兔多克隆抗血清的制备实验——肌肉内注射免疫法

实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1. 取2 ml 的弗氏完全佐剂加到2 ml 的溶于PBS的纯化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射针头,排出注射器中的气泡。 2. 将兔子敢在固定架上,用一只手抓住兔的颈背部毛皮,另一只手托住兔的后腿及臀部,将兔束紧固定以使后肢不能伸张,用70%乙醇对所要注射的区域进行清洁消毒,在后肢大腿肌肉内进针约1 cm 深,毎条大腿肌肉内最多注射0.5 ml 乳化液。 3. 四周后,用1 mg 的混溶干弗氏不完全佐剂的抗原乳化液(1:1)对兔进行肌肉内加强免疫注射,操作步骤同1和2,初次加强免疫后2周再次进行加強免疫注射。4. 第二次加强免疫注射10天后,从兔的耳缘静脉处放血。(1)先将兔固定在固定架上(固定紧),使其耳朵伸出,用70%乙醇洗洁消毒一侧耳朵。(2)将兔耳置......阅读全文

兔多克隆抗血清的制备实验——肌肉内注射免疫法

实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1.  取2 ml 的弗氏完全佐剂加到2 ml 的溶于PBS的纯化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射针头,排出注射器中的气泡。 2.  将兔子敢在固定架上,用一只手抓住兔的颈背部毛皮,另一只手托住兔

兔多克隆抗血清的制备实验——皮内注射免疫法

实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1.  按基本方案中步骤1制备免疫兔用的抗原。 2.  牢牢地抓住兔子,剃除其背毛,用70%乙酵消毒其暴露的皮肤。用拇指和食指将需要免疫注射的区域的皮肤张开,用3 ml 注射器带24G注射针头以相对皮肤30。的角度进针(针尖的斜

兔多克隆抗血清的制备实验——皮下组织注射免疫法

实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1.  准备用于注射家兔的抗原,并准备用于皮下注射免疫的家兔(方法同皮内注射)。2.  将家兔背部皮肤捏出,以远离其下的肌肉,用24G注射针头全程穿剌,进入皮下,小心勿刺入肌肉组织中,在4个不同的部位各注射0.5 ml 抗原。 

兔多克隆抗血清的制备实验

实验材料 抗原试剂、试剂盒 PBS乙醇仪器、耗材 注射针头注射器培养箱实验步骤 1.  取2 ml 的弗氏完全佐剂加到2 ml 的溶于PBS的纯化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射针头,排出注射器中的气泡。 2.  将兔子敢在固定架上,用一只手抓住兔的颈背部毛皮,另一只

兔多克隆抗血清的制备实验——耳动脉放血

实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1.  准备用于放血的家兔(见基本方案) 2.  将靠近家兔头部的半只耳朵托在梅指和食指上,用中指和无名指弯曲剩余的半只耳朵使之下垂,以便使血液随重力下流,用一个18G注射用针头(不带注射器)沿着兔耳中动脉进针,针尖指向兔耳根部

多克隆抗血清的制备

材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)家兔、大鼠、小鼠或合适品系的仓鼠弗 氏 完 全 佐 剂(CFA; Sigma)含 1〜2 mg/m l 纯化蛋白抗原的 PBS 溶液:吸取其中 10〜20 Mg,在考马斯亮蓝染色的 SDS-聚丙烯酰胺凝胶上分析未见有污染的条带VPBS弗 氏 不 完 全 佐 剂

多克隆抗血清的制备1

首要的问题是需要制备多克隆抗体还是单克隆抗体。多克隆抗体的优势在于可在多种不同生物种系中制备,花费精力较少。另外 ,多克隆抗体特别适用于分析变性蛋白质以及免疫沉淀法和免疫印迹法。作者:J.E.科利跟等,译者:曹雪涛等,本实验来自「精编免疫学实验指南」—使用弗氏佐剂制备多克隆抗体的免疫接种法实验步骤材

【卡梅德生物】兔多抗制备|兔多克隆抗体制备|兔抗体

  多克隆抗体是指由多种免疫细胞产生的针对特定抗原的抗体群体。与单克隆抗体相比,多克隆抗体可以识别抗原的多个表位,因此在某些应用中更为有效。兔是制备多克隆抗体的常用动物模型,因其体型适中、免疫反应良好且抗体产量高。  兔多抗(Polyclonal antibodies)是一种多克隆抗体,由多个B细胞

淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体制备技术3

抗体的制备方法与原理一、抗血清的制备  有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。  (一)用于免疫的动物  作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所

抗体的制备方法与原理

一、抗血清的制备  有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。  (一)用于免疫的动物  作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如

抗血清制备法生化检验

抗血清制备法:抗血清指含有抗体的血清。传统的抗血清制备方法是将某种抗原通过多次注入动物,数十天后或数月后,采集动物血,立即分离出血清。此抗血清在保存或应用前必须作效价和特异性鉴定及纯化。(一)免疫动物的选择免疫动物的选择基本要求:1.抗原与免疫动物的种属差异越远越好。2.动物必须适龄、健壮、无感染、

多克隆抗体制备实验_弗氏佐剂免疫法

抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定

多克隆抗体技术概述1

一、多克隆抗体的概念 抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。 抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(M

抗体的制备有哪些

(1)多克隆抗体的制备。①免疫方法:对多克隆抗体,免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。一般来说,皮下或肌肉免疫法产生的抗体比较多;皮内免疫法所需的抗原量少,在抗原宝贵时特别适用,但与之相对的,它产生的抗体量也不多。混合免疫法的优点是抗原用量小,产生抗体速度快。②多克隆

TH糖蛋白的抗体制备过程

将人尿THP作为抗原,免疫新西兰白兔制备抗人THP抗体。方法:每只兔每次用抗原量lmg,与等量完全Ferund佐剂混合,皮下、肌肉多点注射,每2周加强免疫1次,共3次。所得抗血清先经盐沉淀法粗提,后经离子交换层析法纯化。一纯化的抗血清,经双向免疫扩散法鉴定,结果显示与相应抗原呈高度特异性结合呈现一条

关于TH糖蛋白的抗体制备介绍

  将人尿THP作为抗原,免疫新西兰白兔制备抗人THP抗体。方法:每只兔每次用抗原量lmg,与等量完全Ferund佐剂混合,皮下、肌肉多点注射,每2周加强免疫1次,共3次。所得抗血清先经盐沉淀法粗提,后经离子交换层析法纯化。一纯化的抗血清,经双向免疫扩散法鉴定,结果显示与相应抗原呈高度特异性结合呈现

抗血清的制备的免疫程序有哪些?

1.免疫原的剂量:免疫原剂量过大或过小都可使动物产生免疫耐受,在一定剂量范围内,免疫原剂量越大,产生的抗体效价越高。2.免疫途径:有皮内、皮下、肌内、静脉、腹腔、淋巴结等途径。皮内或皮下免疫时一般采用多点注射。初次免疫一般选择皮内接种,加强免疫和颗粒性抗原一般选择静脉注射。宝贵抗原可选择淋巴结内微量

动物免疫实验

实验概要将某种蛋白注射新西兰大耳兔产生免疫反应,通过ELISA检测免疫产生的抗体。实验原理将抗原吸附在固相载体表面,加入抗血清,抗体和抗原在载体表面形成抗原-抗体复合物,洗去未结合抗体,然后加入辣根过氧化物酶标记的二抗(抗体的抗体),二抗与抗体结合,洗去未结合二抗,加底物显色剂显色,在一定波长下测定

动物免疫实验

实验概要将某种蛋白注射新西兰大耳兔产生免疫反应,通过ELISA检测免疫产生的抗体。实验原理将抗原吸附在固相载体表面,加入抗血清,抗体和抗原在载体表面形成抗原-抗体复合物,洗去未结合抗体,然后加入辣根过氧化物酶标记的二抗(抗体的抗体),二抗与抗体结合,洗去未结合二抗,加底物显色剂显色,在一定波长下测定

免疫球蛋白抗血清制备方法

免疫球蛋白抗血清制备方法此法用于制备间接法抗抗体。因抗原为可溶性,故多需加佐剂。(1)淋巴结注射法1)选择体重2~3Kg的健康雄性家兔( 2只以上),编号;2)在家兔两后脚掌共注射活卡介苗,50mg(约0.6mL.每只足庶部皮下0.1mL,皮内0.2mL)。7~10d后,鼠或国窝处淋巴结肿大如黄豆或

关于多克隆抗体免疫动物的介绍

  供免疫用的动物主要是哺乳动物和禽类,常选择家兔、绵羊、山羊、马、骡和豚鼠及小鼠等。动物的选择常根据抗体的用途和量来决定,也与抗原的性质有关。如要获得大量的抗体,多采用大动物;如要是获得直接标记诊断的抗体,则直接采用本动物;如要获得间接的标记诊断用抗体,则必须用异源动物制备抗体;如果难以获得的抗原

供免疫用的动物有哪些?如何应用?

供免疫用的动物主要是哺乳动物和禽类,常选择家兔、绵羊、山羊、马、骡和豚鼠及小鼠等。动物的选择常根据抗体的用途和量来决定,也与抗原的性质有关。如要获得大量的抗体,多采用大动物;如要是获得直接标记诊断的抗体,则直接采用本动物;如要获得间接的标记诊断用抗体,则必须用异源动物制备抗体;如果难以获得的抗原,且

抗血清的制备免疫程序知识点

1.免疫原的剂量:免疫原剂量过大或过小都可使动物产生免疫耐受,在一定剂量范围内,免疫原剂量越大,产生的抗体效价越高。2.免疫途径:有皮内、皮下、肌内、静脉、腹腔、淋巴结等途径。皮内或皮下免疫时一般采用多点注射。初次免疫一般选择皮内接种,加强免疫和颗粒性抗原一般选择静脉注射。宝贵抗原可选择淋巴结内微量

如何正确选择WB检测的抗体?

WB免疫印迹法,也称免疫转移技术IBT(Immunoblotting),是Towbin将1975年Southern发明的Soutnern blotting技术应用于蛋白-蛋白相互作用建立的免疫学检测方法。其操作简便,主要用于未知蛋白检测及抗原组分、抗原决定簇鉴定,同时也用于未知抗体的检测和单

如何正确选择WB检测的抗体?

WB免疫印迹法,也称免疫转移技术IBT(Immunoblotting),是Towbin将1975年Southern发明的Soutnern blotting技术应用于蛋白-蛋白相互作用建立的免疫学检测方法。其操作简便,主要用于未知蛋白检测及抗原组分、抗原决定簇鉴定,同时也用于未知抗体的

抗血清的制备

一、目的:1、了解抗血清制备的基本过程:2、掌握抗血清的收集和保存方法。二、原理:抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。一种抗原能否引起抗体生成反应,一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇(A

抗血清的制备

1、动物的选择羊、马、鸡、猴、豚鼠,都是常用的免疫动物,在实验中,选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及动物个体等因素。免疫用动物应选适龄、健壮.最好为雄性。最常用的实验动物是家兔,一般选择选择年龄在6个月以上当年繁殖的♂性,体重2 ~3公斤,

本生详解抗体的制备方法与原理

 抗血清的制备  有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。  (一)用于免疫的动物  作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如般

制备克隆实验

            试剂、试剂盒 ATP -巯基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 连接缓冲液 T4DNA 连接酶

制备克隆实验

试剂、试剂盒ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱水浴箱实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇(可选择)IPTG(100 mmol/L