染色体分离实验—水相法分离染色质

实验材料细胞试剂、试剂盒水相裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤1. 像聚胺法的第 1、2 步中讲的那样诱导悬浮或单层培养细胞的中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃,1000 g 离心 10 分钟然后重悬浮,典型的制备量为 10 ml 新鲜培养基含 108 个细胞。3. 将浓的细胞悬液在冰上放置至少 30 分钟冷却以帮助有丝分裂复合物的完全解离。4. 4℃ 1000 r/min 离心 10 分钟沉淀细胞。5. 沉淀用 10 ml 75 mmol/L 的 KCI 重悬浮,4℃ 孵育 20 分钟进行低渗溶胀。6. 4℃ 1000 r/min 离心溶胀细胞。7. 将细胞重悬浮于 10 ml 的水相裂解缓冲液中,温和揽拌,冰上放置 5 分钟。水相裂解缓冲液:10 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.4)120 mmol/L KCl20 mmol/L NaCl0.1 % Triton X-100含 2 mmol/L CaCl......阅读全文

染色体分离实验—水相法分离染色质

实验材料细胞试剂、试剂盒水相裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤1. 像聚胺法的第 1、2 步中讲的那样诱导悬浮或单层培养细胞的中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃,1000 g 离心 10 分钟然后重悬浮,典型的制备量为 10 ml 新鲜培养基含 108 个细胞。3. 将浓的细胞悬液在冰上放置至少 30

水相法分离染色质

水相法分离染色质试剂、试剂盒:水相裂解缓冲液仪器、耗材:离心机实验步骤:像聚胺法的第 1、2 步中讲的那样诱导悬浮或单层培养细胞的中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃,1000 g 离心 10 分钟然后重悬浮,典型的制备量为 10 ml 新鲜培养基含 108 个细胞。3. 将浓的细胞悬液在冰上放置至少

染色体分离实验——聚胺法分离染色质

实验材料细胞试剂、试剂盒秋水仙胺聚胺缓冲液实验步骤有丝分裂中细胞的同步化1. 37℃,用合适的含有 FCS,抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的浓度加入秋水仙胺。收获细胞并在聚胺缓冲液中裂解3. 收获细胞。对于悬浮培养

染色体分离实验——用己二醇法分离中期染色质

实验材料细胞试剂、试剂盒己二醇缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 按聚胺法第 1 和 2 步中所述诱导 500 ml 悬浮或单层培养细胞为中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃ 1000 r/min 离心 10 分钟,用 10 ml 培养基重悬浮。3. 将重悬浮的细胞冷却至 4℃ 放置 20

染色体分离实验——Percoll梯度法

实验材料染色质试剂、试剂盒精胺精咪Percoll 溶液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 在体积为 10 ml 分离得到的染色质物质中加入精胺和精咪至终浓度分別为 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液,匀浆分离得到的染色质。Percoll 溶液:

染色体分离实验——甘油梯度法

实验材料染色质试剂、试剂盒甘油 染色质分离缓冲液溶液仪器、耗材JS-13 转桶式转头实验步骤1. 准备 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%(v/v)甘油/染色质分离缓冲液溶液。2. 用 JS-13 转桶式转头在 4℃,1000 r/min 离心 50 分钟进行染色质梯度沉降

聚胺法分离染色质

聚胺法分离染色质试剂、试剂盒:秋水仙胺、聚胺缓冲液实验步骤:有丝分裂中细胞的同步化37℃,用合适的含有 FCS,抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的浓度加入秋水仙胺。收获细胞并在聚胺缓冲液中裂解3. 收获细胞。对于悬浮

染色体分离实验——蔗糖梯度纯化法

实验材料染色质粗品试剂、试剂盒蔗糖分离缓冲液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 准备两种 18ml,浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液(聚胺,水相或己二醇法的缓冲液),然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中,用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品溶液轻轻

染色体分离实验

聚胺法分离染色质 水相法分离染色质 用己二醇法分离中期染色质 蔗糖梯度纯化法 Percoll梯度法 甘油梯度法            

己二醇法分离中期染色质

试剂、试剂盒:己二醇缓冲液仪器、耗材:Dounce 匀浆器实验步骤:按聚胺法第 1 和 2 步中所述诱导 500 ml 悬浮或单层培养细胞为中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃ 1000 r/min 离心 10 分钟,用 10 ml 培养基重悬浮。3. 将重悬浮的细胞冷却至 4℃ 放置 20 分钟。4.

分离核仁实验——高镁法分离核仁

实验材料细胞试剂、试剂盒Dulbecco’s 盐溶液蔗糖核仁保存液仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液Dulbecco’s 盐溶液:0.136 mol/L NaCl2.6 mmol/L KCl8 mmol/L Na2HPO41.4 mmol/L KH2PO4,pH 7.0蔗糖 A

组织的分离实验_离心分离法

实验方法原理如培养物为血液、羊水、腹水和胸水等细胞悬液时,可采用离心法分离。一般用低速500~1000 转/分速度,离心5~10 分钟即可。如悬液量大,离心时间可适当延长,但如离心速度过大和时间太长,易压挤细胞使之受损或死亡。微量全血法淋巴细胞培养时,可不必进行淋巴细胞分离,可采用全血培养法。在需用

组织的分离实验_EDTA-消化分离法

实验方法原理EDTA是一种非酶性消化物,常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。关于EDTA的作用机制一般认为是:一些组织,尤其是上皮组织,在生存中需要Ca2+和Mg2+才能维持组织的完整性。EDTA能从这些组织生存环境中吸收这些离子,形成螯合物,能促进细胞相互分离。EDTA 作

染色体相邻分离

中文名称相邻分离英文名称adjacent segregation定  义染色体平衡易位携带者相互易位杂合子,在粗线期由于同源染色体紧密配对形成特异的“十字形”图像,并在相继的分裂过程中十字形图像逐渐开放形成环形,相邻的两条染色体分离至同一极,即称相邻分离。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级

【锐赛小课题】染色体分离实验

  一、聚胺法分离染色质   试剂、试剂盒:秋水仙胺、聚胺缓冲液   实验步骤:   有丝分裂中细胞的同步化   1. 37℃,用合适的含有 FCS,抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。   2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的

微生物分离纯化实验——平板划线分离法

实验方法原理该方法操作简便,普通用于微生物的分离与纯化。其基本原理包括两方面:1. 选择适合于待分离微生物的生长条件,如营养、酸碱度、湿度和氧等要求或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长,而抑制其他微生物生长的环境,从面淘汰一些不需要的微生物。2. 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个

双水相体系用于生物分子的分离

  双水相体系是一种高效的萃取体系,由于离子液体的可设计性,基于离子液体的双水相体系应用更加广泛。理想的双水相体系应具有优异相分离行为、较低粘度和高效萃取效率等特性,完全的两相分离是实现高选择性萃取的前提。然而在无机盐存在下,离子液体会出现盐析现象。浙江大学邢华斌教授课题组通过可逆加成-断裂链转移聚

分离核仁实验——分离核仁

实验材料肝脏试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 制备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖,3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖,10 mmol/L MgCl

组织的分离实验_胶原酶消化分离法

实验方法原理胶原酶是一种由细菌中提取出的酶,对胶原有很强的消化作用,适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织等。上皮细胞本身对胶原酶有一定耐性,但胶原酶对细胞间质有好的消化作用,可使上皮细胞与胶原成分脱离而不受伤害,效果甚好。此酶在钙和镁离子存在情况下仍有活性,故可用BSS和含有血清的培养液配制。实验

微生物分离纯化实验——简易单孢子分离法

实验方法原理简易单孢子分离法是一种不需显微单孢操作器,直接在普通显微镜下利用低倍镜分离单孢子的方法。它采用很细的毛细管吸取较稀的萌发的孢子悬浮液滴在培养皿盖的内壁上,在低倍镜下逐个检查微滴。将只含有一个萌发孢子的微滴放一小块营养琼脂片,使其发育成微菌落。再将微菌落转移到培养基中,即可获得仅由单个孢子

气相色谱法的分离原理

答:气相色谱法的分离原理就是利用样品中各组分在流动项和固定项中吸附力或溶解度不同,也就是说分配系数不同。当两项相对运动时,样品各组分在两项间也就不一样。分配系数小的组分会较快大流出色谱柱,分配系数越大的组分就越易滞留在固定相内,流过色谱柱的速度较慢。这样一来,当流经一定的柱长后,样品中各组分得到了分

染色体相邻分离2

中文名称相邻分离-2英文名称adjacent-2 segregation定  义相互易位杂合子组成的“十字形”的四条染色体,在后期I分离时,上半部的左(正常)、右(易位)两条相邻染色体和下半部左(易位)、右(正常)两条相邻染色体分别移至两极的分离过程。所形成的配子一般是致死的。应用学科遗传学(一级学

染色体的相间分离

中文名称相间分离英文名称alternate segregation定  义相互易位杂合子减数分裂过程中形成了具双环“8”形染色体的结构,两条非邻近染色体走向一极,另两条非邻近染色体走向另一极,也就是两条正常染色体走向一极,两条易位的染色体走向另一极的分离过程。这样所形成的配子都具有完整的染色体组,是

染色体分离的概念

中文名称染色体分离英文名称segregation of chromosome定  义减数分裂中,成对的同源染色体彼此分开的过程。导致每个配子只获得各对同源染色体中的一条。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞周期与细胞分裂(二级学科)

染色体相邻分离1

中文名称相邻分离-1英文名称adjacent-1 segregation定  义相互易位杂合子组成的“十字形”的四条染色体,在后期I分离时,左侧的上(正常)、下(易位)两条相邻染色体和右侧的上(易位)、下(正常)两条相邻染色体分别移至两极的分离过程。这样所形成的配子一般是致死的。应用学科遗传学(一级

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

实验材料切碎的大鼠肝脏试剂、试剂盒溶液 A蔗糖溶液 B仪器、耗材Doimce 氏玻璃匀浆器离心管折射仪SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管实验步骤材料与设备切碎的大鼠肝脏(约 25 g; 冷冻保存至用前)注:人的胎盘是极好的制取胰岛素受体的原料。遗憾的是

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

分离肝脏质膜的 Neville 法实验             实验材料 切碎的大鼠肝脏 试剂、试

实验中常用分离法介绍

蒸馏、升华、结晶、沉淀、溶剂萃取、离子交换、色谱分离、离心分离、电渗析、电化学分离方法、盐析。

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

实验材料 切碎的大鼠肝脏试剂、试剂盒 溶液 A 蔗糖溶液 B仪器、耗材 Doimce 氏玻璃匀浆器离心管 折射仪SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管实验步骤 材料与设备切碎的大鼠肝脏(约 25 g; 冷冻保存至用前)注:人的胎盘是极好的制取胰岛素受体的原

细菌平板划线分离培养法实验

(1)曲线划线分离法:此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。(2)分区划线分离法:此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养基的