生物素酰化探针的检测实验——化学发光法
实验材料DNA试剂、试剂盒生物素磷酸酶仪器、耗材紫外灯离心机实验步骤1. 用夹子固定已转印的尼龙膜的边角于一小片干的吸水纸上，样品面朝上，放进温箱内12~80℃放15~30 min 或温室晾干过夜。 2. 将带核酸的面朝上暴露于紫外灯下，用最适的时间交联。3. 用生物素探针与膜杂交，用适当强度的洗液洗涤。 4. 杂交后、将膜置于杂交袋中。 5. 封口，在一个角留有一小孔便于加入和排出液体。6. 加入1体积的封阻液、室温作1 min 轻微摇动、倒干溶液。 7. 加入1 mg/ml 链亲和素至1体积的封阻液至终浓度为1 μg/ml，在杂交袋中室温温育4 min，轻微摇动，倒干溶液。8. 加入10体积诜液 I，室温洗膜4 min 轻微摇动，倒干溶液，重复1次。9. 加入生物素酰化碱性磷酸酶......阅读全文
生物素酰化探针的检测实验——化学发光法
实验材料DNA试剂、试剂盒生物素磷酸酶仪器、耗材紫外灯离心机实验步骤1. 用夹子固定已转印的尼龙膜的边角于一小片干的吸水纸上，样品面朝上，放进温箱内12~80℃放15~30 min 或温室晾干过夜。 2. 将带核酸的面朝上暴露于紫外灯下，用最适的时间交联。3. 用生物素探针与膜杂交，用适当强度
生物素酰化探针的检测实验
比色法 化学发光法 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
生物素酰化探针的检测实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 磷酸酶缓冲液封阻液牛血清蛋白TENBT仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 用DNA稀释缓冲液，稀释生物素酰化标准DNA，浓度为0、1、2、5、10和20 pg/μl。以同样稀释液处理待测DNA。2. 对干硝酸纤维素滤膜：每个稀释度取1 μl 点膜，在80
生物素酰化探针的制备实验——切口平移法
在标准的切口平移实验体系中，生物素-11-dNTP取代了dNTP，DNA酶I 的浓度调整到可生成长100~500个核苷酸的范围，其他生物素酰化的核苷酸也可代替生生物素-11-dNTP。实验材料DNA试剂、试剂盒DNA聚合酶dNTP2-疏基乙醇生物素甘油NaClEDTASDS无水乙醇仪器、耗材注射器电
生物素酰化探针的制备实验
切口平移法 随即寡核苷酸引物合成法 实验材料 DNA
生物素酰化探针的制备实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 DNA聚合酶dNTP2-疏基乙醇生物素甘油NaClEDTASDS无水乙醇仪器、耗材 注射器电泳仪离心机培养箱实验步骤 1. 混合以下物质于100 μl 反应体积：（1）10 μl 10×大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ缓冲液（2）10 μl 0.5 mmol/l 3dNTP
生物素酰化探针的检测实验——比色法
与放射性标记探针的比活不同，生物素标记探针的可检出性在于每千碱基对中掺入的生物素分子的数量，它可用比色法检测。实验材料DNA试剂、试剂盒磷酸酶缓冲液封阻液牛血清蛋白TENBT仪器、耗材离心机分光光度计摇床实验步骤1. 用DNA稀释缓冲液，稀释生物素酰化标准DNA，浓度为0、1、2、5、10和20
生物素酰化探针的制备实验——随即寡核苷酸引物合成法
实验材料DNA试剂、试剂盒dNTP生物素klenow酶TEEDTALiCl乙醇仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1. 在1. 5 ml 离心管中加入500 ng~2 μg 模板DNA，加水至总体积为34 μl。 2. 在沸水中变性DNA 5 min 置于冰浴5 min，稍加旋离。3. 按顺序加入下
杂交信号的放大实验——生物素酰化信号
实验材料杂交信号试剂、试剂盒生物素SSC荧光素亲和素仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1. 用生物素酰化探针与切片进行杂交、洗涤，进行第一轮杂交信号检测。 2. 如切片已承加盖玻片并密封。可用一针头或解剖刀片划开密封的指甲油，移去盖玻片， 并除去载玻片上指甲油。将玻片浸于0.1%Triton X-1
地高辛标记探针的化学发光检测实验
实验材料 DNA 试剂、试剂盒 抗体 实验步骤 1. 用地髙辛标记探针与带DNA或RNA印迹的正电荷尼龙膜杂交。 2. 根据厂商的推荐条件，封闭和结合抗体。 3. 对X光片曝光约20 min。