蛋白质糖基化检测实验_生物素亲和素复合物观察糖蛋白
用生物素-亲和素复合物观察选择性标记糖蛋白实验材料蛋白样品试剂、试剂盒醋酸钠丙酮实验步骤一、过碘酸钠氧化糖蛋白样品1. 在 0.1 mol/L 醋酸钠 pH 4.5 缓冲液（50 mmol/L 磷酸钠，pH 7.4 ) 中制备蛋白溶液，在冰上预冷。2. 用水制备新鲜的 0.5 mol/L 过碘酸钠原液，暗处保存，并在冰上预冷。3. 加足够新鲜的过碘酸原液至蛋白样品中使成至 10 mmol/L ( 1 mmol/L )。4. 在室温下避光保存 1 小时，或在 4℃ 保存 4~24 小时（冰上 30 分钟）。5. 加入 1/10 体积的 0.5 mol/L 1，2-亚乙基二醇终止反应。6. 用 TCA/DOC 沉淀蛋白，按照 PNGaseF 方案第4步所述进行。7. 冷丙酮清洗沉淀物两次。或者通过对 PBS 透析去除 1，2-亚乙基二醇。至此，样品可以进行生物素化。二、用生物胞素酰肼生物素化醛基1. 在 DMSO ( 或 DMF) ......阅读全文
蛋白质糖基化检测实验_生物素-亲和素复合物观察糖蛋白
用生物素-亲和素复合物观察选择性标记糖蛋白实验材料蛋白样品试剂、试剂盒醋酸钠丙酮实验步骤一、过碘酸钠氧化糖蛋白样品1. 在 0.1 mol/L 醋酸钠 pH 4.5 缓冲液（50 mmol/L 磷酸钠，pH 7.4 ) 中制备蛋白溶液，在冰上预冷。2. 用水制备新鲜的 0.5 mol/L 过碘酸钠原
蛋白质糖基化的检测实验——植物凝集素亲和层析
试剂、试剂盒TBS仪器、耗材植物凝集素柱实验步骤1. 在含有 Ca2+、Mg2+ 的 TBS 中平衡植物凝集素亲和介质，用至少 20 个柱体积清洗。2. 在 5 ml —次性塑料吸管或注射器中制备 1 ml 植物凝集素柱。3. 以缓慢流速（小于 0.25 ml/min）将蛋白样本上柱，回收所有过柱子
生物素亲和素标记缺点
灵敏度生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合，形成的生物素衍生物，不仅保持了大分子物质的原有生物活性，而且比恬度高，具多价性。此外，每个亲和素分子有四个生物素结合部位，可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此，BAS具有多级放大作用，使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异
生物素-亲和素系统介绍
生物素－亲和素系统（Biotin-Avidin—System，BAS）是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大效应，使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。BAS目前已广泛用于抗原、抗体的定性、定量检测及定位观察研究。生物素（biotin，B）
标记亲和素生物素法（BA-ELISA）实验——检测未知抗原
实验方法原理亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白，对生物素有非常高的亲和力（结合常数高达1015M-1）。生物素很易与蛋白质（如抗体等）以共价键结合。这样，结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应，既起到了多级放大作用，又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色，达到检测未知抗原（
标记亲和素生物素法（BA-ELISA）实验——检测未知抗体
实验方法原理包被抗原：用0.05 mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液将已知的抗原作适当稀释，于聚苯乙烯酶标板的孔中加0.1 ml，于4 ℃放置18～24 h。用洗涤缓冲液洗3次，每次3 min。 加样：加适当稀释的待检样品（未知抗体）于反应孔中，同时作空白、阴性和阳性对照孔。37 ℃孵育1 h，洗涤
免疫印迹与免疫检测实验——亲和素-生物素偶联
实验材料蛋白质试剂、试剂盒TTBS缓冲液TBS缓冲液过氧化物酶碱性磷酸酶仪器、耗材摇床硝酸纤维素膜尼龙膜实验步骤1. 在旋转摇床或摆动平台中持续摇动使膜与合适的封闭液平衡。对于硝酸纤维素膜或PVDF膜，需在室温封闭30~60 min。尼龙膜则需在37℃封闭2 h。2. 用TTBS溶液（用于硝酸纤
植物蛋白质组学和糖基化实验（一）
实验材料 链霉亲和素-过氧化物酶牛胰核糖核酸酶 B甲基比喃甘露糖苷卵清白蛋白试剂、试剂盒 DIG 糖链检测试剂TTBS 缓冲液Lectin- biotinTBS 缓冲液实验步骤 3.1 这个蛋白质是糖蛋白吗只有一种方法能全面的回答“这个蛋白质是糖蛋白吗?”这个问题。这需要使用能检测并定量印记上糖蛋白
标记亲和素生物素法（BA-ELISA）实验
检测未知抗原 检测未知抗体 实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白，对生物素有非常高的亲和力（结合常数高达1015M-1）。
标记亲和素生物素法（BA-ELISA）实验
实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白，对生物素有非常高的亲和力（结合常数高达1015M-1）。生物素很易与蛋白质（如抗体等）以共价键结合。这样，结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应，既起到了多级放大作用，又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色，达到检测未知抗原