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大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验——酶消化法

实验材料小鼠试剂、试剂盒酒精解剖液胰蛋白酶DMEM F12B27阿糖胞苷培养液仪器、耗材培养箱实验步骤一、小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤1. 于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1 min,解剖出完整鼠脑。2. 预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗,用眼科剪将皮质反复剪切成碎块。3. 移入培养皿中,吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2 ml,37℃培养箱中消化30 min。4. 将皮层组织碎块移入离心管,弃去剩余消化液,用接种液洗3次,每次洗涤后使组织块充分沉降到试管底,弃去上清液。5. 最后再用接种液1 ml混悬,反复吹打(巴氏吸管)混悬液中组织块,力度适中,至浑浊后将上清液移入培养瓶待用。6. 加入1ml接种液后再次吹打,如此反复3-4次,组织块逐渐消化后,弃去最终残块。7. 收集含单细胞悬液的上清液约4-5 ml于培养瓶中,以接种......阅读全文

大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验——酶消化法

实验材料小鼠试剂、试剂盒酒精解剖液胰蛋白酶DMEM F12B27阿糖胞苷培养液仪器、耗材培养箱实验步骤一、小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤1.  于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1 min,解剖出完整鼠脑。2.  预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗,用眼科剪将皮质反复剪切成碎块。3.

大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验

机械性划割培养 酶消化法             实验方法原理 SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d ,微量移液器塑料滴头于培

大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验

机械性划割培养 酶消化法             实验方法原理 SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d ,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同

大鼠大脑皮层神经元细胞培养

实验方法原理 SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d ,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同分为轻、中、重3组,对照组除不进行机械性划割,其余处理同损伤组,伤后不同时间点(10,30 min , 1,3,6,12,24 h)检测细胞存活率及培养液上清乳酸脱氢酶(

大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法

大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hanks'液及缺

大鼠星型胶质细胞培养实验——胰酶消化法

实验材料SD大鼠试剂、试剂盒苯巴比妥解剖液胰蛋白酶DnaseDM培养液仪器、耗材离心管培养箱手术器材实验步骤一、 取14.5d SD大鼠一只。二、 苯巴比妥0.5 ml 腹腔注射,待麻醉后置于手术台上,酒精棉球消毒皮肤,开腹取出子宫(约12-14个),放入解剖液中,剖开子宫,取出胚胎,放入解剖液中,

大鼠乳鼠成骨细胞培养实验_酶消化法

大鼠乳鼠成骨细胞培养培养用于:(1)获得大鼠乳鼠成骨细胞;(2)骨修复的细胞学机制研究。实验方法原理取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养

细胞技术专题:大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验

大鼠大脑皮层神经元细胞培养可以:(1)获得大鼠大脑皮层神经元细胞;(2)用于神经元细胞定向分化研究;(3)用于神经元细胞凋亡研究。实验方法机械性划割培养 酶消化法 实验方法原理SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同分为轻、中、重

大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验——机械性划割培养

实验方法原理 SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d ,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同分为轻、中、重3组,对照组除不进行机械性划割,其余处理同损伤组,伤后不同时间点(10,30 min , 1,3,6,12,24 h)检测细胞存活率及培养液上清乳酸脱氢酶(L

大鼠星型胶质细胞培养实验——胰蛋白酶消化法

实验材料大鼠胚胎试剂、试剂盒L-15培养基胶原酶DnaseD-MEM-BSFCS-DMEM阿糖胞苷仪器、耗材离心机水浴锅培养瓶培养箱实验步骤一、分离大鼠胚胎(16-18周)新皮层,置于L-15(或Hank's平衡盐/DMEM溶液,无Hepes)培养基中,除去脑膜和血管、海马、尾核和其他非皮层