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TLC柱层析过柱的技巧

过柱的技巧柱层析按过柱时的压力可以分为: 加压, 常压, 减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度, 减少产品收集的时间, 但是会减低柱子的塔板数。 所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的, 但是时间也最长, 例如一些天然化合物的分离,有时一个柱子过几个月也有可能。减压柱能够减少硅胶的使用量,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发, 有时会在柱子外面有水汽凝结, 另外有些比较易分解的东西可能得不到, 而且还必须同时使用水泵抽气, 噪音大, 时间长, 所以减压过柱用得比较少。加压过柱是一种比较好的方法, 与常压柱类似, 但用外加压力可以使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气,双连球或者小气泵 (用鱼缸供气的加压泵就行)。特别是在容易分解的样品的分离中很适用。一般压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果。因为加压过柱效率高, 分离效果较好, 所以加压过柱在普通的有机化合物的分离中是非常适用的。一些低沸点溶剂装柱时往往会在柱子......阅读全文

常压柱,减压柱,加压柱有什么区别?

  过柱子,即柱层析或柱色谱的俗称,是有机化学中最常用也是最基础的一种分离手段。有机化学实验者最常做的三件事莫过于加反应、点板(TLC)和过柱子了,过完柱子拿到了纯的产品这个实验才算是告一段落了,当然之后一般还需要做一些其他的数据表征。作为一个几乎天天跟柱子打交道的有机化学实验者,有过把产物过没了的

有机合成民工呕心沥血总结的过柱子经验

  由于部分新手刚接触过柱,需要系统地了解过柱的方法技巧,我把一个从事多年化学工作,有丰富实验经验的先生的过柱经验转载过来,希望对大家有用。(看了请及时回帖,谢谢~~)  常说的过柱应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过

色谱柱相关的100个问题

  色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。  1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是反着用。具体到各型号

色谱实验室过柱子技巧归纳

柱层析分离技巧可以说是经验成分居多,本文是小编从网络摘录的一段某热心网友的过柱心得,希望能对您有所帮助。   柱层析技术也称柱色谱技术,即常说的过柱子,应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。一根柱子里先填充不溶性基质形成固定相,将蛋白质混合

气相色谱35个常见问题及注意事项

相色谱是实验室的要设备之一,应用范围广,是实验分析工作者的好帮手,但是,在使用过程中也会遇到各种各样的问题,快速的解决这些问题可以更有效的服务于我们的检测工作。一、何谓气相色谱?它分几类?凡是以气相作为流动相的色谱技术,通称为气相色谱。一般可按以下几方面分类:1、按固定相聚集态分类:(1)气固色谱:

实验室中可以提高工作效率的简单技巧

  1、封口膜剪了以后直接拉伸使用(保护纸会在拉开后分离),这样就不需要抠开了。   2、鱼缸潜水泵做回流冷凝的循环水泵,还有不用多说的加氧泵用来做过柱的加压泵。备注!这个过住指的是硅胶/氧化铝柱层析,不指葡聚糖柱等其他类型的柱子。   3、带验钞功能的手电筒可以用来过染料(便宜、比便

液相色谱柱的填装

   液相色谱柱、特别是高效液相色谱柱的填装,需要有较高的技巧和熟练的技能。因此,有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”。但是,只要掌握了一些基本的规律和方法,任何实验室都可以填装出具有较高柱性能的色谱柱。当然,目前大多数实验室多是购买商品预填装柱来满足分离、分析之需。但是在

5大容易上手的高效液相色谱柱的填装方法大揭秘(一)

目前大多数实验室是购买商品预填装柱来满足分离、分析之需。液相色谱柱、特别是高效液相色谱柱的填装,需要有较高的技巧和熟练的技能。因此,有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”。但是只要掌握了一些基本的规律和方法,任何实验室都可以填装出具有较高柱性能的色谱柱。在有关色谱基本理论的讨论中可以得知,发生在色谱

光化学柱后衍生装置实验过程中的小技巧

 光化学柱后衍生装置配备液相色谱仪使用,分析功能非常强大,可对多种物质进行检测。广泛适用于环境、临床、药物、食品和饲料工业等。  光化学柱后衍生装置实验过程中的小技巧:  1、柱后试剂防回流  在LC(洗提液)泵和样品注射器之间安装了一个压力开关,当洗提液泵的压力降低到n时,压力开关会将试剂泵和反应

液相色谱柱使用中常见问题解析

 1、对于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?  答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式

液相色谱柱使用中常见问题解析

1、对于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?  答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也

液相色谱柱使用16大问题大解析

1.对于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?  答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也

液相色谱柱使用16大问题大解析

  1.对于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?  答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方

液相色谱柱使用16大问题大解析

 1.对于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?  答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式

液相色谱柱使用中常见问题解析

  1、对于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?  答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方

液相色谱柱使用问题解析

1对于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?  答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也很

干货 | 关于色谱柱,100问答!

1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是反着用。具体到各型号柱子不仅是ODS柱,其他如正向柱、氨基柱、离子交换柱等最好都有解释。答:一般的正相反相柱应该都能反冲,只有两端筛板孔径不对称的柱子不能反冲,不过目前这样的柱子已经比较少见了。反冲是为了把

液相色谱柱使用16大问题大解析

1.对于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也很简

Tips!10分钟了解液相色谱柱填装技术!

  目前大多数实验室通过购买商品色谱柱来满足分离/分析之需  液相色谱柱的填装,一般需要有较高的技巧和熟练的技能。因此,有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”  但是只要掌握了一些基本的规律和方法,任何实验室都可以填装出具有较高柱性能的色谱柱  高压匀浆法  将填料悬浮在适宜的匀浆液中制成匀浆,在其

气相基线向上漂移

   6基线漂移问题排查  在GC 中使用程序升温时常常会出现基线漂移的现象,这种现象通常有以下几个原因:色谱柱流失、进样垫流失、进样器污染或检测器污染、气体流速的变化。如果使用高灵敏度检测器,即便是微弱的柱流失或系统污染都可能带来显著的基线漂移现象。为了提高定性和定量分析的可靠性,应尽可能的降低或

气相色谱仪进样系统的选择与使用

  一、进样系统的选择:  气相色谱仪分析中,人们总希望有一种进样系统既能适应填充柱和毛细管柱,又能满足不同进样量和进样技术的需要,实践证明这是不现实的,因此,对于一项新的分析任务,面临选择进样系统的问题。进样系统主要是根据样品性质、分析目的和色谱柱类型等来选择,一般原则是在满足分析要求的前提下,尽

过来人讲述实验操作禁忌及技巧

  实验安全是实验当中永远的主题,实验的规则并不是教条,而是真正为了你实验安全设计的一些方案,因此只有很好的遵守,才不会让你有遗憾的地方。  1.习惯一定不能用嘴吸。有些人说:"我知道这个是水!"尽管这样,你知道这些水的含量和洁净程度吗?你知道存放这些水的容器的洁净程度吗?就算在家也不能随便这样操作

润扬变压器油中溶解气体分析气相色谱仪进样技术

变压器作为电力系统最主要的供电设备,其可靠运行程度直接关系到电力系统的安全运行。变压器油的绝缘状态受到重视,按其测量参数的性质,变压器绝缘检测技术可分为电测法(包括脉冲电流法、无线电干扰电压法、超高频检测法、)和非电测法(包括油中溶解气体分析法、超声检测法、光测法、红外检测法)。变压器油中溶解气体分

进样针总是堵了怎么办

进样过程  1、使用前先检查进样器的针筒是否有裂缝及针尖是否是毛口  2、排除进样器中残留在进样器中样品,用专业溶剂洗涤进样器5~20次左右,并弃去前2~3次的废液  3、把针头浸没于溶剂中,将进样器中的气泡排除,反复的抽排样品。当排除样品时,进样器中的气泡能随着管的垂直变化而改变  4、在使用进样

进样针总是堵了怎么办?

  进样过程  1、使用前先检查进样器的针筒是否有裂缝及针尖是否是毛口  2、排除进样器中残留在进样器中样品,用专业溶剂洗涤进样器5~20次左右,并弃去前2~3次的废液  3、把针头浸没于溶剂中,将进样器中的气泡排除,反复的抽排样品。当排除样品时,进样器中的气泡能随着管的垂直变化而改变  4、在使用

常用柱子问题解答

1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是反着用。具体到各型号柱子不仅是ODS柱,其他如正向柱、氨基柱、离子交换柱等zui好都有解释。答:一般的正相反相柱应该都能反冲,只有两端筛板孔径不对称的柱子不能反冲,不过目前这样的柱子已经比较少见了。反冲是为

进样针总是堵怎么办?5步告别堵塞

做仪器分析的时候,我们经常会遇到堵针或者进样器显示错误,无法进样,为了不影响实验进度,这就需要我们对于选择进样器,进样器的保养、维护和故障修理能够很了解。 微量注射器又称为微量进样器,其特点毋庸置疑那就是方便使用、价格低廉、进样准确,被整个行业内所广泛应用。进样器的设计工艺和类型以及使用和保养直

进样器的维护须知

  进样器又被称为进样针和注射器。进样器的设计工艺和类型以及使用和保养直接关系到重复进样而得到一致的分析结果,其实,很多用户对使用完进样器后,它的后期处理比如清洗和保养方面并不是很重视或者是有些用户根本就不知道如何去维护保养使用完的进样器和长久不用闲置一段时间的进样器。下面笔者就对于选择进样器,进样

160个分析检测常用实用经验汇总,看到你就赚到了!

  1、 检验一些不易溶解的样品时,采用超声波超声可使样品溶解更快速更彻底,主成分溶解完全,没有浪费,对含量均匀度测定没有影响,且简单方便且更合理。  2、乙醇作为溶剂溶解主成分时,不能溶解辅料,需要过滤。采用离心方法使辅料沉淀,取上清夜。(注意,有很多离心管不具塞子,可用柔软的塑料薄膜袋扎橡皮筋做

T细胞尼龙毛柱分离法的操作使用

在研究体内及体外的免疫系统时,分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清,所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用了尼龙毛对B细胞的亲和力,从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。因为这个方法不像流式和磁珠费用昂贵,而且操作简便,所