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RNA原位杂交实验

原位杂交(msituhybridization,ISH),也称作杂交组织化学或细胞学的杂交,是一种能够从形态学上证明特异性的 DNA 或 RNA 序列存在于制备的个别细胞、组织部分、单细胞或染色体中的技术。原位杂交是研究异质细胞群中 DNA 和 RNA 序列的细胞定位的唯一方法。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理原位杂交的原理是含有互补序列(探针)的被标记的单链 DNA 或 RNA 片段在适当 的条件下与细胞的 DNA 或 RNA 杂交形成稳定的杂交体。无论是 DNA( dsDNA、寡核苷酸和 ssDNA ) 或是 RNA( SSC RNA) 探针均能用于定位 DNA 和 mRNA,并且均能用于两 个主要类型的标记策略:直接标记,即用报道分子(如同位素)附着于 DNA 或 RNA;间接标记,在该法中将半抗原(如生物素或地高辛)附着于探针上,然后用标记的结合蛋白 (如亲合素)检测或者用特异性的抗体检测靶探......阅读全文

RNA原位杂交实验

原位杂交(msituhybridization,ISH),也称作杂交组织化学或细胞学的杂交,是一种能够从形态学上证明特异性的 DNA 或 RNA 序列存在于制备的个别细胞、组织部分、单细胞或染色体中的技术。原位杂交是研究异质细胞群中 DNA 和 RNA 序列的细胞定位的唯一方法。本实验来源「RNA

RNA原位杂交实验

实验方法原理 原位杂交的原理是含有互补序列(探针)的被标记的单链 DNA 或 RNA 片段在适当 的条件下与细胞的 DNA 或 RNA 杂交形成稳定的杂交体。无论是 DNA( dsDNA、寡核苷酸和 ssDNA ) 或是 RNA( SSC RNA) 探针均能用于定位 DNA 和 mRNA,并

RNA原位杂交实验

            实验方法原理 原位杂交的原理是含有互补序列(探针)的被标记的单链 DNA 或 RNA 片段在适当 的条件下与细胞的 DNA 或 RNA 杂交形成稳定的杂交体。无论是 DNA( dsDNA、寡核苷酸和 ssDNA ) 或是 RNA( SSC

RNA荧光原位杂交

原位杂交:在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DAN或 RNA

原位杂交仪—原位杂交实验(三)

  原位杂交第三天  1) 用1ml含10%热灭活血清的MABT溶液置换抗体溶液,放置摇床上25分钟,然后用1mlMABT置换,25分钟,再用1mlMABT溶液置换,一小时以上,最后用1mlMABT溶液置换,25分钟。  2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置

原位杂交仪—原位杂交实验(二)

  原位杂交第二天  1.  1)将探针回收,放于-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。  2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。  3)置换2XSSCT1ml,60℃,放置15分钟。  4)置换0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。 

荧光原位杂交实验——荧光原位杂交技术

荧光原位杂交可应用于:(1)动植物基因组结构研究;(2)染色体精细结构变异分析;(3)病毒感染分析;(4)肿瘤遗传学和基因组进化研究。实验方法原理用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵

FISH-荧光原位杂交实验(原位杂交)

1. 实验目的        通过实验了解荧光原位杂交技术的基本原理和在生物学、医学领域的应用。掌握原位杂交技术的操作方法,熟练掌握荧光显微镜的使用方法。2. 实验原理        荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗

原位杂交实验步骤

原位杂交实验步骤 一质粒制备1质粒的转化和扩增1.1制备XL1-Blue感受态细菌1. 取400uL XL1-Blue菌种加入到含200ml LB培养基的锥形瓶中,37 ℃、100rpm培养4h,离心,倒置,以冰冷的0.1 mol/L CaCl_2重悬细菌,冰浴30 min,离心,弃上清,倒置,再加

荧光原位杂交实验

实验方法原理 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变