醋酸钠乙醇沉淀法核酸纯化实验

实验方法原理核酸是多聚阴离子的水溶性化合物,可以与许多1价、2价离子结合形成盐类,后者在有机溶剂中不溶解也不变性.在较低温度下形成沉淀.实验材料待纯化样本试剂、试剂盒醋酸钠缓冲液无水乙醇70%乙醇实验步骤实验试剂:1. 3mol/L醋酸钠缓冲液,pH5.2:称取醋酸钠(NaAC·3H20)408.1g,由于800ml水中,用冰醋酸调节至pH5.2,加重蒸馏水至1000ml.分装后高压灭菌(以下称3mol/L醋酸钠缓冲液).2.无水乙醇及70%(V/V)乙醇.实验操作:1. 将含核酸的溶液用移液器转至一新的Eppendorf离心管,同时测量合算溶液的体积.2. 加入1/10体积的3 mol/L醋酸钠缓冲液。使醋酸钠的终浓度为0.3mo1/L.3. 下颠倒混匀后,准确加入2倍体积(RNA为2.5倍体积)的预冷无水乙醇,颠倒混匀,置冰浴中15-30 min或一20℃30 min。4. 4℃12000 r/min,离心15 min.5.......阅读全文

醋酸钠乙醇沉淀法核酸纯化实验

实验方法原理核酸是多聚阴离子的水溶性化合物,可以与许多1价、2价离子结合形成盐类,后者在有机溶剂中不溶解也不变性.在较低温度下形成沉淀.实验材料待纯化样本试剂、试剂盒醋酸钠缓冲液无水乙醇70%乙醇实验步骤实验试剂:1. 3mol/L醋酸钠缓冲液,pH5.2:称取醋酸钠(NaAC·3H20)408.1

醋酸钠乙醇沉淀法核酸纯化实验

实验方法原理 核酸是多聚阴离子的水溶性化合物,可以与许多1价、2价离子结合形成盐类,后者在有机溶剂中不溶解也不变性.在较低温度下形成沉淀.实验材料 待纯化样本试剂、试剂盒 醋酸钠缓冲液无水乙醇70%乙醇实验步骤 实验试剂:1. 3mol/L醋酸钠缓冲液,pH5.2:称取醋酸钠(NaAC·3H20)4

DNA测序醋酸钠/乙醇法纯化PCR产物

  1. 将混合物离心,将扩增产物转移到1.5 ml EP管中。  2. 加入25 μl醋酸钠/乙醇混合液,充分振荡,置冰上10 min以沉淀DNA。12 000 r/min于4℃离心30 min,小心弃上清。  3. 加70%(V/V)的乙醇50 μl洗涤沉淀2次。12 000 r/min于4℃离

乙醇在核酸纯化中的作用

DNA在乙醇的溶解度很小,可以用来提纯DNA,不过在用乙醇提纯DNA之前要需要用的氯化钠溶液,因为不同浓度的氯化钠溶液,对DNA的溶解度不同,利用DNA的这种特性,先对DNA进行提纯,到最后在用乙醇做最后的提纯。

沉淀DNA的实验——乙醇沉淀法

沉淀DNA的实验可应用于分离DNA。实验方法原理DNA 溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混 合,其乙醇的最终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代懈水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比9

乙醇沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

            试剂、试剂盒 乙酸铵 乙醇 TE 放射性标记的寡核苷酸 纯化的原料 实验步骤

乙醇沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

如果放射性标记的寡核苷酸只是用作杂交探针的话,一般不必完全除去未掺入的放射性标记物。然而,为了使本底降至最低,应该将未掺入的大部分放射性标记物与放射性标记的寡核苷酸分离。如果寡核苷酸长度超过 18 个核苷酸(本方案),则绝大部分未反应的放射性前体物质可通过乙醇分级沉淀除去。本实验来源于分子克隆实验指

乙醇沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

试剂、试剂盒 乙酸铵乙醇TE放射性标记的寡核苷酸纯化的原料实验步骤 材料溶液和缓冲液稀释贮存液至适当浓度。乙酸铵(1mol/L)乙醇TE(pH7.6)核酸和寡核苷酸放射性标记的寡核苷酸纯化的原料是方案 2(步驟 3 或步骤 5) 的反应混合液,T4 噬菌体多核苷酸激酶巳在 68°C 加热后灭活。方法

核酸分离纯化实验技术指南

 核酸分离纯化实验技术指南:      总RNA提取常见问题分析      RNA降解      1. 新鲜细胞:如果试剂没有问题,且外源性污染也可以排除,那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如  果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞,一定要使裂解液能覆盖住细胞。       2. 新鲜组织:某些富含

核酸纯化仪简介/核酸纯化仪

Nucleic Acid Extraction System是使用通用磁珠法提取核酸的高科技产品,具有自动化程度高,提取速度快,结果稳定,操作简便的优点。利用一般生化专用的96孔反应盘,可同时操作1-32个样品,可广泛应用于常规科研、基因组学、疾控系统、食品安全、法医等领域。使用本仪器只需加入样品与

纯化dna的方法有哪些

纯化DNA的常用方法是用酚抽提-乙醇沉淀法,适用于普通实验室操作。它通过交替使用苯酚、氯仿两种不同的蛋白质变性剂,可以增加去除蛋白质杂质的效果;氯仿可以去除核酸溶液中的微量酚,还可以加快有机相与液相混合,去除色素和蔗糖;在氯仿中加入少量的异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。【实验材料】待纯

乙醇分级沉淀法的原理

分级沉淀法是指在混合组分的溶液中加人与该溶液能互溶的溶剂,通过改变溶剂的极性而改变混合组分溶液中某些成分的溶解度,使其从溶液中析出。如在含有糖类或蛋白质的水溶液中,分次加入乙醇,使含醇量逐步增高,逐级沉淀出分子量段由大到小的蛋白质、多糖、多肽在含皂苷的乙醇溶液中分次加入乙醚或丙酮可使极性有差异的皂苷

核酸纯化怎样保存核酸

纯化后的核酸,最后多使用水或者低浓度缓冲液溶解;其中 RNA 以水为主,DNA 则多以弱碱性的 Tris 或者 TE 溶解。经典的 DNA 溶解方法多提倡使用 TE 溶解,认为 EDTA 可以减少 DNA 被可能残留下来的 DNase 降解的风险;如果操作过程控制得当,DNase 的残留几乎是可以忽

核酸纯化怎样保存核酸

纯化后的核酸,最后多使用水或者低浓度缓冲液溶解;其中 RNA 以水为主,DNA 则多以弱碱性的 Tris 或者 TE 溶解。经典的 DNA 溶解方法多提倡使用 TE 溶解,认为 EDTA 可以减少 DNA 被可能残留下来的 DNase 降解的风险;如果操作过程控制得当,DNase 的残留几乎是可以忽

核酸纯化怎样保存核酸

纯化后的核酸,最后多使用水或者低浓度缓冲液溶解;其中 RNA 以水为主,DNA 则多以弱碱性的 Tris 或者 TE 溶解。经典的 DNA 溶解方法多提倡使用 TE 溶解,认为 EDTA 可以减少 DNA 被可能残留下来的 DNase 降解的风险;如果操作过程控制得当,DNase 的残留几乎是可以忽

聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA实验

            实验方法原理 这种方法最早由 Richaed Treisman ( 英国,伦敦,ICRF) 参照 Lis 的工作而设计。Lis 是最早用聚乙二醇(PEG ) 分离不同大小 DNA 的人。Treisman 法被广泛用于碱裂解法制备的质粒 DNA

聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA实验

这种方法最早由 Richaed Treisman ( 英国,伦敦,ICRF) 参照 Lis 的工作而设计。Lis 是最早用聚乙二醇(PEG ) 分离不同大小 DNA 的人。Treisman 法被广泛用于碱裂解法制备的质粒 DNA 的纯化。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理这

聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA实验

实验方法原理 这种方法最早由 Richaed Treisman ( 英国,伦敦,ICRF) 参照 Lis 的工作而设计。Lis 是最早用聚乙二醇(PEG ) 分离不同大小 DNA 的人。Treisman 法被广泛用于碱裂解法制备的质粒 DNA 的纯化。实验材料 粗制质粒试剂、试剂盒 氯仿乙醇异丙醇L

核酸纯化仪应用领域/核酸纯化仪

几乎在每个实验室,与生物分子相关的分离纯化工作都是十分重要,且必不可少的。但要对多个样品进行纯化还是相当困难的,不仅需要选择合适的纯化技术,而且工作量也特别大,很难满足当前飞速发展对高通量样品进行提取纯化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取纯化系统是使用磁珠法技术,可同时操作1-32个样

核酸纯化方法

核酸抽提与纯化是分子生物学试验的基础,核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的最重要因素,也是下游分子生物学试验成败的关键。目前常见的核酸纯化方法有PC 抽提/醇沉淀方法、高盐沉淀蛋白质/醇沉淀方法、离心柱法和生物磁珠法,这几种方法各有其优势和劣势。 

无水乙醇沉淀法提取磷脂酰乙醇胺的介绍

  经丙酮萃洗后的精制磷脂,主要由卵磷脂、脑磷脂和肌醇磷脂三大部分组成。由于卵磷脂在脂肪醇中的溶解度比脑磷脂和肌醇磷脂高,可以通过脂肪醇的多次萃洗使卵磷脂富集于醇溶剂中,而脑磷脂和肌醇磷脂则留在滤饼中。准确称取一定量大豆精制磷脂,置于三口烧瓶中,加入一定比例无水乙醇,开动搅拌器,控制在所需萃取温度下

冷酒精沉淀法抗体纯化

1、 血清加3倍体积的蒸馏水,调节 pH至7.7(±)冷却到0℃。在激烈搅拌的条件下,加预冷的酒精(-20℃)到最终浓度为20%,保持在-5℃。产生的沉淀(a),含有大多数种类的免疫球蛋白。 2、 沉淀a悬浮于25倍体积的0.15~20mol/l NaCl溶液(冷)中,加有0.05mol/l醋酸调节

抗体纯化:冷酒精沉淀法

1、 血清加3倍体积的蒸馏水,调节 pH至7.7(±)冷却到0℃。在激烈搅拌的条件下,加预冷的酒精(-20℃)到最终浓度为20%,保持在-5℃。产生的沉淀(a),含有大多数种类的免疫球蛋白。2、 沉淀a悬浮于25倍体积的0.15~20mol/l NaCl溶液(冷)中,加有0.05mol/l醋酸调节

核酸纯化仪介绍

利用一般生化专用的96孔反应盘,可同时操作1-32个样品,可广泛应用于常规科研、基因组学、疾控系统、食品安全、法医等领域。使用本仪器只需加入样品与以磁珠为载体的全自动核酸提取试剂于96孔专用反应盘中,选择或编辑适当程序后执行即可。搭配不同种类的磁珠核酸试剂组,可以快速提取动植物组织、血液、体液、刑

核酸纯化仪简介

  利用一般生化专用的96孔反应盘,可同时操作1-32个样品,可广泛应用于常规科研、基因组学、疾控系统、食品安全、法医等领域。使用本仪器只需加入样品与以磁珠为载体的全自动核酸提取试剂于96孔专用反应盘中,选择或编辑适当程序后执行即可。搭配不同种类的磁珠核酸试剂组,可以快速提取动植物组织、血液、体液、

核酸纯化的原理

核酸抽提与纯化是分子生物学试验的基础,核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的重要因素,也是下游分子生物学试验成败的关键。核酸纯化的方法及原理如下:一、PC抽提法PC 抽提是去除蛋白质有效的手段,但超过了该饱和度,裂解体系中的蛋白质不会被一次去除,必须靠多次抽提,方可彻底去除。且每次抽提都会损失部分核酸

核酸纯化的原理

 核酸抽提与纯化是分子生物学试验的基础,核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的重要因素,也是下游分子生物学试验成败的关键。核酸纯化的方法及原理如下:一、PC抽提法PC 抽提是去除蛋白质有效的手段,但超过了该饱和度,裂解体系中的蛋白质不会被一次去除,必须靠多次抽提,方可彻底去除。且每次抽提都会损失部分核

核酸纯化的原理

核酸抽提与纯化是分子生物学试验的基础,核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的zui重要因素,也是下游分子生物学试验成败的关键。核酸纯化的方法及原理如下:一、PC抽提法PC 抽提是去除蛋白质有效的手段,但超过了该饱和度,裂解体系中的蛋白质不会被一次去除,必须靠多次抽提,方可彻底去除。且每次抽提都会损失部

核酸的纯化,浓缩和定量

一、核酸的纯化  在分子克隆的所有操作中,最基本的操作是核酸的纯化。其关键步骤是去蛋白质,通常只要用酚/氯仿。氯仿抽提核酸的溶液即可。每当需要把克隆有某一些所用的酶灭活或去除以便进行下一步时,可进行这种抽提。然而,如要从细胞裂解液等复杂的分子混合物中纯化核酸,则要先用某些蛋白水解酶消化大部分蛋白质后

核酸亲和层析法纯化蛋白质实验

步骤一 偶联寡核苷酸到溴化氰活化的 Sepharose 4B 步骤二 核酸亲和层析             实验方法原理 DNA 偶联至溴化氰活化的 Sepharcse 4