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限制性内切酶消化DNA实验——消化多个DNA

实验方法原理当消化多个样品时,以下方案可减少取吸次数,节省时间和减少污染的机会。实验材料DNA实验步骤1. 分别加入相同体积的各个样品DNA至不同微量离心管中。 为避免交叉污染,各样品用不同的吸头。 2. 制备好"预混合液",它含有足够量的消化所有样品的10x反应缓冲液和水,置于冰浴。 3. 加入足以消化所有样品的酶于"预混合液"的管中,轻弹管壁,混匀,置于冰浴。4. 取适量上述混合液加入各样品管中,在适当的温度下温育1 h。5. 终止反应,电泳分析或进一步酶切处理。......阅读全文

DNA作图实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 限制酶缓冲液仪器、耗材 电泳仪实验步骤   用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。2.  从每个反应取小份样品作电泳分析,用已知的分子量标准作对照。剩余的样品置于冰浴。3.  比较分子量标准估算出DNA片段的长度,推导出每种限制性内切酶的酶切位点数目。4. 

DNA作图实验

多种酶消化 限制酶部分消化             实验方法原理 应用遗传学技术构建能显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。

纯化DNA实验

从哺乳动物细胞或组织分离DNA 基因组DNA的快速纯化 纯化质粒(碱裂解法)             实验材料 细胞

纯化DNA实验

从哺乳动物细胞或组织分离DNA 基因组DNA的快速纯化 纯化质粒(碱裂解法)             实验材料 细胞

DNA纯化实验

实验方法原理 硅胶膜可在高盐条件下结合DNA,又可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物、单核苷酸、酶、矿物油、盐离子等杂质因为没有与DNA相似的特性,所以被分离开来。实验材料 PCR产物试剂、试剂盒 PCR清洁试剂盒仪器、耗材 96孔DNA制备板96孔深孔板96孔V型底板实验

DNA纯化实验

PCR清洁试剂盒纯化法             实验方法原理 硅胶膜可在高盐条件下结合DNA,又可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物、单核苷酸、酶、矿物油

纯化DNA实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 TBS抽提缓冲液仪器、耗材 离心管实验步骤 1. 根据样品类型,从下列方法中选一个作为步骤 1 进行操作。(1) 细胞样品① 单层培养的细胞以用冰预冷的 TBS 将单层细胞洗涤 2 次,用刮棒把细胞刮入约 0.5 ml 的 TBS 中,将细胞悬液转移到冰浴的离心管中,

DNA裂解分析实验

琼脂糖凝胶电泳 个体核的PI荧光 乙醇固定后PI染色 JAM分析             实验材料 细胞

DNA裂解分析实验

琼脂糖凝胶电泳 个体核的PI荧光 乙醇固定后PI染色 JAM分析             实验材料 细胞

DNA定点突变实验

实验方法原理 定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除、点突变等。单点突变的原理是从常规E.coli中经纯化试剂盒(Miniprep)或者氯化铯纯化抽提得到质粒。设计一对包含突变位点的