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电镜用戊二醛固定液配制使用

电镜用 戊二醛固定液(2.5%, 电镜专用)戊二醛固定液(2.5%, 电镜专用)别名:Glutaric dialdehyde solution;Pentane-1,5-dial分子式:C5H8O2分子量:100.12CAS#:111-30-8外观:几乎无色液体特性:类型:Grade IIR:22-23-34-42/43S:23-26-36/37/39-45戊二醛固定液 配制 步骤Step 1:0.2M 磷酸缓冲液的配制:---------------------磷酸二氢钠(NaH2PO4.H2O) 2.6 克磷酸氢二钠 (Na2HPO4.12H2O) 29 克双蒸馏水 加至 500 毫升pH 调至 7.4Step 2:戊二醛固定液的配制:---------------------25% 戊二醛 1ml双蒸馏水 4ml0.2mol/L 磷酸缓冲液 5ml戊二醛最终浓度 2.5%pH 值 7.3-7.4戊二醛固定剂的配方:(a) 磷......阅读全文

透射电镜的基本结构和原理

电子显微镜(electron microscopy,EM) 简称电镜,经过五十多年的发展已成为生物学、医学、化学、农林和材料科学等领域进行科学研究的重要工具,是人类认识自然,特别是研究机体微细结构的重要手段,电镜技术已成为上述各领域研究工作者应掌握的一项基本技能。电镜的创制者鲁斯卡(E.Ruska)

电镜与样品制备技术

电镜样品取材方法 1 动物及人体组织的取材 动物组织的取材,应在麻醉(1%戊巴比妥钠按5ml/kg体重腹腔注射)或断头急性处死,解剖出所需器官,用解剖剪刀剪取一小块组织,放在干净的纸板上,滴一滴冷却的固定液,用新的、无油污锋利的(双面)刀片将材料切成大约1㎜宽,2~3㎜长的小块,从中挑选损伤小的小条

扫描电镜和透射电镜之间的对比

  电子显微镜  电子显微镜是根据电子光学原理,用电子束和电子透镜代替光束和光学透镜,使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像的仪器。  电子显微镜的分辨能力以它所能分辨的相邻两点的最小间距来表示。20世纪70年代,透射式电子显微镜的分辨率约为0.3纳米(人眼的分辨本领约为0.1毫米)。现在电子显微

透射电镜样品制备要求有哪些

  透射电镜样品制备步骤:  一,取材:组织块小于1立方毫米  二,固定:  2.5%戊二醛,徳酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。  用0.1M磷酸漂洗液漂洗15分三次1%饿酸固定液固定2-3小时  用0.1M磷酸漂洗液漂洗15分三次  三,脱水:  50%乙醇15-20分  70%乙醇15-20分

胃上皮化生和幽门螺杆菌超微结构的观察

胃上皮化生和幽门螺杆菌超微结构的观察为研究和证实十二指肠胃上皮化生(GM)与幽门螺杆菌及(Hp)十二指肠溃疡的发生之间关系作者进行了如下超显微结构的观察,现报告如下。1 材料和方法1.1 材料 均为我院内镜检查的患者,内镜检查结合病理切片观察严格选材,18例球部标本,其中十二指肠溃(DU)13例,慢

扫描电镜的基本结构和原理

扫描电镜成像方式与透射电镜不同,是用电视的方式成像。其基本要点是用极狭窄的电子束来扫描样品,即电子束在样品上作光栅运动。电子束与样品相互作用将会产生样品的二次电子发射,二次电子能产生样品表面放大的形貌像,这个像是在样品被扫描时按时序地建立起来的,即用逐点成像的方法获得放大的像。   一、基本结构

超薄切片技术简介

由于电镜产生的电子束穿透能力很弱,必须把标本切成厚度小于0.1um以下的薄片才适用,这种薄片称为超薄切片。常用的超薄切片厚度是50-70nm。在透射电镜的样品制备方法中,超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术。超薄切片的制作过程基本上和石蜡切片相似,需要经过取材、固定、脱水、浸透、包埋聚合、切片及染

电镜组织样品固定液的选择及其配制

  自1931世界上第一台电子显微镜诞生以来,微观世界的大门开放的更加广阔。目前电镜被广泛运用于各器官系统疾病的病理诊断中,除了运用在肿瘤的诊断与鉴别诊断中,用得最多的是肾脏活检和某些皮肤疾病的诊断,其中透射电子显微镜是最早,最广泛应用于医学领域的一种电镜。随着电镜在医学上的应用,人类通过观察细胞膜

扫描电镜的基本结构和原理

扫描电镜成像方式与透射电镜不同,是用电视的方式成像。其基本要点是用极狭窄的电子束来扫描样品,即电子束在样品上作光栅运动。电子束与样品相互作用将会产生样品的二次电子发射,二次电子能产生样品表面放大的形貌像,这个像是在样品被扫描时按时序地建立起来的,即用逐点成像的方法获得放大的像。  一、基本结构扫描电

扫描电镜的基本结构和原理

扫描电镜成像方式与透射电镜不同,是用电视的方式成像。其基本要点是用极狭窄的电子束来扫描样品,即电子束在样品上作光栅运动。电子束与样品相互作用将会产生样品的二次电子发射,二次电子能产生样品表面放大的形貌像,这个像是在样品被扫描时按时序地建立起来的,即用逐点成像的方法获得放大的像。  一、基本结构扫描电

一文了解电镜固定液选择及配制

  自1931世界上第一台电子显微镜诞生以来,微观世界的大门开放的更加广阔。目前电镜被广泛运用于各器官系统疾病的病理诊断中,除了运用在肿瘤的诊断与鉴别诊断中,用得最多的是肾脏活检和某些皮肤疾病的诊断,其中透射电子显微镜是最早,最广泛应用于医学领域的一种电镜。随着电镜在医学上的应用,人类通过观察细胞膜

电子显微镜免疫细胞化学技术-1

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗体

电子显微镜免疫细胞化学技术-1

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗体

电子显微镜免疫细胞化学技术概述

第七章 电子显微镜免疫细胞化学技术第一节 电子显微镜免疫细胞化学技术概述免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细

检测细胞凋亡的实验方法比较

◆ TUNEL 与 ELISA 检测凋亡的方法比较TUNEL法   细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3

非标记抗体免疫电镜实验——经典法

不标记抗体法通过系统的非标记抗体的免疫学反应,对组织中的抗原进行定位检测。分为用标记物显示和不同标记物显示两种方法。用于(1)抗体观察(2)免疫学研究。实验方法原理标记抗体法虽然具有许多优点,但也存在一些难以克服的问题,如标记抗体的分子增大,对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有

免疫细胞电镜技术

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原 抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发

透射电镜小鼠气管和眼睛的取材和包埋

实验概要本实验要看小鼠气管内的cilia和眼睛中的primary cilia的”9 2”结构,故做透射电镜。主要试剂glutaraldehyde(EMS进口,电镜专用)PFAPBS or PB buffer1-4% osmium tetroxide in buffer0.5% uranyl acet

透射电镜小鼠气管和眼睛的取材和包埋

实验概要本实验要看小鼠气管内的cilia和眼睛中的primary cilia的”9 2”结构,故做透射电镜。  主要试剂  glutaraldehyde(EMS进口,电镜专用) PFA PBS or PB buffer 1-4% osmium tetroxide in buffe

细胞凋亡的形态学观察

细胞凋亡(apoptosis)的命名主要是根据某些单个细胞死亡时细胞碎裂如花瓣或树叶散落般的形态学特征。目前对细胞凋亡的认识正不断得到深化,检测凋亡细胞的方法也逐渐增多,但形态改变仍是确定细胞凋亡的最可靠的方法。一、光学显微镜观察凋亡细胞的主要特征为核染色质致密深染,形成致密质块,有时可碎裂。在HE

细胞凋亡的形态学观察

细胞凋亡(apoptosis)的命名主要是根据某些单个细胞死亡时细胞碎裂如花瓣或树叶散落般的形态学特征。目前对细胞凋亡的认识正不断得到深化,检测凋亡细胞的方法也逐渐增多,但形态改变仍是确定细胞凋亡的最可靠的方法。一、光学显微镜观察凋亡细胞的主要特征为核染色质致密深染,形成致密质块,有时可碎裂。在HE

扫描电镜的样本处理

实验概要本文介绍了扫描电镜的样本处理,主要包括:样品的初步处理,样品的干燥,样品的导电处理,细胞内部结构冷冻割断法和铸型技术。实验步骤1. 样品的初步处理   1) 取材 取材的基本要求和透射电镜样品制备相同。但是,对扫描电镜来说,样品可以稍大些,面积可达8mm×8mm,厚度可达

细胞凋亡检测:形态学特征的检测方法

根据调亡形态学特征的检测方法一、普通光学显微镜观察方法1)苏木素-伊红染色(HE染色法)石蜡组织切片的HE染色1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,4μm切片。2.切片常规用二甲苯脱蜡,经各级乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%

如何制备透射电镜的样品?

  透射电镜样品制备方法  样品在2.5%的戊二醛溶液中4℃固定过夜,然后按下列步骤处理样品:  倒掉固定液,用0.1M,pH=7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min;  用1%的锇酸溶液固定样品1-2h;  倒掉固定液,用0.1M,pH=7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min;  

扫描电镜的样本处理

1. 样品的初步处理  1) 取材  取材的基本要求和透射电镜样品制备相同。但是,对扫描电镜来说,样品可以稍大些,面积可达8mm×8mm,厚度可达5mm。对于易卷曲的样品如血管、胃肠道粘膜等,可固定在滤纸或卡片纸上,以充分暴露待观察的组织表面。  2) 样品的清洗  用扫描电镜观察的部位常常是样品的

扫描电镜样本的初步处理

1) 取材取材的基本要求和透射电镜样品制备相同。但是,对扫描电镜来说,样品可以稍大些,面积可达8mm×8mm,厚度可达5mm。对于易卷曲的样品如血管、胃肠道粘膜等,可固定在滤纸或卡片纸上,以充分暴露待观察的组织表面。2) 样品的清洗用扫描电镜观察的部位常常是样品的表面,即组织的游离面。由于样品取自活

细胞凋亡检测:形态学特征的检测方法

根据调亡形态学特征的检测方法 一、普通光学显微镜观察方法 1 )苏木素-伊红染色( HE 染色法) 石蜡组织切片的 HE 染色1. 取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋, 4 μ m

树脂切片制作过程

一、实验仪器及试剂1.器具电子天平、70℃恒温箱、玻璃制刀机、半/超薄切片机、显微镜、包埋模、制刀用的玻璃条、镊子、刀片。 2.试剂 (1)固定剂:FAA (2)脱水剂:20%、40%、60%、80%、90%、95%、100%的乙醇;丙酮(3)树脂:Spurr树脂(4)

透射和扫描电子显微镜样品的制备及观察

实验概要本实验详细介绍了透射和扫描电子显微镜样品的制备及观察。主要试剂醋酸戊脂,浓硫酸,无水乙醇,无菌水,2%磷钨酸钠(pH6.5-8.0)水溶液,0.3%聚乙烯甲醛(溶于三氯甲烷)溶液,细胞色素c,醋酸铵,质粒pBR322。主要设备普通光学显微镜,铜网,瓷漏斗,烧杯,平皿,无菌滴管,无菌镊子,大头

透射和扫描电子显微镜样品的制备及观察

实验概要本实验详细介绍了透射和扫描电子显微镜样品的制备及观察。主要试剂醋酸戊脂,浓硫酸,无水乙醇,无菌水,2%磷钨酸钠(pH6.5-8.0)水溶液,0.3%聚乙烯甲醛(溶于三氯甲烷)溶液,细胞色素c,醋酸铵,质粒pBR322。主要设备普通光学显微镜,铜网,瓷漏斗,烧杯,平皿,无菌滴管,无菌镊子,大头