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实时PCR实验

本方法运用 PlatinumQuantitativePCRSuperMix-UDG。进行实时 PCR 时,应该有一套设备可以检测每次 PCR 循环时释放的荧光信号。并且还能检測 FAM 和 JOE 激发后分别释放出的 520mn 和 550nm 的发射波。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒PCR Super Mix-UDGROX 染料蒸馏水反向引物正向引物仪器、耗材ABIPRISM7700 型号系列检测系统实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂以 50ul 反应体系为例。Platinum Quantitative PCR Super Mix-UDG(Invitrogen11730-025) 25ulROX 染料(Invitrogen12223012) &nbs......阅读全文

实时 PCR 实验

            试剂、试剂盒 PCR Super Mix-UDG ROX 染料 蒸馏水 反向引物 正向引物 仪器

实时 PCR 实验

本方法运用 PlatinumQuantitativePCRSuperMix-UDG。进行实时 PCR 时,应该有一套设备可以检测每次 PCR 循环时释放的荧光信号。并且还能检測 FAM 和 JOE 激发后分别释放出的 520mn 和 550nm 的发射波。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作

实时 PCR 实验

试剂、试剂盒 PCR Super Mix-UDGROX 染料蒸馏水反向引物正向引物仪器、耗材 ABIPRISM7700 型号系列检测系统实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂以 50ul 反应体系为例。Platinum Quantitative PCR Super Mix-UDG(Invitro

多元实时 PCR 实验

试剂、试剂盒 PCR Super Mix-UDGROX 染料蒸馏水反向引物正向引物 仪器、耗材 ABIPrism7700型号系列检测系统 实验步骤 一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 以50ul反应体系为例。 Platinum Quantitative PCR Su

多元实时 PCR 实验

多元实时 PCR 时,在一个反应管中加入不同标记的成对引物,从而可以同时分析多个不同的基因。在许多反应中,用 JOE 标记看家基因对模板定量,用 FAM 标记目的基因,证明 LUX 引物非常有效。在标准的多元体系中,使用的引物浓度和加入的体积与进行一元反应时相同,如下。本实验来源于 PCR 实验指南

多元实时 PCR 实验

            试剂、试剂盒 PCR Super Mix-UDG ROX 染料 蒸馏水 反向引物 正向引物 仪器

实时 PCR 的参数实验

LUX 引物用 FAM(6-羧基荧光素)或 JOE(6-羧基-4',5'-二氯-2',7'-二甲氧基荧光素)标记。在没有特异模板的反应中,LUX 引物可以对 100 个拷贝或更少的目的基因进行定量,定量范围可以从不足 100 到 107 个拷贝。运用 FAM 和 JO

实时 RT-PCR 实验

试剂、试剂盒 RNA 模板DNA 酶缓冲液 DNA 酶 IDEPC 处理的水oligo(dT)MgCl2 dNTPEDTA实验步骤 —、材料1. 缓冲液、溶液和试剂①10ul 消化体系的组分。RNA 模板(最多 1ug/10ul)                             xul10X

实时 PCR 的参数实验

            试剂、试剂盒 LUX引物 单链或双链的 DNA 或 cDNA Mg2+ dNTP 热启动酶

实时 RT-PCR 实验

本方法使用Superscription反转录系统合成cDNA。进行实时PCR时,FAM或JOE荧光基团既可以标记正向引物,也可以标记反向引物。可以用Trizol试剂提取RNA或按第10章描述的方法提取RNA。样品中的基因组DNA用DNaseI消化掉(参照第10章)。本实验来源于PCR实验指南(第二版