百合基因工程研究进展
摘 要：本文从百合基因克隆、外源基因转化方法及转基因应用等方面，介绍近年来百合基因工程的研究进展，并讨论了百合基因工程研究中存在的问题和应用前景。点击这里进入下载页面：进入下载页面......阅读全文
转化克隆的筛选和鉴定
1．目的学会用酶切法或PCR法筛选重组质粒转化成功的克隆菌。 2．原理利用转化后宿主菌所获得的抗菌素抗性性状筛选出获得质粒的菌落克隆。再从这些菌落中鉴定出质粒上带有外源基因插入片断的克隆菌落。 3．器材旋涡混合器，小镊子，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，干式恒温
转化克隆的筛选和鉴定
实验概要本实验介绍了转化克隆的筛选和鉴定方法，有助于学会用酶切法或PCR法筛选重组质粒转化成功的克隆菌。实验原理利用转化后宿主菌所获得的抗菌素抗性性状筛选出获得质粒的菌落克隆。再从这些菌落中鉴定出质粒上带有外源基因插入片段的克隆菌落。主要试剂1. LB培养基(加抗菌素)2. PCR用试剂3. 引物4
转化克隆的筛选和鉴定
1．目的学会用酶切法或PCR法筛选重组质粒转化成功的克隆菌。2．原理利用转化后宿主菌所获得的抗菌素抗性性状筛选出获得质粒的菌落克隆。再从这些菌落中鉴定出质粒上带有外源基因插入片段的克隆菌落。3．器材旋涡混合器，小镊子，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，干式恒温气浴
新方法打破基因编辑技术对遗传转化依赖
近日，中国农业科学院油料作物研究所油料作物逆境生物学和抗性改良团队联合成都市农林科学院相关团队，建立了一种新型的基因编辑方法。该方法打破了基因编辑技术对遗传转化的依赖，直接通过授粉的方式对油菜和甘蓝的基因进行基因编辑，获得了不含转基因元件的突变材料。相关研究成果发表于《植物生物技术杂志》。 油菜
基因克隆
外源DNA和质粒载体的连接反应 外源ＤＮＡ片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链ＤＮＡ５'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸，可生成４个新的磷酸二酯链。但如果质粒ＤＮＡ已去磷酸化，则吸能形成２个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交
转化克隆的筛选和鉴定实验
实验原理利用转化后宿主菌所获得的抗菌素抗性性状筛选出获得质粒的菌落克隆。再从这些菌落中鉴定出质粒上带有外源基因插入片段的克隆菌落。实验试剂1. LB培养基(加抗菌素)2. PCR用试剂3. 引物4. 质粒提取用试剂5. 酶切需要的限制性内切酶及其缓冲液，70%甘油(70%甘油，0.1mol/L Mg
重组片段的转化及克隆和筛选
一、目的与原理转化是指以质粒DNA或以它为载体构建的重组子导入细菌的过程。转化技术在基因工程领域中占有极重要的地位。目前用得较多的转化技术为将人工构建的重组质粒到如受体细胞，使重组质粒在受体细胞中稳定地复制和表达。二、材料和方法1.材料：大肠杆菌2.仪器：离心机，恒温摇床，恒温水浴，超净工作台，冰柜
实验九－转化克隆的筛选和鉴定
1．目的学会用酶切法或PCR法筛选重组质粒转化成功的克隆菌。2．原理利用转化后宿主菌所获得的抗菌素抗性性状筛选出获得质粒的菌落克隆。再从这些菌落中鉴定出质粒上带有外源基因插入片段的克隆菌落。3．器材旋涡混合器，小镊子，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，干式恒温气浴
我国科学家破解小麦遗传转化中基因型依赖难题
近日，中国农业科学院作物科学研究所作物转基因及基因编辑技术与应用创新团队鉴定了一个与小麦植株再生相关的基因TaWOX5，并利用TaWOX5基因克服了小麦遗传转化中的基因型依赖难题。此外，研究团队还依托该基因建立了栽培一粒小麦、黑麦和六倍体小黑麦的遗传转化体系。相关研究结果在线发表于《自然·植物》
油菜甘蓝的基因编辑新方法打破对遗传转化的依赖
5月27日，中国农业科学院油料作物研究所油料作物逆境生物学和抗性改良团队，联合成都市农林科学院相关团队，建立了一种应用于油菜和甘蓝的新型基因编辑方法。该方法打破了油菜和甘蓝的基因编辑技术对遗传转化的依赖，直接通过授粉的方式对油菜和甘蓝的基因进行编辑，获得了不含转基因元件的突变材料，为高产、优质、
基因克隆技术
一、目的基因的获得目的基因是指所要研究或应用的基因，也就是将要克隆或表达的基因。获得目的基因是分子克隆过程中最重要的一步。目前用于获得目的基因的方法有几种，如限制性内切酶直接分离法、文库筛选法、体外扩增法和人工合成法等，其中限制性内切酶法直接分离目的基因和多聚酶链式反应（PCR）或逆转录-多聚酶链式
基因克隆技术
一、目的基因的获得 目的基因是指所要研究或应用的基因，也就是将要克隆或表达的基因。获得目的基因是分子克隆过程中最重要的一步。目前用于获得目的基因的方法有几种，如限制性内切酶直接分离法、文库筛选法、体外扩增法和人工合成法等，其中限制性内切酶法直接分离目的基因和多聚酶链式反应（PCR）或逆转录-
基因的图位克隆
图位克隆(Ｍａｐ-ｂａｓｅｄｃｌｏｎｉｎｇ)又称定位克隆(ｐｏｓｉｔｉｏｎａｌｃｌｏｎｉｎｇ),1986年首先由剑桥大学的Ａｌａｎｃｏｕｌｓｏｎ提出,用该方法分离基因是根据目的基因在染色体上的位置进行的,无需预先知道基因的ＤＮＡ顺序,也无需预先知道其表达产物的有关信息,但应有以下两方面的基本情况:
农杆菌介导的植物遗传转化
农杆菌介导的植物 遗传转化 【目的】：学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。 【要求】：以烟草叶片为材料，与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养，遗传转化烟草叶片，筛选抗性再生植株。 【内容】：1、烟草无菌苗的准备 2、带有外源基因农杆菌的培养 3、烟草叶片与对
衣藻的遗传技术(转化)实验
实验材料细胞试剂、试剂盒EcoRI 酶仪器、耗材SGII 培养基实验步骤1. 500 ml 烧瓶中装 250 ml SGII 培养基，在通气和恒定光照条件下，培养细胞至 5X106 /ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切质粒。3. 去细胞壁，低速离心浓缩细胞，在 SGII-NO3 培养基重悬细胞为
衣藻的遗传技术(转化)实验
实验材料细胞试剂、试剂盒EcoRI 酶仪器、耗材SGII 培养基实验步骤1. 500 ml 烧瓶中装 250 ml SGII 培养基，在通气和恒定光照条件下，培养细胞至 5X106 /ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切质粒。3. 去细胞壁，低速离心浓缩细胞，在 SGII-NO3 培养基重悬细胞为
农杆菌介导的植物遗传转化
实验概要以烟草叶片为材料，与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养，遗传转化烟草叶片，筛选抗性再生植株。掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。主要试剂70%乙醇0.1% HgCl2无菌水卡那霉素(kan)羧苄青霉素(Cb)培养基：LB培养基100ml；MS 盐溶液(pH 7.0)100ml，
衣藻的遗传技术(转化)实验
衣藻的遗传技术(转化) 实验材料 细胞 试剂、试剂盒
农杆菌介导的植物遗传转化
农杆菌介导的植物遗传转化 【目的】：学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。 【要求】：以烟草叶片为材料，与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养，遗传转化烟草叶片，筛选抗性再生植株。 【内容】：1、烟草无菌苗的准备 2、带有外源基因农杆菌的培养
衣藻的遗传技术(转化)实验
实验材料 细胞 试剂、试剂盒 EcoRI 酶 仪器、耗材
农杆菌介导的遗传转化程序
实验概要农杆菌侵染实验实验步骤(1) 农杆菌菌液的制备 将农杆菌接种于附加50mg/L Km、50mg/L Sm、50mg/L Rif的YEB固体培养基上，28℃暗培养，至长出单菌落。用接菌环挑取单菌落，接种在5mL含相应抗生素的YEB液体培养基中，于28℃，200r/min 培养过夜。待
多基因遗传与数量遗传
多基因遗传（polygenic inheritance)是指生物和人类的许多表型性状由不同座位的较多基因协同决定，而非单一基因的作用，因而呈现数量变化的特征，故又称为数量性状遗传。多基因遗传时，每对基因的性状效应是微小的，故称微效基因（minor gene)，但不同微效基因又称为累加基因
中国学者突破性转基因技术遭质疑－花粉磁转染不成功？
2018年4月，Trends in Biotechnology杂志在线发表了美国加州大学伯克利分校MarkitaP. Landry课题组题为‘Nanoparticle-MediatedDelivery towards Advancing Plant Genetic Engineering’的综述
新发现：不依赖遗传转化的油菜和甘蓝基因编辑技术
近日，中国农业科学院油料作物研究所油料作物逆境生物学和抗性改良团队联合成都市农林科学院建立了一种新型的基因编辑方法。该方法打破了基因编辑技术对遗传转化的依赖，直接通过授粉的方式对油菜和甘蓝的基因进行基因编辑，获得了不含转基因元件的突变材料。相关研究成果发表在《植物生物技术杂志（Plant Bio
植物基因转化技术
相关知识植物基因转化技术是指将外源基因导入植物细胞或组织，获得转基因植物的技术。植物基因转化技术总体上可分为两大类：1 以生物体为介导的基因转移法；2 DNA直接导入法。前者如农杆菌介导法，植物病毒介导法；后者如基因枪法、电击法、聚乙二醇法、脂质体法及花粉管通道法。其中应用最广的是根癌农杆菌介导法。
目的基因的亚克隆
实验材料 E.coli JM109试剂、试剂盒 牛肉膏胰蛋白胨NaCl微量细菌基因组抽提试剂盒BamH IXho1 核酸内切酶凝胶电泳回收试剂盒仪器、耗材 高速台式冷冻离心机水平电泳仪漩涡混合仪紫外检测仪凝胶成像分析系统微量移液器及吸头
目的基因的亚克隆
实验题目 ：目的基因的亚克隆一、实验目的1、掌握细菌基因组提取的方法和原理。2、掌握限制性核酸内切酶处理基因组及其结果分析。3、掌握基因片段回收的方法。二、实验原理细菌基因组的提取：通过碱法或者酶法裂解细菌之后，可以将胞内的核酸和蛋白质全释放出来。DNA溶于1mol/L的NaCl中，不溶于 0.
目的基因的亚克隆
实验方法原理 亚克隆的基本过程包括：(1)目的DNA片段和载体的制备；(2)目的DNA片段和载体的连接；(3)连接产物的转化；(4)重组子筛选。 实验材料
目的基因的亚克隆
目的基因的亚克隆可应用于：（1）进一步分析目的基因；（2）基因重组。实验方法原理亚克隆的基本过程包括：(1)目的DNA片段和载体的制备；(2)目的DNA片段和载体的连接；(3)连接产物的转化；(4)重组子筛选。实验材料E.coli JM109试剂、试剂盒牛肉膏胰蛋白胨NaCl微量细菌基因组抽提试剂盒
基因克隆技术1
一、目的基因的获得目的基因是指所要研究或应用的基因，也就是将要克隆或表达的基因。获得目的基因是分子克隆过程中最重要的一步。目前用于获得目的基因的方法有几种，如限制性内切酶直接分离法、文库筛选法、体外扩增法和人工合成法等，其中限制性内切酶法直接分离目的基因和多聚酶链式反应（PCR）或逆转录-多聚酶链式