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实质等同性（蛋白质组学）实验

实验材料ESI-MSMALDI - MS试剂、试剂盒提取缓冲液仪器、耗材SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验步骤众所周知，在实验室内和实验室间难以保证双向聚丙烯酰胺凝胶电泳的重复性。在我们实验室，强制性地要求严格遵守标准操作程序（sop ) , 以确保不同的操作者可以获得可重复的分离结果。小麦白面粉样品的 2D 胶图谱示例如图 16.1 所示。采用 Tris-CaCl2 提取法提取的并非“总蛋白”，而是小麦面粉中除谷蛋白之外的有代表性的蛋白样品。如果提取总蛋白，由于谷蛋白的含量很高，可能会掩盖掉其他较低丰度的蛋白质。同样的问题也可能发生在其他含有高丰度蛋白的组织中，尤其是绿色组织中存在的二磷酸核酮糖竣化酶（Rubisco) 。我们提供了三种方法。第一种是以使用 Tris-CaCl2 提取为特征的提取法，在我们实验室被用于转基因（GM ) 与非转基因（non- GM ) 小麦的实质等同性的大规模蛋白质组学研究。第二......阅读全文