切缘的正确评估一直依赖于外科医生的经验和视觉判断,而传统方法极低的探测灵敏度和肿瘤病灶的不完全切除也一直困扰着外科医生,所以在实际的手术过程中,为了防止肿瘤细胞的残留和术后复发,只能人为的扩大肿瘤边缘并将其切除,即使如此每年

免疫组化技术典型实验案例学习-3

6、以上原因,都是针对实际中常见原因来进行分析的,前提是排除操作者的操作错误而引起阴性结果,这就需要新手还是要设置阳性对照以排除方法的问题。还有抗体稀释液的PH值过低等其它原因的干扰。总之,要想把免疫组化做好,可能每一个环节都很重要,但也存在主次之分,出现问题了,需要通过先排除主要的,再依次排除次要

流式细胞技术基本原理应用和发展趋势

流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术之一。光源、液流通路、信号检测传输和数据的分析系统是流式细胞仪的主要组成

表达谱芯片的介绍与应用

  基因表达谱芯片可使是科研工作者实现在MRNA水平上同时平行研究成百上千乃至上万条基因的表达关系。 它与传统的研究基因表达的方法(如差异cDNA文库筛选、Northern blot和PCR)相比较,可为使用者节省大量的研究经费和时间并获得范围更广、更具有关联性的研究结果。它的主要用途是用于大规模分

表达谱芯片的介绍与应用

基因表达谱芯片可使是科研工作者实现在MRNA水平上同时平行研究成百上千乃至上万条基因的表达关系。 它与传统的研究基因表达的方法(如差异cDNA文库筛选、Northern blot和PCR)相比较,可为使用者节省大量的研究经费和时间并获得范围更广、更具有关联性的研究结果。它的主要用途是用于大规

光学显微镜的原理与构造

随着科学技术的发展,显微镜检方法由最传统的明视野、暗视野发展出了相差法、偏光方法;荧光方法也由透射光激发进展为落射光激发,使荧光效率大为提高;微分干涉相衬方法基于偏光方法,而巧妙地利用了微分干涉棱镜,使之能应用于医学与生物学的样品,又能应用于金相样品的分析与检验。下面简单介绍万能显微镜的基本组成部件

《科学》:突破显微镜的局限 这套系统能看清体内基因表达

  今日,最新一期《科学》杂志上报道了一篇值得关注的论文。加州理工学院的一支团队开发出了一套全新的超声成像系统。它能够在活体动物中,让科学家们亲眼看到基因的表达。尽管这项技术目前还较为初步,但可以想象,一旦发展成熟,它将能给多种疾病的检测带来突破。  事实上,过去的科学家们早已开发出了许多检测基因表

著名学者两篇Nature子刊发布重要技术突破

  MIT著名学者Edward Boyden及其同事在Nature Methods和Nature Biotechnology同时发表了两篇重量级文章。他们对低价高能的膨胀显微技术(ExM)进行改良,解决了这一技术的主要难点。ExM现在只需使用现成的化合物,可以非常方便的成像大块组织,获得超高分辨率的

荧光串色问题

当对两种或两种以上荧光染料标记的样品进行成像时,最常见的问题就是荧光串色问题。例如,当用传统的绿色和红色荧光探针荧光素和罗丹明进行双标时,串色只有用最优的荧光滤色镜组才能降低,但绝不会完全去掉。这是因为这样一个事实:这些染料都有很宽的吸收和发射光谱,光谱之间有明显的重叠。因此,激发荧光素的氩离子激光

荧光检测技术及其配套软件Spectrum Manager的应用

在生命科学领域,随着科研水平和实验手段不断的提高,荧光染色方法以其特异性强,使用相对于放射性元素更安全,检测越来越灵敏等特点,受到越来越多的研究人员的认可,并且在实验室中广泛应用,成为经常性的实验方法。 检测荧光方法和手段根据不同的实验要求和目的也多种多样,使用最多的还是荧光显微镜,荧光酶标仪,流式

利用遗传学手段描绘果蝇化学连接组

  最近十年,在神经科学领域被科学家提到频率最高的词汇中,“神经环路”绝对榜上有名并且排名很靠前。有关神经环路的研究因为技术的进步而变得可解决(do-able), 也因此成为当下最热门, 最具活力的研究领域之一。  最早的神经环路研究,大概源于人们开始思考如何判定大脑怎样指导行为,产生意识。其中比较

免疫细胞化学常用试剂介绍-2

三、显色液  免疫细胞化学中,由于抗原-抗体反应所形成的复合物本身无色,无法直接观察,因而需借助于某些化学基团的呈色作用,使其得以显示,以利于在显微镜下观察。常用的显色液有:  1.DAB(Diaminobenzidine)显色液  DAB即3,3-二氨基苯联胺  试剂:DAB(常用四盐酸盐) 50

如何使用M5 多功能微孔板读板机和IMAP® 荧光偏振...(三)

结果SoftMax Pro软件中预置的IMAP 荧光偏振模板会自动计算出水平偏振均值和垂直偏振均值(mP值),总的荧光强度,标准方差和CV值。每一组试验样品的组群一栏中,模板会自动扣除背景样品的荧光偏振值,然后计算出最小偏振mP值。也可根据相应的校正曲线计算出样品磷酸化比率。(See IMA

南开校长暨最牛博导曹雪涛 40多篇文章竟存在造假嫌疑!

  曹院士有多牛!这里我们就不过多介绍了。  1964年出生于山东省济南市,17岁就读于第二军医大学海医系本科,26岁时被授予博士学位,28岁破格晋升为当时我国最年轻的医学教授。32岁晋升为博士生导师,33岁担任全军免疫与基因治疗重点实验室主任,41岁成为当时最年轻的中国工程院院士。此外,他还是当时

荧光显微镜概述

荧光显微镜概述荧光显微镜与普通光学显微镜不同,它不是通过普通光源的照明观察标本,而是利用一定波长的光(通常是紫外光或蓝紫光)激发显微镜下标本内的荧光物质,使之发朗荧光,呈现荧光映像。所以,荧光显微镜的光源所起的作用不是直接照明,而是作为一种激发标本内的荧光物质的能源。我们之所以能观察标本,不是由于光

法大教授自检蘑菇出现荧光 准备起诉北京工商局

出现荧光的口蘑上和蟹棒菇下样品照片。   针对“蘑菇漂白”事件,中国政法大学公共决策研究中心主任何兵教授昨天透露,他和学生已自己动手检测了蘑菇中的荧光物质,参与检测的学生表示,在22组受检蘑菇中,有3组在紫外分析仪下出现明显的荧光物质斑点。何兵表示,已经让学生草拟

FKM多光谱荧光动态显微成像系统应用于释秋海棠蓝色叶...

FKM多光谱荧光动态显微成像系统应用于释秋海棠蓝色叶片的特殊光合机制研究KM多光谱荧光动态显微成像系统帮助科学家解释秋海棠蓝色叶片的特殊光合机制2016年10月,国际学术权威刊物Nature出版集团旗下子刊《Nature Plants》发表了英国布里斯托大学Heather Whitney研究团队的一

叶绿素荧光参数及定义

叶绿素荧光参数是一组用于描述植物光合作用机理和光合生理状况的变量或常数值,反映了植物“内在性 ”的特点 , 被视为是研究植物光合作用与环境关系的内在探针 。   为了统一叶绿素荧光参数名称, 在1990年召开的国际荧光研讨会上对上述的大部分参数给出了标准术语( standard nomenclatu

一招变身检测荧光达人

在生命科学领域,随着科研水平和实验手段不断的提高,荧光染色方法以其特异性强,使用相对于放射性元素更安全,检测越来越灵敏等特点,受到越来越多的研究人员的认可,并且在实验室中广泛应用,成为经常性的实验方法。 检测荧光方法和手段根据不同的实验要求和目的也多种多样,使用最多的还是荧光显微镜,荧光酶标仪,流