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蛋白质印迹实验——从SDS凝胶上转移蛋白质

蛋白质印迹(protein blotting ) 也称为电泳转移(electropheretic transfer),即把从电泳或层析分离的蛋白转移到固定基质上的过程。固定基质通常是一些纸或膜。最通常的蛋白质印迹是将从聚丙烯酰胺凝胶电泳上分离的蛋白质分子转移到硝化纤维素膜上。本实验来源「蛋白质电泳实验技术」主编:郭尧君。试剂、试剂盒甘氨酸TrisSDS甲醇实验步骤1. 溶液配置(1) 连续缓冲系统甘氨酸 39 mmol/L;Tris 48 mmol/L;SDS 0.0375% ( W/V);甲醇 20% (V/V)。溶液均需用双蒸水配置。这个缓冲系统可用作阳极缓冲液,也可用作阴极缓冲液。(2) 不连续缓冲系统阳极缓冲液Ⅰ:0.3 mol/L Tris,pH 10.4,20% 甲醇。阳极缓冲液Ⅱ:25 mmoI/L Tris,pH 10.4,20% 甲醇。阴极缓冲液:4 mmol/L 6-氨基-n-己酸,pH 7.6,20% 甲醇......阅读全文

蛋白质印迹实验——从SDS凝胶上转移蛋白质

蛋白质印迹(protein blotting ) 也称为电泳转移(electropheretic transfer),即把从电泳或层析分离的蛋白转移到固定基质上的过程。固定基质通常是一些纸或膜。最通常的蛋白质印迹是将从聚丙烯酰胺凝胶电泳上分离的蛋白质分子转移到硝化纤维素膜上。本实验来源「蛋白质电泳实

蛋白质印迹实验——从琼脂糖凝胶上转移蛋白质

试剂、试剂盒甘氨酸TrisSDS甲醇实验步骤1. 溶液配置不连续缓冲系统阳极缓冲液Ⅰ:0.3 mol/L Tris,pH 10.4。阳极缓冲液Ⅱ:25 mmol/L Tris,pH 10.4。阴极缓冲液:40 mmol/L 6-氨基-n-己酸,pH 7.6。2. 转移单元的组成SDS 凝胶转移单元的

蛋白质印迹实验——从等电聚焦凝胶上转移蛋白

试剂、试剂盒甘氨酸TrisSDS甲醇实验步骤1. 溶液配置不连续缓冲系统阳极缓冲液Ⅰ:0.3 mol/L Tris,pH 10.4。阳极缓冲液Ⅱ:0.1 mol/L Tris,pH 10.4。阴极缓冲液:0.1 mol/L 精氨酸,0.01% ( W/V)SDS,pH 10.5。SDS 的存在有利于

蛋白质的单向SDS凝胶电泳实验

Laemmli凝胶电泳法 无尿素条件下用Tris缓冲液分离多肽 连续SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 超薄凝胶的灌制和电泳 均一浓度的微型凝胶电泳 制备多块梯度胶      

蛋白质的单向SDS凝胶电泳实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 Tris·ClSDS仪器、耗材 电泳仪离心机真空泵实验步骤 1.  按厂商的使用指南用两块干净的玻璃平板和0.75 mm 垫片组装电泳装置中的玻璃平板夹层,并固定在灌胶支架上2.  配置分离胶液体并脱气,然后加10%的过硫酸铵和TEMED,轻轻搅拌混匀。3.  用一根巴

蛋白质印迹实验

从SDS凝胶上转移蛋白质 从琼脂糖凝胶上转移蛋白质 从等电聚焦凝胶上转移蛋白 检测             试剂、试剂盒

蛋白质印迹实验

试剂、试剂盒 甘氨酸TrisSDS甲醇实验步骤 1. 溶液配置(1) 连续缓冲系统甘氨酸 39 mmol/L;Tris 48 mmol/L;SDS 0.0375% ( W/V);甲醇 20% (V/V)。溶液均需用双蒸水配置。这个缓冲系统可用作阳极缓冲液,也可用作阴极缓冲液。(2) 不连续缓冲系统阳

方案14 电印迹膜上的蛋白质消化实验

实验材料含有电泳分离的目标蛋白质的凝胶试剂、试剂盒乙酸胺黑(Amido Black)10B染料(0.1%)的水溶液 乙酸 甲醇消化缓冲液NaOH丽春红S染料PVP-40仪器、耗材电印记装置小离心管硝酸纤维膜或 PVDF 膜RP-HPLC 层析柱实验步骤一、电印迹和染蛋白1.将蛋白质电印迹到硝酸纤维膜

蛋白质的单向SDS凝胶电泳实验——Laemmli凝胶电泳法

电泳可用于分离复杂的蛋白质混合物,研究蛋白质的亚基组成以及证实蛋白质的均一性等,还能纯化出蛋白质用于后续的研究工作。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,凝胶的孔径,蛋白质的电荷、大小、性质等因素共同决定了蛋白质的电泳迁移率。实验材料蛋白质试剂、试剂盒Tris·ClSDS仪器、耗材电泳仪离心机真空泵实验步骤1.

蛋白质的单向SDS凝胶电泳实验——超薄凝胶的灌制和电泳

实验材料蛋白质试剂、试剂盒乙醇仪器、耗材电泳仪垫片样品梳实验步骤1.  用水性实验室去污剂彻底洗擦制胶用玻璃平板,接着用热水、去离子水、95%乙酵依次冲洗,晾干。 2.  用粘胶棒在玻璃平板的底部边缘擦上一道粘痕,快速地将Gel Bond 胶片以疏水面向下放在平板上,隔着kimswipe纸巾用力压,