激酶的动力学实验_Km和Vmax的确定
实验材料蛋白底物试剂、试剂盒ATP仪器、耗材分析试管实验步骤1. 准备三套分析试管，分别含有不同量的每种蛋白底物，使 ATP 浓度保持在饱和浓度。2. 进行激酶测定。3. 进行使 ATP 浓度变化，蛋白饱和浓度不变的实验。4. 一旦知道了蛋白底物和 ATP 的 Km 和 Vmax 值，就用这个数据去设计酶/底物对的最佳实验条件。展开......阅读全文
激酶的动力学实验_Km和Vmax的确定
实验材料蛋白底物试剂、试剂盒ATP仪器、耗材分析试管实验步骤1. 准备三套分析试管，分别含有不同量的每种蛋白底物，使 ATP 浓度保持在饱和浓度。2. 进行激酶测定。3. 进行使 ATP 浓度变化，蛋白饱和浓度不变的实验。4. 一旦知道了蛋白底物和 ATP 的 Km 和 Vmax 值，就用这个数据去
激酶的动力学实验
Km和Vmax的确定 实验材料 蛋白底物 试剂、试剂盒
米氏方程的定义和表达式
米氏方程（Michaelis-Menten equation）表示一个酶促反应的起始速度（v）与底物浓度（S）关系的速度方程，v＝VmaxS/（Km+S）。酶促反应动力学简称酶动力学，主要研究酶促反应的速度以及其它因素，例如抑制剂等对反应速度的影响。在酶促反应中，在低浓度底物情况下，反应相对于底物是
底物浓度对催化反应速度的影响－_二硝基水杨酸法
实验方法原理根据Michaelis-Menten 方程: 可以得到Lineweaver-Burk 双倒数值线方程: 在 1/ V 纵轴上的截距是1/ Vmax , 在1/ [ S ] 横轴上的截距是- 1/ Km 。 测定Km 和Vmax , 特别是测定Km , 是酶学研究的基本内容之一, Km
底物浓度对催化反应速度的影响及米氏常数Km
二硝基水杨酸法 实验方法原理 根据Michaelis-Menten 方程: 可以得到Lineweaver-Burk 双倒数值线方程: 在
酶促反应动力学（一）
酶促反应动力学(kinetics of enzyme-catalyzed reactions)是研究酶促反应速度及其影响因素的科学。这些因素主要包括酶的浓度、底物的浓度、pH、温度、抑制剂和激活剂等。在研究某一因素对酶促反应速度的影响时，应该维持反应中其它因素不变，而只改变要研究的因素。
底物浓度对催化反应速度的影响及米氏常数Km－和最大－...
底物浓度对催化反应速度的影响及米氏常数Km 和最大 反应速度Vmax的测定实验实验方法原理 根据Michaelis-Menten 方程: 可以得到Lineweaver-Burk 双倒数值线方程: 在 1/ V 纵轴上的截距是1/ Vma x , 在1/ [ S ] 横轴上的截距是- 1/ Km 。
米氏常数的计算方法
Km即是当反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。从v—[s]矩形双曲线上可得V，再从V/2处可求得Km值，但实际上，即使用很大的底物浓度，也只能得到趋近于V的反应速度，而达不到真正的V，因此测不到准确的Km值，为了得到准确的Km值，可以把米氏方程式加以改变，使之成为斜截式：y=kx+b的直线方程，
葡糖激酶酶动力学特征和催化功能
GK作为独特的单体变构酶,与葡萄糖结合后,酶的构象发生改变,新构象有利于后续葡萄糖与酶结合及酶亲和度的提高,希尔系数为1.7(希尔系数>1为正协同,即一个葡萄糖分子与GK结合,GK对其他葡萄糖分子亲和度增加),因而出现同促正协同作用,葡萄糖动力学曲线为“S”型,底物葡萄糖浓度较低时,酶活性增长缓慢,
测抑制剂IC50，酶浓度怎么确定
如果只是IC50，一个底物浓度就够了。但是IC50会随底物浓度的变化而变化，所以你要指定一个底物的浓度，发表IC50的时候要注明你底物的浓度。这个浓度如果没有任何依据的随意指定一个，感觉上就会不专业。如果你已经有其它人关于这个酶和其它抑制剂的资料(并且上面详细注明了所用的酶和底物的浓度，还有对底物的
米氏常数（Km）和最大反应速度（Vm）的测定
酸性磷酸酯酶动力学性质分析米氏常数（Km）和最大反应速度（Vm）的测定[原理]在温度、pH及酶浓度恒定的条件下，底物浓度对酶促反应的速度有很大的影响。在底物浓度很低时，酶促反应的速度（v）随底物浓度的增加而迅速增加；随着底物浓度的继续增加，反应速度的增加开始减慢；当底物浓度增加到某种程度时，反应速度
酶促反应动力学
一、酶促反应1913年，Michaelis和Menten根据Henri等提出的酶-底物复合物学说，用简单的快速平衡或准平衡概念推导了单底物的酶促反应方程，即米-曼氏方程（Michaelis-Menten equation）。酶促反应可表示为：k1 k2 E + S ------------- ES
酶促反应动力学
一、酶促反应1913年，Michaelis和Menten根据Henri等提出的酶-底物复合物学说，用简单的快速平衡或准平衡概念推导了单底物的酶促反应方程，即米-曼氏方程（Michaelis-Menten equation）。酶促反应可表示为： k1 k2
关于葡糖激酶的酶动力学特征和催化功能介绍
GK作为独特的单体变构酶,与葡萄糖结合后,酶的构象发生改变,新构象有利于后续葡萄糖与酶结合及酶亲和度的提高,希尔系数为1.7(希尔系数>1为正协同,即一个葡萄糖分子与GK结合,GK对其他葡萄糖分子亲和度增加),因而出现同促正协同作用,葡萄糖动力学曲线为“S”型,底物葡萄糖浓度较低时,酶活性增长缓
酶促反应动力学
一、酶促反应1913年，Michaelis和Menten根据Henri等提出的酶-底物复合物学说，用简单的快速平衡或准平衡概念推导了单底物的酶促反应方程，即米-曼氏方程（Michaelis-Menten equation）。酶促反应可表示为： k
酶促反应动力学
一、酶促反应1913年，Michaelis和Menten根据Henri等提出的酶-底物复合物学说，用简单的快速平衡或准平衡概念推导了单底物的酶促反应方程，即米-曼氏方程（Michaelis-Menten equation）。酶促反应可表示为： k
竞争性抑制剂的概念解析
如果抑制剂浓度恒定，则在低底物浓度([S])时抑制作用最为明显，增大[S]，抑制作用随之降低，直到[s]增大至很浓时，抑制作用近于消失，达到未加抑制剂时的最大反应速度(Vmax)水平，其动力学特征是：表观反应常数(Km)增大、Vmax不变。抑制程度只与抑制剂浓度有关。典型的例子如丙二酸和草酰乙酸对琥
酶的应用动力学
酶动力学是研究酶结合底物能力和催化反应速率的科学。研究者通过酶反应分析法（enzyme assay）来获得用于酶动力学分析的反应速率数据。1902年，维克多·亨得利提出了酶动力学的定量理论； 随后该理论得到他人证实并扩展为米氏方程。 亨利最大贡献在于其首次提出酶催化反应由两步组成：首先，底物可逆地结
米氏常数的的意义与应用
米氏常数在酶学和代谢研究中均为重要特征数据 。（1）同一种酶如果有几种底物，就有几个Km，其中尾值最小的底物一般称为该酶的最适底物或天然底物。不同的底物有不同的Km值，这说明同一种酶对不同底物的亲和力不同。一般用1/Km近似地表示酶对底物亲和力的大小，1/Km愈大，表示酶对该底物的亲和力愈大，酶促
米氏常数的意义与应用
米氏常数在酶学和代谢研究中均为重要特征数据 。(1)同一种酶如果有几种底物，就有几个Km，其中尾值最小的底物一般称为该酶的最适底物或天然底物。不同的底物有不同的Km值，这说明同一种酶对不同底物的亲和力不同。一般用1/Km近似地表示酶对底物亲和力的大小，1/Km愈大，表示酶对该底物的亲和力愈大，酶促反
非竞争性抑制的基本特点
⑴ 非竞争性抑制剂的化学结构不一定与底物的分子结构类似；⑵ 底物和抑制剂分别独立地与酶的不同部位相结合；⑶ 抑制剂对酶与底物的结合无影响，故底物浓度的改变对抑制程度无影响；⑷ 动力学参数：Km值不变，Vmax值降低。
反竞争性抑制对米氏反应动力学的影响
抑制剂存在时，对米氏方程的修正为:V0=Vmax[S]/(Km+α'[S])α'=1+[I]/Ki由上述式知，反竞争性抑制剂会改变酶对底物的Km，km减小，在底物浓度较低时，[S]Km，V0=Vmax/α'，减小了反应理论的最大速率Vmax，表现为"酶量减少"。双倒数作图处理
关于葡萄糖激酶的酶动力学特征和催化功能介绍
GK作为独特的单体变构酶,与葡萄糖结合后,酶的构象发生改变,新构象有利于后续葡萄糖与酶结合及酶亲和度的提高,希尔系数为1.7(希尔系数>1为正协同,即一个葡萄糖分子与GK结合,GK对其他葡萄糖分子亲和度增加),因而出现同促正协同作用,葡萄糖动力学曲线为“S”型,底物葡萄糖浓度较低时,酶活性增长缓
脲酶Km值的简易测定
步骤1.脲酶的提取：称取大豆粉1克，加入30%的乙醇25mL，充分摇匀后，置于冰箱中过夜，次日用2000rpm离心3分钟，取上清液备用。2.标准曲线的制作：按下表加入各种试剂单位：mL立即摇匀各管，于460nm下比色，1号管为参比。3.酶促反应速度的测定：按下表操作
关于酮戊二酸脱氢酶的基本介绍
酮戊二酸脱氢酶（oxoglutarate dehydrogenase complex，缩写OGDC）是一个复合酶，因其在三羧酸循环中的作用而众所周知。 一、代谢途径 此酶参与三种不同的代谢途径 三羧酸循环 赖氨酸降解 色氨酸代谢 二、动力学特性 下列酶参数的值源自棕色固氮菌: K
乙酸激酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 ATP：乙酸磷酸转移酯（AK）乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶（PK）偶联，乳酸脱氢酶（LDH）反应如下：
乙酸激酶的测定实验
实验方法原理ATP：乙酸磷酸转移酯（AK）乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶（PK）偶联，乳酸脱氢酶（LDH）反应如下：实验材料酶样品试剂、试剂盒三乙醇胺-HCl KOH乙酸钠ATPMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸LDHPK仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.
中性粒细胞碱性磷酸酶快速染色法的研究(2)
三、讨论 碱性磷酸酶(ALP)催化β-甘油磷酸钠生成甘油和无机磷酸根，AMP作为磷酸基受体，能不断结合磷酸根，加快正向反应速度。磷酸基受体在酶上有结合位点，且遵循Michatelis-Menten动力学，在ALP的催化机理中，转磷酸反应比磷酸水解反应拥有更高的Vmax，因此ALP更易将磷酸根转
米氏方程的方程意义
①当ν=Vmax/2时，Km=[S]。因此，Km等于酶促反应速度达最大值一半时的底物浓度。②当k-1>>k+2时，Km=k-1/k+1=Ks。因此，Km可以反映酶与底物亲和力的大小，即Km值越小，则酶与底物的亲和力越大；反之，则越小。③Km可用于判断反应级数：当[S]100Km时，ν=Vmax，反应
激酶的作用和特性
“激酶”的本意指的是使底物分子“激动”的酶，所以一般指从一个三磷酸核苷转移磷酸基至受体分子的酶，底物分子通过这个磷酸基的转移获得能量而被激活（变得更不稳定），所以很多的激酶需要从ATP转移磷酸基。激酶有时也可以由AMP及焦磷酸转移磷酸基，虽然一般来说，AMP和焦磷酸不能称之为高能化合物，但是“高能”